Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1155054), страница 26

Файл №1155054 Диссертация (Получение и стандартизация эритроцитарных носителей, инкапсулированных терпено-индольными алкалоидными противоопухолевыми препаратами) 26 страницаДиссертация (1155054) страница 262019-09-14СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 26)

Кумулятивное высвобождение VLB сульфата из различных эритроцитарных форм (ЭФ) после 6 ч. in vitroВид ТИАинкапсулированныхЭФКоличество высвобожденного VCR сульфата после инкубации 6ч. in vitro (37 0C)% (ср. знач.)Метрологическая характеристикасредного результатаn =3, f =2s2 =37,25161VLB= 68,07VLB: PEG 4000 - 1:10= 63,89VLB: PEG 4000 - 1:20= 60,75VLB: PEG 400- 1:20= 60,35VLB: ДМСО – 2 мг/мл= 64,50SD = 6,01RSD = 0,090Х ± ∆х = 68,07± 14,55%(P- 95%)ξ= 21,38 %n =3, f =2s2 =8,02SD = 2,83RSD = 0,044Х ± ∆х = 63,89± 6,75%(P- 95%)ξ= 10,56 %n =3, f =2s2 = 6,56SD = 2,56RSD = 0,0422Х ± ∆х = 60,75 ± 6,11%(P- 95%)ξ= 10,053 %n =3, f =2s2 = 9,52SD = 3,09RSD = 0,0511Х ± ∆х = 60,35 ± 7,36 %(P- 95%)ξ= 12,19%n =3, f =2s2 = 13,82SD = 0,644RSD = 0,0685Х ± ∆х = 64,50 ± 1,91%(P- 95%)ξ= 2,97%Профили высвобождения исследованных ТИА препаратов для всех эритроцитарных форм характеризуются наличием области интенсивного высвобождения действующих веществ и областью, в которой высвобождение замедляется.Согласно результатам, представленным на рисунке 6.8 и в таблице 6.8 видно, чтовысвобождение инкапсулированных ТИА препаратов из эритроцитарных носителей составляет в среднем значении VCR - 54,93± 3,29%, VCR:ПЭГ 4000 1:5 53,33 ± 2,60%, VCR: PEG 4000 1:10 - 40,13 ± 4,74%, VCR: ПЭГ4000 1:20 - 39,99 ±2,86 %, VCR: ДМСО 2 мг/мл - 54,24 ± 8,87%, VLB - 68,07% ± 14,55; VLB: PEG4000 1:10- 63,89% ± 6,75; VLB: PEG 4000 1:20- 60,75% ± 6,11; VLB: PEG 4001621:20- 60,35% ± 7,63; VLB: ДМСО 2 мг/мл - 64,50% ± 1,91 от инкапсулированныхв эритроцитарных формах за отмеченный период времени в 6 часов.

Относительная погрешность среднего результата (ξ) не превышала 21,38%.Рис. 6.8. График зависимости высвобождения VLB сульфата из различных эритроцитарных форм in vitro (37 0С) от времениа.- Кумулятивное высвобождениеVCR сульфата (мкг) (m – ср. знач.± SD); б.- % (– ср.

знач.±SD) выражение от инкапсулированнго количества препарата в ЭН.На основе полученных результатов рассчитывали среднюю скорость высвобождения ТИА из загруженных эритроцитов. Результаты представлены втаблице 6.9.Таблица 6.9. Скорость высвобождения ТИА препаратов из инкапсулированныхЭНМетод получения иммобилизованной эритроцитарной формыVCRVCR: PEG 4000 - 1:5VCR: PEG 4000 - 1:10VCR: PEG 4000 - 1:20VCR: ДМСО – 2 мг/млVLBVLB: PEG 4000 - 1:10VLB: PEG 4000 - 1:20VLB: PEG 400- 1:20VLB: ДМСО – 2 мг/мл*среднее знач.Количества инкапулированныхпрепаратовМ(мкг)*983,4171286,4711445,3881479,4041377,341907,6901144,1181000,6391117,1461408,007Общее количествовысвободившегосяпрепарата в течении 6 ч (мкг) *569,9282634,9994593,6592591,5682747,0063617,8263623,5924607,8427674,2305908,2365Средняя скоростьвысвобождения препаратамкг/минмкг/ч1,58311,76391,64901,64322,07501,71621,73221,68841,87292,522994,9880105,833298,943298,5947124,5011102,9711103,9321101,3071112,3718151,3728163Для оценки характеристики высвобождения ТИА препаратов из эритроцитарных форм рассчитывали константу высвобождения (k) препарата из каждойЭФ, при этом использовали эмпирические и полуэмпирические модели (модельпервого порядка, нулевая порядка и Модель Хигучи).

