Диссертация (1173216), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Не21исключено, что основную роль в патогенезе ЭМ играет именно субпопуляцияМ1.Такжемакрофагимогутдополнительноспособствоватьраспространению и инвазии эндометриальных стромальных клеток черезмеханизм подавления синтеза IL-24 и экспрессии рецептора IL-22R1 IL-24[139, 145].Определеннуюрольвиммунопатогенезеэндометриозаиграютнейтрофилы.
Отмечено значительное увеличение процента нейтрофильныхлейкоцитов в перитонеальной жидкости у женщин с эндометриозом(особенно при малых формах ЭМ), повышение лизосомальной активности ипоказателей НСТ-теста, что может свидетельствовать о повышеннойфункциональной активности клеток. Возможно, что активация нейтрофиловв этих случаях демонстрирует сохранность иммунологического контроля иактивную реакцию иммунной системы заброс клеток эндометрия [19, 20].
Обизменении функционального состояния этих клеток в отличие от здоровыхтакже свидетельствует и более медленная скорость их апоптоза [90, 103].При исследовании лимфоцитарного звена зарегистрированы снижениереактивностиТ-клеток,поликлональнаяувеличение продуцированияактивацияВ-лимфоцитовиантител. Наличие аберрантной функциилимфоцитов перитонеальной жидкости при эндометриозе убедительнодоказано в многочисленных работах отечественных и зарубежных авторов.Так, методом проточной цитометрии в перитонеальной жидкости пациентокс эндометриозом выявлено снижение содержания лимфоцитов с фенотипомCD4+, CD25+, CD103+, CD11c+, а также ранних антигенов активации Тклеток, таких как CD45RA/CD45RO, CD-69 и поздних активационныхантигенов, таких как HLA-DR.
В то же время количество CD8+CD28- Tлимфоцитовоставалосьвзначительнойстепенинеизменным.Сравнительный анализ фенотипических характеристик лимфоцитов упациенток на ранних (I/II стадии) и поздних (III/IV стадии) этапахэндометриоза не выявил значимых изменений между данными клиническимигруппами [6, 98, 101].22Количественные, фенотипические и функциональные изменения NK вперитонеальной жидкости при ЭМ подтверждены многими исследователями.Вбольшинствеработпродемонстрированоуменьшениесодержанияцитотоксических NK-клеток в перитонеальной жидкости при ЭМ, котороесопровождается и снижением их функциональной активности [108, 149]. Утаких пациенток в общей популяции NK-клеток с фенотипом (CD32CD56+)увеличивается доля незрелых клеток (CD272CD11b2). Функциональныедефекты NK при ЭМ находят отражение в снижении клеточного уровнягранзима B, перфорина, TRAIL, маркеров цитотоксичности, включаяприродные рецепторы NKp46, NKp44 и NKG2D, CD16 (маркер клеточнойповерхности), CD107a (маркер дегрануляции) и CD69 (маркер активации)[108].
Выявлена прямая зависимость между уровнем цитотоксичности NK итяжестью заболевания: общая цитотоксичность NK-клеток перитонеальнойжидкости, выраженная в процентах, у здоровых женщин составляет79,38±2,13, при эндометриозе I/II стадии отмечено снижение показателя до75,55±2,89%, а при III/IV стадии – до 63,88±5,75% [81].Не исключено, чтомеханизм подавления цитолитической активности NK-клеток у пациенток сэндометриозом связан с повышенным уровнем интерлейкина-6 (ИЛ-6) вперитонеальной жидкости, который регулирует состояние цитолитическихгранул, таких как гранзим B и перфорин, посредством модуляции белкатирозинфосфатазы-2 (SHP-2).ВотношенииTregsустановлено,чтопроцентCD4+Foxp3+регуляторных Т-клеток значительно увеличивается в перитонеальнойжидкости женщин с эндометриозом [72].
