Диссертация (1173216), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Преобразование сигнала состоит в егодискретизации с последующей записью распределения фаз в виде цифровойматрицы ax,y, размером mxn, где m – число строк, n – число столбцов.Значения ax,y представляют собой оптическую толщину объекта Н в точке скоординатами x,y:H(X,Y)=[n(x,y)-nc]´h(x,y),где n(x,y) – показатель преломления, h(x,y) – физическая толщина внаправлении Z, nc – показатель преломления среды (Рис.
2).42АВРисунок 2 - Аппаратно-программный комплекс БИОНИ, модуль дляморфометрическихцитологическихисследований«Биони-КФМ»(А),оптическая схема (В).Результат обратного преобразования цифрового массива в видимоеизображение и восстановление фазового портрета объекта отображался наэкране монитора компьютера. Количественный анализ данных производилиотдельно с помощью программных средств, разработанных в средеMATLAB.Интерферограммыизображенияклеток.Дляобрабатываликаждойиклеточнойсохранялипопуляциифазовыеоценивалиморфометрические параметры: средние значения диаметра, периметра,высоты, площади и объема клеток. Результаты расчетов представляли в видетаблицы параметров каждого объекта и серии графиков.ГетерогенностьпопуляцииоценивалипоИА-индексуасимметричности (Skewness) [Власов В.В., 2001].
Его значение стремится кнулю в том случае, когда распределение в группе является симметричным(нормальным);высокоезначениепараметрасвидетельствуетонеравномерности распределения.Ядерный полиморфизм циркулирующейпопуляции лимфоцитов характеризовали с использованием показателя43функциональной активности ядра (FAN – functional activity of the nucleus) каквеличины обратно пропорциональной фазовой высоте (PH) каждой клетки ввыборке по формуле:FAN=(3*n3+2*n2+n1+0*n0)/n,где FAN — функциональная активность ядра; n3 – количество клеток с PH≤1,5мкм; n2 – с PH >1,5, но ≤2мкм; n1 – с PH >2, но ≤2,5мкм; n0 – с PH >2,5; n– число клеток в выборке.
Таким образом, чем выше анизотропия хроматинаи, соответственно, фазовая высота, тем ниже активность ядра.Также для более детальной оценки ядерного полиморфизма на основеанализа конформационных изменений ядерного хроматина лимфоцитовциркулирующей популяции использовали технологию денситометрическойсегментации ядер.
В качестве информативных параметров анализировали:- относительную интенсивность сегментов ядра (∆I) - величину,обратную оптической плотности (отношение значения интенсивности длякаждойсегментированнойобластикмаксимальномузначениюинтенсивности);-относительное(отношениемедианырасстояние(∆L)расстояниймеждумеждуцентрамицентрамисегментовсегментовкмаксимальному значению расстояний);- количество (N) сегментов по площади ядра;- периметр (P) ядер в пикселях (пикс).Метод проточной цитофлюорометрии лимфоцитовИммунофенотипическое исследование образцов периферической кровипроводили методом 4-цветной лазерной проточной цитометрии (2-хлазерный проточный цитофлюориметр FACS Calibur (Becton Dickinson,США) с использованием программного обеспечения «CellQwest».Подготовка проб для цитометрического анализа осуществлялась побезотмывочнойтехнологии.Лизисэритроцитовпроводилсяс44использованиемрабочеголизирующегораствораFACSLyse(BectonDickinson, USA).
Использовали следующие МАТ фирмы «Becton Dickinson»:CD3, CD4, CD8, CD16.В качестве флюорохромной метки использовали флюоресцеинизотиоционат (FITC) и фикоэритрин (РЕ). Процедуру окрашивания ификсации клеток проводили стандартным способом в соответствии суказаниямифирмы-разработчика.моноклональнымиантителамиОбразцыопределеннойинкубировалисспецифичности,конъюгированными с флюоресцентными красителями (Becton Dickinson,USA) при комнатной температуре в течение 30 мин в темноте. Припроведении проточной цитометрии клетки использовали в конечнойконцентрации 1x106.2.5 Методы статистической обработки результатовСтатистический анализ экспериментальных и клинических данныхпроводили с помощью алгоритмов среды MatLab и стандартного пакетаприкладных программ SPSS Statistics 21.0.Все полученные в исследовании количественные анамнестические,клинические, инструментальные и лабораторные данные были обработаныметодом вариационной статистики.Для каждого количественного параметра были определены: среднеезначение (М), среднеквадратичное отклонение (δ), ошибка среднего (m).
Принормальном характере распределения данных результаты представлены каксреднее ± стандартная ошибка среднего (М±m).Сравнение показателей по количественным признакам осуществлялинепараметрическим методом с использованием U-критерия Манна-Уитни.При сравнении двух групп с нормальным характером распределения данныхиспользовали t-тест для независимых группировок при условии совпадениядисперсий. При распределении данных, отличных от нормального (значениетеста Колмогорова – Смирнова менее 0,05), исследованные количественные45показатели представлены в виде Ме (L–H), где Ме – медиана, L – 25(нижний) квартиль, H – 75 (верхний) квартиль.Для всех видов анализа статистически значимыми считали различияпри р<0,05.46ГЛАВА 3. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХБОЛЬНЫХОбследовано 118 больных с эндометриоидными кистами яичников,которые были разделены на 3 группы: первую группу составили 36пациенток, которым проводилось только хирургическое лечение, вторую –42, которым после оперативного вмешательства рекомендован непрерывныйприем диеногеста в дозе 2 мг в течение 12 мес, в третью включены 40больных, которым после лапараскопической цистэктомии был назначенагонист ГнРГ (Бусерелин-лонг) в дозе 3,75 мг.
