Диссертация (1173332), страница 10
Текст из файла (страница 10)
е.лишены двойного лучепреломления, в отличие от здоровой костной ткани (рис.42).Рис. 42. Опытная группа (1 месяц). Анизотропия костной ткани стенки дефекта,изотропность (отсутствие двойного преломления) Bio-Oss. Новообразованнаякость,вотличиеотматеринскойкости,имеетслабуюанизотропию.Поляризационная микроскопия, ув. х100.Средифрагментовматериалаотмечаетсяформированиенебольшихучастков новообразованной костной ткани, в которой четко видны остеоциты(рис. 39). Структура внеклеточного матрикса недостаточно сформирована, о чемговорит слабая анизотропия при поляризационной микроскопии (рис. 41).Показательно, что на стенках полости дефекта к этому времени такжеформируется новообразованная костная ткань (регенерат).
Она отличается отсобственной компактной кости образованием новых трабекул с увеличеннымколичеством остеоцитов и остеобластов, но еще без четкого оформленияструктуры матрикса (рис. 43).70Рис. 43. Опытная группа (1 месяц). Видны незрелые трабекулы новообразованнойкости,вцентребесклеточныйфрагментBio-Ossстрелка.Окраскагематоксилином и эозином, ув. х100.При окраске гематоксилином и эозином матрикс гомогенный, а прифазовоконтрастной микроскопии заметна его волокнистость, но нет четкогоформирования гаверсовой системы, как в зрелой кости (рис. 44).Рис.
44. Опытная группа (1 месяц). Волокнистость новообразованной кости прифазово-контрастной микроскопии. Окраска гематоксилином и эозином, ув. х200.Приполяризационноймикроскопии,вотличиеотблизлежащейсобственной кости, новообразованные участки дают очень слабую анизотропию(рис. 45).71Рис. 45.
Опытная группа (1 месяц). Слабая анизотропия новообразованной кости.Поляризационная микроскопия, ув. х200.В срезе ткань зуба и окружающая ткань. Обнаруживается дефект челюсти,заполненный фрагментами костного материала Bio-Oss. Структура фрагментовтакая же, как и в срок 1 месяц: клетки отсутствуют, ткань при стандартноймикроскопии гомогенна (рис. 46).Рис.
46. Опытная группа (3 месяца). Скопление фрагментов Bio-Oss в полостидефекта тонкая стрелка, между ними прослойки соединительной ткани толстаястрелка. Окраска гематоксилином и эозином, ув. х100.72При фазово-контрастной микроскопии и микроскопии темного поля имеетсяфибриллярный матрикс, но эти фрагменты резко отличаются от окружающихтканей (рис.
47).Рис. 47. Опытная группа (3 месяца). В этом участке при фазово-контрастноймикроскопии отмечается слабая фибриллярность фрагментов Bio-Oss ивыраженная волокнистость соединительной ткани, ув. х100.При поляризационной микроскопии они по-прежнему анизотропны. Частьфрагментов Bio-Oss подвергается резорбции макрофагами, но в основном безучастия гигантских многоядерных клеток.
При этом фрагменты Bio-Ossразделены на более мелкие фрагменты и окружены макрофагами. В другихфрагментахBio-Ossпроисходитлизисматериала,которыйначинаетокрашиваться очень слабо.Фрагменты Bio-Oss окружены соединительнотканными прослойками (рис.46).Соединительнаятканьимеетзрелыйхарактер,онасостоитизфуксинофильных коллагеновых волокон и разнообразных клеточных элементов.Среди них основными являются фибробласты, но в относительно большомколичестве имеются макрофаги и отдельные гигантские многоядерные клеткиинородных тел. В одних участках между фрагментами Bio-Oss образуется толькосоединительная ткань, в других обнаруживается уже специфическая фиброретикулярная ткань (предшественник остеогенеза) и участки остеоида.
Приполяризационной микроскопии коллагеновые волокна фибро-ретикулярной тканиприобретают анизотропию, в то время как остеоидная ткань остается изотропной(рис. 48).73Рис. 48. Анизотропия фрагментов Bio-Oss. Ув. х200.Следует отметить, что в ряде участков у стенки полости дефектаформируется новообразованная костная ткань (рис. 49).Рис. 49. Опытная группа (3 месяца). Новообразованная костная ткань на местедефекта.