Увеличивалась экспрессия Tregинтерлейкина-10 (IL-10), трансформирующего фактор роста-β (TGF-β) иCD73, снижалась активность апоптоза Treg за счет подавления экспрессииFas и FasL. Изменение количества и функции Tregs в эктопической средеспособствует эндометриотической иммунотолерантности, высокому уровнюпролиферации и инвазии эктопических клеток эндометрия, тем самымоблегчая прогрессирование эндометриоза [72, 134, 148].23Приведенныерезультатыисследованийсвидетельствуют,чтоаберрантный иммунный ответ, реализуемый клеточными компонентамиперитонеальной жидкости, по-видимому, имеет решающее значение длявозникновенияипрогрессированияэндометриоза,посколькумикроокружение не обеспечивает необходимого уровня цитотоксичности иапоптоза эктопических клеток эндометрия.
Страдают не только компонентыврожденного, но и адаптивного иммунитета. Однако молекулярныемеханизмы нарушений иммунологических взаимосвязей и комбинаторикиостаются не до конца изученными, особенно в контексте возможностицеленаправленного воздействия на то или иное аберрантное звено дляпрерываниякаскадапатологическихреакцийивосстановленияфункциональности. В связи с этим остро встает вопрос о поискеинформативныхбиомаркеров,способныхсократитьпроцессдиагностического поиска, способствовать своевременному назначениюадекватного лечения, оценить его эффективность и выявить рецидивзаболевания.
Наиболее изученным источником биомаркеров являетсяпериферическая кровь. В последние годы проводится широкомасштабныйпоиск биомаркеров среди клеточных компонентов периферической крови наосновании их роли в патогенезе эндометриоза [68, 121].При изучении состояния системных компонентов иммунной системы убольныхЭМбылиморфофункциональногоопределенысостояниясущественныеклеточныхэлементовизмененияиммунитета,отвечающих за так называемые «надзорные функции», в частности,особенности субпопуляционного состава лимфоидных клеток, уровеньцитотоксической активности NK-клеток, механизмы функционирования Тreg и др.Следует признать, что исследование субпопуляционного составалимфоцитов периферической крови не является достаточно специфичным иинформативным для эндометриоза.24Так, было установлено, что в периферической крови у женщин с ЭМзначительно возрастает содержание активированных Т-лимфоцитов, включаяТ-клетки с фенотипом СD4+DR+, СD16+ (натуральные киллеры), а также Влимфоциты.
В то же время снижается процент зрелых Т-лимфоцитов,неактивированных Т-хелперов и больших гранулярных лимфоцитов (CD56+)[4, 5, 37].При анализе иммунологического профиля у пациенток с I/II стадиямиЭМ зарегистрировано снижение в периферической крови относительногоколичества Т-лимфоцитов CD3+, Т-хелперов CD4+ и иммунорегуляторногоиндекса (Тх/Тс), а также повышение относительного количества NKлимфоцитов с фенотипом CD3+CD16+CD56+, абсолютного количества Тцитотоксических CD8+. Возможно, что снижение относительного числаCD3+ клеток может быть связано с перераспределением Т-лимфоцитов и ихмиграцией в очаги эктопического роста эндометрия.
При III/IV стадияхвыявлено повышение относительного количества CD3+, CD4+, снижениеотносительногоколичестваиммунорегуляторногоиндекса.CD3+CD16+CD56+,Такимобразом,повышениеувеличениестадиизаболевания, по мнению авторов, может характеризоваться повышениемотносительногосодержанияТ-лимфоцитов,Т-хелперовииммунорегуляторного индекса, снижением относительного количества NK[19].Однако имеются и несколько противоречивые результаты по данномувопросу. В частности, при исследовании в периферической крови уровнейклеток, экспрессирующих антигены CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD45,CD16, CD23, CD45RA/CD45RO, CD-69 и HLA-DR, не было выявлено какихлибо существенных различий среди пациентов с ЭМ на ранних и позднихстадиях заболевания [75]. Значимые изменения из всех иммунологическихпоказателей у пациенток с ЭМ в отличие от практически здоровых женщинбыли зарегистрированы только в отношении числа CD3+ лимфоцитов (60,0против 65,5, p> 0,05) [37].25Также у пациенток с ЭМ по отношению к нормальным значениям быловыявлено снижение количества лимфоцитов, экспрессирующих CD95+(Fas/Apo-1) антиген – трансмембранный гликопротеин из семействарецепторов к фактору некроза опухолей α.
