Диссертация (1173216), страница 10
Текст из файла (страница 10)
По оси ординат – процент клеток% по оси абсцисс – величинапоказателя.7030262824262224202218201618141614121210108866442200456789101112131214141618202224262830323436384042PDDP24282226242022182016181416121412101088664422000,81,01,21,41,61,82,02,22,42,62,83,003,2102030405060708090VHHA40353025201510500102030405060708090100AVРисунок 8 - Гистограммный анализ лимфоцитов периферической кровипациенток с эндометриомами, обследованных через 6 месяцев послецистэктомии на фоне лечения гестагенами (диеногестом) (Группа 2) повеличине морфоденситометрических показателей: диаметра (D), периметра(P), высоты (фазовой толщины) (H), площади (A) и объема (V).
По осиординат – процент клеток% по оси абсцисс – величина показателя.7130502845262440223520183016251412201015861045200345678910111212131416182022242628303234PDDP3024282226202418222016181416121410121088664422000,40,60,81,01,21,41,61,82,02,22,42,62,853,010152025303540455055606570AHHA35302520151050-505101520253035404550VVРисунок 9 – Гистограммный анализ лимфоцитов периферической кровипациенток с эндометриомами, обследованных через 6 месяцев послецистэктомии на фоне лечения аГнРГ (Бусерелин-лонг) (Группа 3) повеличине морфоденситометрических показателей: диаметра (D), периметра(P), высоты (фазовой толщины) (H), площади (A) и объема (V).
По осиординат – процент клеток% по оси абсцисс – величина показателя.72304528402624352220301825161420121015810645200345678910111212131416182022D242628303234P2430282226202418222016181416121412101088664422000,40,60,81,01,21,41,61,82,02,22,42,62,851015202530H3540455055606570A302826242220181614121086420-505101520253035404550VРисунок 10 - Гистограммный анализ лимфоцитов периферической кровипациенток с эндометриомами, обследованных через 6 месяцев послецистэктомии (Группа 4) по величине морфоденситометрических показателей:диаметра (D), периметра (P), высоты (фазовой толщины) (H), площади (A) иобъема (V). По оси ординат – процент клеток% по оси абсцисс – величинапоказателя.735035304025302015201010504567891011012121416182022D242628303234PDP3060282650242220401816301412102086104200,60,81,01,21,41,61,82,02,22,42,62,83,03,23,403,6010203040H5060708090AHA454035302520151050-100102030405060708090100110120130VVРисунок 11 - Гистограммный анализ лимфоцитов периферической кровипациенток с эндометриомами, обследованных через 12 месяцев послецистэктомии на фоне лечения гестагенами (диеногестом) (Группа 5) повеличине морфоденситометрических показателей: диаметра (D), периметра(P), высоты (фазовой толщины) (H), площади (A) и объема (V).
По осиординат – процент клеток% по оси абсцисс – величина показателя.7440453540353030252520201515101055004,04,55,05,56,06,57,07,58,08,59,09,510,010,51011,01214161820D35303025252020151510105500,40,60,81,01,21,41,61,8242628303234P350,222PD2,02,22,42,62,83,03,203,4051015202530H35404550556065707580AHA403020100-100102030405060708090100VVРисунок 12 - Гистограммный анализ лимфоцитов периферической кровипациенток с эндометриомами, обследованных через 12 месяцев послецистэктомии на фоне лечения аГнРГ (Бусерелин-лонг) (Группа 6) повеличине морфоденситометрических показателей: диаметра (D), периметра(P), высоты (фазовой толщины) (H), площади (A) и объема (V). По осиординат – процент клеток% по оси абсцисс – величина показателя.75353025201510501214161820D22242628303234P60302826502422402018163014122010861042000,60,81,01,21,41,61,82,02,22,42,602,810203040H5060708090A302826242220181614121086420051015202530354045505560VРисунок 13 - Гистограммный анализ лимфоцитов периферической кровипациенток с эндометриомами, обследованных через 12 месяцев послецистэктомии (Группа 7) по величине морфоденситометрических показателей:диаметра (D), периметра (P), высоты (фазовой толщины) (H), площади (A) иобъема (V).
По оси ординат – процент клеток% по оси абсцисс – величинапоказателя.76Представленныеданныепродемонстрироваливозможностьпрактического применения дифференциально-диагностических критериевизменения оптических свойств внутриклеточных структур клеток иммуннойсистемы в процессе динамического наблюдения за состоянием лимфоцитовбольных с эндометриомами для проведения ранней диагностики рецидивазаболевания в послеоперационном периоде.Фазовую визуализацию ядра лимфоцита и особенности организацииядерногохроматина,полученныеспомощьютехнологииденситометрической сегментации, иллюстрирует рисунок 14.АВРисунок 14 – Фазовая визуализация ядра лимфоцита периферической крови врежиме «фото» (А) и оценка гетерогенности ядерного хроматина сиспользованием технологии денситометрической сегментации на основеалгоритма обработки «водораздел» (В).На рисунке 15 представлены характерные особенности распределенияхроматина в ядрах лимфоцитов, зарегистрированные с использованиемтехнологииденситометрическойалгоритмовобработкиводораздел и области).сегментацииполученныхданныхнаоснове(уровни,различныхкластеризация,77КонтрольЭндометриомы (до оперативного лечения)Рисунок 15 - Денситометрическая сегментация ядер лимфоцитов на основеразличныхалгоритмовобработкикластеризация, водораздел и области).полученныхданных(уровни,78На рисунке 16 представлена динамика конформационных измененийядерного хроматина у обследованных пациенток в группах сравнения,оцененнаясиспользованиемкритериевморфоденситометрическойсегментации.В ядрах лимфоцитов больных с эндометриомами до оперативноголечения по сравнению с контрольной группой отмечены увеличенныепоказатели относительной интенсивности сегментов ядра (∆I), т.е.