Окраска гематоксилином и эозином, ув. х400.Эта ткань отличается от материнской ткани стенок полости дефектаувеличенным количеством остеобластов и остеоцитов. Гаверсова система в этойткани сформирована лучше, чем в костном регенерате на месячный срок, о чемговорит фазовоконтрастная микроскопия (рис.
50).74Рис. 50. Опытная группа (3 месяца). На фазовом контрасте полость дефектазаполнена фиброзной соединительной тканью с фрагментами Bio-Oss, ув.х400.В контрольной группе через 3 месяца полость дефекта заполненасоединительной тканью разного типа. В одних участках она плотная, зрелая,состоит из тяжей фибробластов и коллагеновых волокон (рис. 51), однако восновном полость заполнена сравнительно рыхлой соединительной тканьюфиброретикулярного типа.
В стенках полости отмечаются участки остеогенеза(рис. 52).Рис. 51. Контрольная группа (3 месяца). Полость дефекта заполнена рыхлойфибро-ретикулярной соединительной тканью, слева новообразованной костнойтканью тонкая стрелка, справа полнокровие сосудов. Окраска гематоксилином иэозином, ув. х100.Важным наблюдением является то, что в полости дефекта средисоединительной ткани остаются фрагменты Bio-Oss, которые окружаютсяновообразованной костной тканью (рис. 52).75Рис. 52.
Контрольная группа (3 месяца). Просвет заполнен фиброретикулярнойтканью (тонкая стрелка). Вокруг фрагментов Bio-Oss (толстая стрелка) видноновообразование незрелой кости двойная стрелка. Окраска гематоксилином иэозином, ув. х100.Таким образом, остеогенез идет двумя путями: 1) новообразованиемсоединительной ткани в стенках полости и 2) формированием необразованныхбалок на основе фрагментов Bio-Oss. При фазово-контрастной микроскопии (рис.53) Bio-Oss остается аморфным, окружающая ткань приобретает костнуюструктуру.Рис. 53. Контрольная группа (3 месяца. На фазовом контрасте небольшиефрагменты Bio-Oss бесструктурные (1), окружающая костная ткань волокнистая(2), соединительная ткань между балками фибриллярна ув. x100..76При поляризационной микроскопии эта незрелая ткань ещё в основномизотропна, но имеет анизотропные участки. Bio-Oss полностью изотропен (рис.
54).Рис. 54. Контрольная группа (3 месяца). При поляризационной микроскопиизрелая кость анизотропна (желтый цвет), новообразованная незрелая кость имеетучастки анизотропии, но в основном изотропна, Bio-Oss анизотропен(3), ув. x100.У другого опытного животного через 3месяца бывшая полость дефекта ужеполностью заполнена губчатой (трабекулярной) костной тканью (рис. 55).Рис.
55. Опытная группа (3 месяца). Полость дефекта заполнена трабекуламиновообразованной кости (тонкая стрелка) и немногочисленными фрагментамиBio- Oss (толстая стрелка). Окраска гематоксилином и эозином, ув. х50.77Последняя имеет характерную структуру: относительно многочисленныефрагменты Bio-Oss лишены клеток и имеют гомогенную структуру, иногда стонкими трещинами. Часть подобных фрагментов окружена соединительнойтканью, а на границе между фрагментом и этой тканью видны макрофаги игигантские многоядерные клетки, осуществляющие резорбцию материала Bio-Oss(рис. 56).Рис. 56.
Опытная группа (3 месяца). Участок предыдущего снимка, фрагментыBio-Oss окружены соединительной тканью и резорбируются макрофагами игигантскими клетками. Окраска гематоксилином и эозином, ув. х200.Однако большая часть бывшей полости занята новообразованнымикостными трабекулами, между которыми располагаются местами жировойкостныймозг,аместамирыхлаясоединительнаялимфомакрофагальной инфильтрацией (рис. 57).тканьсумеренной78Рис. 57. Опытная группа (3 месяца). Деструкция материала Bio-Oss (толстаястрелка). Новообразованные костные балки имеют четкую остеоидную структуру(тонкая стрелка).
Фазово-контрастная микроскопия, ув. х50.Часть трабекул сформирована на основе фрагментов Bio-Oss, которые ещеостаются в их центре (рис. 58).Рис. 58. Опытная группа (3 месяца). При поляризационной микроскопииновообразованные трабекулы дают умеренную анизотропию (желтый цвет),материал Bio-Oss изотропен ув. x50.Костные трабекулы дают четкую анизотропию, в отличие от материала BioOss (рис.