Данный сигнальный маркерхарактеризует готовность лимфоцитов реализовать физиологический истандартный для большинства клеток организма путь программированнойклеточной гибели по Fas-зависимому механизму. Процесс активационноиндуцированного апоптоза является одним из ключевых и отражаетантигенспецифическую составляющую иммунной системы и реализацию ееэффекторных функций.Установлено, что с увеличением стадии ЭМ достоверно снижаетсяабсолютный и относительный уровень лимфоцитов с готовностью кактивационно-индуцированному апоптозу (CD95+) и увеличивается процентлимфоцитов,экспрессирующихрецепторыпозитивнойинегативнойактивации (CD25/CD95). Данный факт может отражать наличие избыточнойантигенной стимуляции клеток иммунной системы, приводящей к активацииТ- и В-лимфоцитов, нарушению клеточной регуляции и ингибированию Fasзависимого апоптоза [37, 90, 98].
Не исключено, что антиген CD95 можетоказаться маркером, указывающим на прогрессирование заболевания.Однако этот вопрос требует дальнейшего детального изучения.Одним из альтернативных подходов к поиску клеточных биомаркеровдля диагностики ЭМ является использование, так называемых технологий«omics» (геномика, протеомика, метаболомика, эпигеномики и др.) [68, 100,121]. Методом количественного фазового имиджинга (QPI) была изученаструктурно-пространственная организации интерфазного хроматина ядерCD4+, CD8+ лимфоцитов периферической крови больных эндометриозом.Сравнительный анализ морфоденситометрических параметров CD3+клетоксоматическиздоровыхпродемонстрировалнебеременныхстатистическиженщинзначимоеипациентокповышениесЭМпоказателяфункциональной активности ядер (FAN) лимфоцитов (0,898 против 0,783,26p<0,05), для CD4+лимфоцитов выявлены признаки активации (2,05-2,17против 1,88); в CD8+популяции значимых изменений не обнаружено.Интерфазный хроматин можно рассматривать в качестве перспективногобиосенсора, поскольку параметры модификации структуры и плотности егоупаковки отражают особенности морфологии и функциональной активностииммунокомпетентной клетки [12, 25, 51, 97, 105].
Такой подход актуален дляранней доклинической диагностики, оценки тяжести патологическогопроцесса и прогноза течения заболевания. Совершенствование технических ипрограммных возможностей компьютерной интерферометрии живых клетокпозволитвперспективеширокоиспользоватьметодыимиджингаинтерфазного хроматина в практической гинекологии для получениядетальной информации о состоянии клеточного звена иммунитета и степенивовлечения в патологический процесс иммунокомпетентных клеток приэндометриозе.На системном уровне, как и на локальном, отмечено характерное дляэндометриозаизменениецитотоксическойактивностиNK-клеток,свидетельствующее о нарушении функции иммунного надзора. В патогенезеэндометриоза эти клетки, несомненно, играют одну из ведущих партий.NK-клетки представляют собой гетерогенную популяцию и являютсяпервой линией защиты, обладая естественной цитолитической активностью,способностью продуцировать цитокины и хемокины, и участвуя впротивовирусномбольшинстваипротивоопухолевомNK-клетокхарактеренконтролефенотипорганизма.ДляCD56+16+CD2+CD3-.Различают CD56dim с более выраженной цитотоксической активностью ивысокими уровнями иммуноглобулиноподобных NK-рецепторов и FCрецепторов III (CD16) и CD56bright - продуцентов цитокинов (IFN-γ и TNFα),проявляющихболеенизкуюестественнуюцитотоксичностьихарактеризующихся низким уровнем (или отсутствием) FC-γрецептор CD16[76, 156].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