величины,обратной оптической плотности. Данный показатель позволяет оценитьконформационные изменения ядерного хроматина в различных областяхклеточного ядра, а именно более плотные или более рыхлые его участки. Убольных, получавших в послеоперационном периоде диеногест (группы 2 и5) величина ∆I на сроках 6 и 12 месяцев практически приближалась кнормальным значениям.В группах 3 и 6 после терапии аГнРГ Бусерелин-лонг величина ∆Iтакже снижалась, однако, несколько в меньшей степени. Аналогичныеизменения наблюдались и в ядрах лимфоцитов у пациенток в группах 4 и 7.Показатель относительного расстояния между центрами сегментовклеточных ядер (∆L) отражает динамику распределения зон различнойплотности хроматина: увеличение функциональной активности лимфоцитанапрямуюсвязаносростомпоказателяиширокойградациейконформационных изменений ядерного хроматина.До оперативного лечения у больных с эндометриомами величина ∆Lсоставила 0,565 против значений 0,526 в группе контроля. Увеличениеданногопоказателясвидетельствуетовыраженнойнеоднородностихроматина в различных областях ядер лимфоцитов, появлении большогоколичества сегментов с различной оптической плотностью и хаотичнымхарактером их распределения по площади ядра клетки.
Такое состояниеядерного хроматина отражает повышенную синтетическую активностьисследуемых лимфоцитов.790,650,570,560,550,540,530,520,510,50,60,550,50,450,4А108642В420390360330300270КонтрольГруппа 1Группа 2Группа 3Группа 4Группа 5Группа 6Группа 7СDРисунок 16 – Результаты оценки конформационных изменений ядерного хроматина с использованием технологииденситометрической сегментации у пациенток с эндометриомами до и после медикаментозного лечения: А относительная интенсивность сегментов ядра (∆I); В - относительное расстояние (∆L) между центрами сегментов; С количество (N) сегментов по площади ядра; D - периметр ядер лимфоцитов (пикс). Группа 1 - больные сэндометриомами до оперативного лечения; группа 2 - больные с эндометриомами через 6 месяцев после цистэктомии нафоне лечения гестагенами (диеногестом); группа 3 - больные с эндометриомами через 6 месяцев после цистэктомии нафоне лечения аГнРГ (Бусерелин-лонг); группа 4 – больные с эндометриомами через 6 месяцев после цистэктомии;группа 5 - больные с эндометриомами через 12 месяцев после цистэктомии на фоне лечения гестагенами (диеногестом);группа 6 - больные с эндометриомами через 12 месяцев после цистэктомии на фоне лечения аГнРГ (Бусерелин-лонг);группа 7 – больные с эндометриомами через 12 месяцев после цистэктомии.80В процессе лечения наблюдается нормализация величины ∆L, котораядостигает практически нормальных значений к 12 месяцу наблюдения снезначительным увеличением в 6 и 7 группах.О гетерогенности ядерного хроматина также можно судить поколичеству выявленных сегментов в области ядра.
У пациенток сэндометриомамиколичестворегистрируемыхсегментов,всреднем,составило 8,43, что в 1,4 раза превышает данные группы контроля. В группах2, 3 и 4 количество определяемых программой сегментов снижается до 6,89,7,3 и 7,32, соответственно. В то же время к 12 месяцу послеоперационногопериода у женщин в группах 6 и 7 отмечена тенденция к увеличениюколичества сегментов в ядре (7,01 и 7,02, соответственно).Величина периметра ядер в группе контроля составила 353,6±11,4 пикс,у женщин с эндометриомами (группа 1) установлены более высокие значенияэтого показателя - 396,8±20,1 пикс.
После проведения оперативного леченияв группах 2 и 5 (терапия диеногестом в течение 6 и 12 месяцев), периметрядер лимфоцитов составил 341,2±18,3 и 346,5±32,3 пикс, соответственно.В то время как у больных в группах 3 и 6, получавших Бусерелин-лонгнапротив, оказался несколько выше (349,2±28,1 и 365,4±31,2 пикс,соответственно). В группах 4 и 7 - 348,4±35,3 и 363,2±37,1 пикс,соответственно.При анализе частоты рецидива заболевания у обследованных намипациенток, получавших различное послеоперационное лечение, быловыявлено, что частота безрецидивных случаев в группах 2 и 5 к 6 и 12месяцам наблюдения составила 97,6% и 97,6%.