59).Рис.59.Опытнаягруппа(3месяца),9-йкролик.Многочисленныеновообразованные костные трабекулы (тонкая стрелка), в центре некоторыхматериал Bio-Oss (толстая стрелка). Окраска гематоксилином и эозином, ув. х100.79Рис. 60. Опытная группа (3 месяца). Выраженная анизотропия костныхтрабекул. Фрагменты Bio-Oss изотропны, ув.
х100.Через 6 месяцев в контрольной группе у животных полость дефекта ужеполностью заполнена костной тканью трабекулярной структуры (рис. 61).Рис. 61. Контрольная группа (6 месяцев). Трабекулярная кость в бывшей полостидефекта,внутритрабекулбесклеточныефрагментыBio-Oss.Окраскагематоксилином и эозином, ув. х100.Местодляформулы.Между трабекулами образовался костный мозг жирового типа.
Видны такжемногочисленные сосуды с расширенным просветом и многочисленнымиэритроцитами (стаз эритроцитов). Следует отметить, что большинство трабекулимеют в центре бесклеточное вещество – матрикс костных фрагментов Bio-Oss(рис. 62).80Рис. 62. Контрольная группа (6 месяцев). Фрагмент предыдущего рисунка, вцентре костной трабекулы бесклеточный материал Bio-Oss толстая стрелка.Окраска гематоксилином и эозином, ув. х200.Между этим матриксом и новообразованной костной тканью граница посуществу исчезает. Практически не обнаруживаются признаки резорбции Bio-Ossклеточнымиэлементами.Прифазово-контрастноймикроскопииBio-Ossотличается отсутствием какой-либо структуры, в то время как новообразованнаякость имеет типичную структуру (рис.
63).Рис. 63. Контрольная группа (6 месяцев). Фазово-контрастная микроскопияпредыдущего участка: костная ткань имеет характерную структуру, Bio-Ossбесструктурен. Ув. х200.81При поляризационной микроскопии остатки Bio-Oss по-прежнему не даютдвойного лучепреломления, который в новообразованных костных структурахеще больше усиливается по сравнению с 3-месячным сроком (рис. 64).Рис. 64. Контрольная группа (6 месяцев).
Тот же участок поляризационнаямикроскопия. Анизотропия костной ткани, изотропия Bio-Oss, ув. х200.Таким образом, к 6 месяцу в контрольной группе отмечается формированиев бывшей полости дефекта трабекулярной костной ткани на основе фрагментовBio-Oss. При этом по степени развития и зрелости эта ткань соответствует той,которая заполняет полость через 3 месяца в опытной группе.Через 6 месяцев в опытной группе полость бывшего дефекта заполненатрабекулярной костной тканью.
У животных этой группы костная ткань имеетзначительно более зрелый характер, чем в контрольной группе. Это выражается втом, что трабекулы более толстые, с правильной организацией костнойструктуры. Внутри них встречаются фрагменты Bio-Oss, но реже, чем вконтрольной группе. Однако отдельные фрагменты видны в костномозговыхполостях (рис. 65).Рис. 65. Опытная группа (6 месяцев).
Зрелая губчатая кость на месте бывшегодефекта нижней челюсти. Видны толстые трабекулы, а в костномозговыхполостях фрагменты Bio-Oss (толстая стрелка). Окраска гематоксилином эозином,ув. х100.82Отмечаются и участки компактизации костной структуры (рис. 66).Рис. 66. Опытная группа (6 месяцев). Участок зрелой компактизированнойкостной ткани. Окраска гематоксилином и эозином, ув. х100.Таким образом, в опытной группе, где наряду с Bio-Oss были использованыМСК, остеогенез в полости дефекта значительно опережает контрольную группу.К 6 месяцу полость заполняется зрелой трабекулярной костью с жировымкостным мозгом. В контрольной группе полость дефекта также заполнятсятрабекулярной костью, но менее зрелой, причем новообразованные трабекулы вэто время формируются еще на фрагментах Bio-Oss.Результаты рентгенологических исследованийКомпьютерная томография проводилась экспериментальным животным ваксиальной, сагиттальной и фронтальной плоскости с построением 3D модели.Измерялась плотность губчатой кости HU (единиц Хаунсфилда) в толще нижнейчелюсти справа и слева на уровне верхушек 2 и 3 зубов, на расстоянии 3 мм откортикальной пластины, площадью измерения в 1 мм2, толщиной слоя в 1 мм(рис.