1 раз в 28 дней в/м - 3инъекции (Рис. 3).30,533,91235,63Рисунок 3 - Распределение больных по основным клиническим группам (%):1 - только хирургическое лечение; 2 – послеоперационная терапиядиеногестом; 3 - послеоперационная терапия агонистом ГнРГ БусерелинлонгВозраст больных колебался от 21 до 37 лет, средний составил 26,4±3,6лет.
30 практически здоровых небеременных женщин фертильного возраста(средний возраст 28,7±3,6 лет) были включены в контрольную группу.У больных во всех возрастных группах чаще диагностировалиэндометриомы левого яичника (20-50%) или двусторонние эндометриомы(37,5-75%). Эндометриомы правого яичника в обеих исследуемых группахнаблюдались значительно реже (5-21%). Распределение обследованныхпациенток по возрасту с указанием локализации эндометриоидных кистпредставлено в таблице 1.47Таблица 1 - Распределение больных по возрасту (n=118)Лапароскопическаяцистэктомия (n=36)Локализацияэндометриоидных кист20-30 лет(n=20)Абс.%31-40 лет(n=16)Абс.%Лапароскопическаяцистэктомия + диеногест(n=42)20-30 лет31-40 лет(n=19)(n=23)Абс.%Абс.%Лапароскопическаяцистэктомия + Бусерелин-лонг(n=40)20-30 лет31-40 лет(n=17)(n=23)Абс.%Абс.%ЭК правого яичника315,0212,5421,1417,425,0512,5ЭК левого яичника945,0850,0736,81043,5820,0820,0840,0637,5 842,1939,1775,0Таблица 2 - Частота различной локализации эндометриоза у обследованных больных (n=78)1067,5Двусторонние ЭКЛокализация эндометриозаЛапароскопическаяцистэктомия (n=36)Лапароскопическаяцистэктомия + диеногест(n=42)Абс.%Абс.%Эндометриоз тазовой брюшины1233,31638,1Эндометриоз крестцово-маточных связокЭндометриоидная киста правого яичника25,637,1513,9819,0Эндометриоидная киста левого яичника171447,238,9171740,540,5Эндометриоидные кисты обоих яичниковЛапароскопическаяцистэктомия + Бусерелинлонг (n=40)Абс.%1537,5275,017,51640,01742,548Следует отметить, что помимо эндометриоидных кист яичников уобследованных больных наблюдались другие локализации.
Среди нихпреобладал эндометриоз тазовой брюшины, который был выявлен у третипациенток (Таблица 2).Мы отметили достаточно высокую вариабельность клиническихпроявлений эндометриоза у обследованных пациенток.Впервуюочередь,обращаловниманиепсихо-эмоциональноесостояние пациенток: 66,9% проявляли эмоциональную нестабильность,плаксивость, раздражительность, предъявляли жалобы на неустойчивоенастроение, депрессию, нарушение сна.Нарушениямиобщегосамочувствиястрадалипрактическивсеженщины, жалуясь на общую слабость, потливость, плохое настроение,снижение трудоспособности.При опросе было выяснено, что около 75% женщин испытывалинедомогание, 79% - повышенную утомляемость и немотивированнуюслабость (72%), у 58% пациенток наблюдалась бессонница.Взяв за основу классификацию Л.В. Адамян и Е.Н.
Андреевой (1997),мы установили, что 55 (46,6%) указывали на нарушение общего состояния,приводящее к снижению трудоспособности в течение 1 – 2 часов в день (Iстепени (О1)). 45 больных (38,1%) были отнесены к группе О2 (нарушениеобщего состояния II степени) со снижением трудоспособности за 1 – неделив течение половины дня. Снижение общей трудоспособности в течениеполного трудового дня на протяжении недели, не связанное с другимипричинами, было выявлено у 18 (15,3%), что расценивалось как нарушениесостояния III степени (О3).Анализ менструальной функции показал, что наиболее характернымпризнаком у больных с эндометриомами были болезненные менструации(Таблица 3).Нерегулярные менструации отмечались у трети пациенток. Послехирургического лечения наблюдалось улучшение менструальной функции.49На фоне гормональной терапии у всех больных наступала аменорея.
В группепациенток, принимавщих гестагены (диеногест), отмечалась достоверноболее выраженная положительная динамика. Тогда как у больных,получавших аГнРГ (Бусерелин-лонг), концу первого года после отменыпрепарата,былзарегистрированвозвратклиническихсимптомовзаболевания.Основной причиной обращения пациенток за медицинской помощьюявлялось первичное бесплодие, которое встречалось более чем у 45%женщин (Таблица 4).Большинство из них предъявляли жалобы на дисменорею и бесплодие,треть - беспокоили тазовые боли и нарушения менструального цикла(Таблица 5).В таблице 6 представлены УЗИ-признаки эндометриоидных кистяичников обследованных женщин.В обеих группах наблюдался регресс клинической симптоматики,однако в группе пациентов, получавших диеногест после оперативноголечения,уменьшениевыраженностисимптомовзаболеваниябылостатистически достоверно более значимо по сравнению с группойлапароскопической цистэктомии.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