Константа высвобождениялекарственного средства (k) и коэффициент регрессии (R2), полученные в моделях первого порядка, нулевого порядка и Хигучи (Higuchi), показаны в приложении Б на рис. 12, а кинетика высвобождения, инкапсулированного ЛС (VCR,VLB) демонстрирует, что высвобождение лучше всего описывалось уравнениемХигучи, поскольку оно показало наивысшее значение коэффициента корреляции(R2).

Близкая связь была также заметна при кинетике нулевого порядка (таблица6.10).Таблица 6.10. Значения константы скорости высвобождения «k» ТИА препаратов и коэффициента корреляции «R2» кривой вызвобождении ТИА из различныхэритроцитарных формМодель высвобождения ЛСНулевой поряR2докk0Qt = Q0 + K0tПервый порядокR2log C = log C0 – (ktKt / 2.303)Модель ХигучиR2(Higuchi model)kHQ= KH* t1/2Модель высвобождения ЛСНулевой поряR2докk0Qt = Q0 + K0tПервый порядокR2log C = log C0 – (ktKt / 2.303)Модель ХигучиR2(Higuchi model)kHQ= KH* t1/2VCR0,68930,1515Вид инкапсулированных эритроцитовVCR: ПЭГVCR: ПЭГVCR: ПЭГ VCR: ДМСО4000 - 1:54000 - 1:104000- 1:20– 2 мг/мл0,83850,90250,91040,87460,9780,75240,99651,35630,41750,003210,59780,002840,54550,002790,63840,003030,65430,002930,85053,25610,94993,126530,97612,313370,98812,369550,97713,14383VLB0,67170,1891VLB: ПЭГ4000 - 1:100,82390,9387VLB: ПЭГ4000 - 1:200,68910,9507VLB: ПЭГ400- 1:200,83610,9935VLB: ДМСО– 2 мг/мл0,8771,0690,51420,001930,60240,001810,53640,001890,64840,00210,69330,001540,82643,770860,92993,286810,83773,455590,94143,448740,97042,8562164МатематическаямодельХигучипредполагаетдиффузионно-контролируемое высвобождение.

Высвобождение ТИА препаратов в этом случаебудет зависить от количества инкапсулированных (концентрации) ТИА в эритроцитарных формах, их растворимости и природы эритроцитарных носителей.Согласно результатам, представленным на таблице 6.10 видно, что значениеконстанты Хигучи (kH) для эритроцитарных форм, инкапсулированных в модифицированных средах меньше, чем в немодифицированных средах для VCR:ПЭГ и VCR: ДМСО (kH) <3,256, VLB: ПЭГ и VCR: ДМСО (kH) <3,771 соответственно.

Это объясняется более замедленным высвобождением ТИА препаратовиз эритроцитарных форм, инкапсулированных в модифицированных средах.Значение kH указывает также на диффузионный механизм высвобождения.В результате проведенного исследования получены данные, свидетельствующие о том, что скорость высвобождения из эритроцитарных форм, инкапсулированных в модифицированных средах с ПЭГ и ДМСО, значительно меньше, чем инкапсулированных в немодифицированной среде.

Средняя скоростьвысвобождения препарата из эритроцитарной формы, инкапсулированной в среде ПЭГ, приблизительно сходна. Данные результаты, вероятно, связаны с тем,что ПЭГ поддерживает осмотический градиент через эритроцитарную мембранупри высвобождении ТИА, а также может связываться с эритроцитарной мембраной и поддерживать её стабильность и форму клетки.6.2. Определение стабильности клеточных носителей и клеточных формТИА препаратовПри оценке механической стойкости эритроцитов, инкапсулированных сТИА препаратами, было проведено исследование осмотической стабильности(хрупкости) эритроцитов, турбулентной хрупкости (Turbulence Fragility) и выделения гемоглобина из клеточных форм in vitro.

Для оценки физико-химическихсвойств эритроцитов определялась их резистентность к различным воздействиям. Наиболее часто на практике определяют осмотическую резистентность эритроцитов (границы минимальной и максимальной резистентности). Турбулентная165хрупкость позволяет оценить устойчивость инкапсулированных эритроцитовпротив напряжения, испытываемого клетками при турбулентной циркуляции invivo.6.2.1. Определение осмотической резистентности ТИА загруженных эритроцитовИсследования осмотической резистентности эритроцитов (ОРЭ) проводили для нормальных и ТИА инкапсулированных эритроцитов. Минимальная резистентность эритроцитов определяется максимальной концентрацией гипотонического (менее 0,85%) раствора натрия хлорида (в серии постепенно уменьшающихся концентраций), при которой начинается гемолиз наименее устойчивых эритроцитов, находящихся в растворе в течении 1 ч. Максимальная резистентность эритроцитов определяется максимальной концентрацией гипотонического раствора натрия хлорида, вызывающего в течение 1 ч, гемолиз всехэритроцитов.

Методика определения ОРЭ ТИА инкапсулированных эритроцитовописана на Главе 2 (пункт 2.4.7). Полученные результаты представлены в таблице 6.11, 6.12 и на рис. 6.9 и 6.10.Таблица 6.11. Данные о степени гемолиза разных ТИА-загруженных эритроцитарных формКон.NaCl %Контрольныйэритроцит*0,11000,295,32 ± 0,6840,380,26 ± 0,450,429,39 ± 0,980,513,67 ± 0,670,65,30 ± 0,220,654,24 ± 0,410,73,58 ± 0,880,83,11 ± 0,430,91,12 ± 0,13n=3; *Ср. знач. ± SDСтепени гемолиза K(Hb) %ТИА-ЭритроцитТИА-ПЭГ (Ery-TIA)Эритроцит*(Ery-TIA-PEG)*10010099,17 ± 0,8794,86 ± 0,7989,59 ± 1,6387,54 ± 1,4866,61 ± 2,0462,87 ± 1,233,46 ± 1,3531,95 ± 1,424,35 ± 1,6223,08 ± 0,7615,17 ± 1,7414,70 ± 1,057,06 ± 1,966,83 ± 1,085,55 ± 1,255,38 ± 0,914,03 ± 0,853,76 ± 0,39ТИА-ДМСО Эритроцит(Ery-TIA-DMSO)*10096,28 ± 0,9589,18 ± 1,8266,05 ± 2,1732,51 ± 1,8623,58 ± 1,7314,89 ± 1,046,96 ± 1,495,48 ± 0,363,86 ± 0,92166Таблица 6.12.

Метрологические характеристики среднего результата степени гемолиза (КHb) разных ТИА-загруженных эритроцитарных форм в 0,4% раствореNaClМетрологиче- Степень гемолиза (КHb) разных ТИА-загруженных эритроцитарных форм вская характе0,4% растворе NaClристика средКонтрольныеEry-VCREry-VCR: ПЭГEry-VCR-ДМСОного резульэритроциты(%)*(%)*(%)*тата(%)*25,3966,6162,8766,05x2s0,9664,141,434,70SD0,9832,031,202,17RSD0,0330,030,0190,0332,445,052,975,39∆x*ξ8,307,584,728,15n = 3; *P = 95%,ОРЭ является важным показателем определения устойчивости эритроцитов и их морфологических и физико-химических свойств.

Менее устойчивыеэритроциты начинают разрушаться раньше, чем нормальные эритроциты.Устойчивость эритроцитов изменяется при изменении морфологических и физико-химических свойств эритроцитов. Степень гемолиза ТИА инкапсулированных эритроцитов чуть выше, чем неинкапсулированных эритроцитов, что свидетельствует об изменении морфологических и физико-химических свойств ТИАинкапсулированных эритроцитов. ТИА инкапсулированные ЭН гемолизируютсяв среднем значении на 65,18% ± 5,0 (P = 95%) по сравнению с контрольнымиэритроцитами, которые гемолизируются на 29,39 % ± 2,44 в 0,4% растворе NaCl.Относительная погрешность среднего результата (ξ) не превышала 8,3%.Рис.

6.9. Степень гемолиза ТИА загруженных (VCR) эритроцитарных форм167Рис. 6.10. Зависимоcти степени гемолиза разных ТИА загруженных эритроцитарных форм от концентрации раствора NaClИнкапсулирование эритроцитов в модифицированной среде с ПЭГ показывает повышение устойчивости к гемолизу нежели эритроцитов, инкапсулированные в немодифицированной среде. Это свидетельствует о том, что ПЭГи могут стабилизировать и минимизировать повреждения клеточных мембран эритроцитов при инкапсулировании.6.2.2. Определение турбулентной хрупкости ТИА загруженных эритроцитовТурбулентная хрупкость (Turbulence Fragility) эритроцитов является ещеодной характеристикой, которая зависит от изменений в целостности клеточноймембраны и отражает устойчивость нагруженных эритроцитов к гемолизу, вызванному турбулентным потоком внутри капиллярной и сосудистой циркуляциив организме.Механическую прочность мембран ТИА загруженных эритроцитов определяли, используя 0,5 мл образца. Эритроциты суспендировали в 10 мл Naфосфатного буферного раствора (рН 7,4) и энергично встряхивали, используявысокоскоростной многоканальный шейкер (Термошейкер TS-100 BioSan) при1000 об/мин и 37 0С в течение 60 мин.

Характеристики

Список файлов диссертации

Получение и стандартизация эритроцитарных носителей, инкапсулированных терпено-индольными алкалоидными противоопухолевыми препаратами
Свежие статьи
Популярно сейчас
А знаете ли Вы, что из года в год задания практически не меняются? Математика, преподаваемая в учебных заведениях, никак не менялась минимум 30 лет. Найдите нужный учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6367
Авторов
на СтудИзбе
309
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее