Диссертация (1155054)
Текст из файла
МИНОБРНАУКИ РОССИИФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕУЧРЕЖДЕНИЕВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ«ВОРОНЕЖСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»(ФГБОУ ВО ВГУ)На правах рукописиХАЛАХАКУН МУДИЯНСЕЛАГЕ АМИЛА ДЖИВАНТА ХАЛАХАКУНПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЭРИТРОЦИТАРНЫХНОСИТЕЛЕЙ, ИНКАПСУЛИРОВАННЫХ ТЕРПЕНО-ИНДОЛЬНЫМИАЛКАЛОИДНЫМИ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМИ ПРЕПАРАТАМИ14.04.02.
- Фармацевтическая химия, фармакогнозияДИССЕРТАЦИЯна соискание ученой степени кандидата фармацевтических наукНаучный руководитель-доктор фармацевтических наукТринеева Ольга ВалерьевнаВОРОНЕЖ 2018ОГЛАВЛЕНИЕСПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАШЕНИЙ………………….……..7ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………... ……9ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ…………………………………... ……161.1.Классификация противоопухолевыхпрепаратов растительного происхождения……………….............................1.2.16Алкалоиды Катарантуса розового(Catharanthus roseus (L.) G. Don) …………………………………………….171.2.1. Фитохимический состав C.
roseus…………………………................171.2.2. Бисиндольные алкалоиды VCR и VLB……………….……………...191.2.2.1. Химические и физико-химические свойства…………………….…191.2.3.Методы качественного и количественного определенияТИА препаратов C. roseus…………………………………………………….211.2.3.1. Методы выделения и идентификации ТИА………………………...211.2.3.2.Методы анализа ТИА (VCR и VLB) ………...................................221.2.3.2.1. Методы установление подлинности VCR …………………..……231.2.3.2.2. Методы количественного определения VCR …………………….241.2.4.
Методы анализа C. roseus алкалоидов VCR и VLB in vivoи in vitro………………………………………………………………………….. 251.2.4.1. Физико-химические методы определения ТИА………………….… 251.2.4.1.1. Метод тонкослойная хроматография (ТСХ)………………...……..251.2.4.1.2. Газо-жидкостная хроматография…………………………………… 271.2.4.1.3. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии(ВЭЖХ)…………………………………………………………………………271.2.4.1.4.
Анализ C. roseus алкалоидов методом ВЭЖХ сэлектрохимическим детектированием………………………………………..311.2.4.2. Методы радиоиммунологического анализаалкалоидов C. roseus…………………………………………………………321.2.4.2.1. Методы обнаружения ТИА в живых клетках……………………3221.3.Фармакологические свойства VCR и VLB……………………….…341.3.1. Современное положение VCR и VLB в химиотерапии………….…361.3.2. Фармакокинетика VCR и VLB …………………………………..……371.3.3.
Механизм действия VCR и VLB …………………………………….… 381.3.4. Токсические действия и лекарственные взаимодействияТИА (VCR, VLB и др.) ……………………………………………………….… 421.3.5.Новые подходы для улучшения качества ТИА препаратовVCR и VLB………………………………………………….................................. 451.4.Системы доставки лекарственных веществ…………………………... 461.4.1Липосомальные носители для доставкипротивоопухолевых препаратов (ТИА)………………………………………... 491.4.2.
Наноносители для доставки противоопухолевыхпрепаратов…………………………………………………….............................. 511.5.Клеточные носители для доставки лекарственных средств………..… 541.5.1. Аутологичные клетки крови, как носители лекарственныхпрепаратов……………………………………………………………………..… 551.5.1.1. Физиология и морфология эритроцитов…...…………………………. 561.5.2. Эритроциты как система доставки ЛС………………………………..591.5.3. Основные методы инкапсулирования лекарственныхвеществ в эритроцитах…………………………………………………………. 631.5.3.1.
Метод гипотонического лизиса…………………………………..…… 641.5.4. Действие инкапсулированных эритроцитов на опухоли…………..… 711.5.5. Возможности применения клеточных носителейдля доставки ТИА…………………………………………………………..…… 72ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 1……………………………………................................ 73ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ……………………………………742.1.Объекты исследования………………………………………………… 742.2.Материалы и реактивы……………………………...………………752.3.Оборудование…………………………………………………………7832.4.Методы исследования………………………………………................... 792.4.1. Методы выделение плазмы из крови…………………………………792.4.2. Выделение аллогенных эритроцитов…………………………………..
802.4.3. Метод изучения взаимодействия ТИА препаратов VCR и VLB с компонентами плазмы и форменными элементами крови…………………............... 822.4.4. Включение ТИА в клеточные носители…………………...................... 832.4.5. Определение эффективности включения ТИА(VCR, VLB) в эритроциты …………………………………………………….842.4.6. Определение размера и физико-химических свойствэритроцитов……………………………………………………………………… 852.4.7. Методика определение осмотической резистентностиТИА загруженных эритроцитов………………………………………………872.4.8. Определение степени гемолиза ТИА инкапсулированныхэритроцитов…………………………………………………………………….2.5.88Статистическая обработка результатов ……………………………… 88ГЛАВА 3.
РАЗРАБОТКА МЕТОДИК СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГООПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕРПЕНО-ИНДОЛЬНЫХ АЛКАЛОИДОВ В СУБСТАНЦИЯХ И ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ……………………………………913.1. Изучение спектральных характеристик VCR и VLB………………….913.2. УФ-спектральные характеристики VCR и VLB в разных растворителях………………………………………………………………………………943.3. Разработка методики количественного определения ТИАпрепаратов VCR и VLB………………………………………………………..… 963.3.1. Определение аналитических пределов обнаружения……………….… 983.3.2. Разработка методики количественного определения………………….1043.3.3.
Определение прецизионности аналитической методики……………… 1083.3.4. Определение робастности аналитической методики……………….… 1113.4. Методики количественного определения VCR и VLB в ГЛФ…………114ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 3………………………………………………………1174ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА МЕТОДИК КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕРПЕНО-ИНДОЛЬНЫХ АЛКАЛОИДОВВ БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ……………………………………… 1184.1. Разработка методики количественного определенияТИА в биожидкостях…………………………………………………………… 1184.1.1. Определение оптимальных условий удаления белка……………….... 1184.1.2. Выбор оптимальных условий гель-хроматографического выделенияТИА……………………………………………………………………………1204.1.3.
Распределение ТИА при гель-хроматографии………………………… 122ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 4……………………………………………………….…. 125ГЛАВА 5. ПОЛУЧЕНИЕ КЛЕТОЧНЫХ НОСИТЕЛЕЙ ДЛЯ НАПРАВЛЕННОГО ТРАНСПОРТА В ОРГАНИЗМЕ ТИА ПРЕПАРАТОВВИНКРИСТИНА И ВИНБЛАСТИНА …........................................................ 1265.1.Изучение взаимодействия ТИА VCR и VLB с компонентами плазмы иформенными элементами крови………………………………………………… 1265.1.1. Изучение взаимодействия ТИА VCR и VLB с компонентами плазмы крови………………………………………………………………………………1305.1.2. Изучение взаимодействия ТИА VCR и VLB с форменными элементамикрови……………………………………………………………………………… 1325.2.Метод получения эритроцитарных клеточных форм ТИА препаратовVCR и VLB ……………………………………………………………...……… 1355.2.1. Включение ТИА препаратов в клеточные носители…………………… 1355.3.Определения эффективности инкапсулирования ТИА препаратов VCR иVLB в эритроцитах……………………………………………………………… 1375.3.1.
Методика количественного определения клеточных форм ТИА препаратов………………………………………………………………………………… 1375.3.2. Изучения возможности увеличения эффективности «загрузки»эритроцитов ТИА препаратами………………………………………………14155.3.2.1.Изучение эффективности загрузки ТИА препаратов в клеточные носи-тели в среде, модифицированной ПЭГ………………………………………1415.3.2.2. Изучение эффективности загрузки ТИА препаратов в клеточные носители в среде, модифицированной ДМСО…..…………………………………1445.3.2.3.
Изучение эффективности загрузки ТИА препаратов в клеточные носители в среде, модифицированной АТФ………………………………………145ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 5………………………………………………………149ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ ТИА ИНКАПСУЛИРОВАННЫХ ЭРИТРОЦИТАРНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ IN VITRO………………… 1516.1. Изучение свойств ТИА инкапсулированных эритроцитарных носителей invitro………………………………………………………………………………1516.1.1. Изучение морфологии инкапсулированных ЭН……...……………… 1516.1.2. Определения размера и физико-химических свойств эритроцитов...1556.1.3. Изучение устойчивости клеточных носителей к десорбции и высвобождению ТИА препаратов……………………..………………………………….1586.2. Определение стабильности клеточных носителей и клеточных форм ТИАпрепаратов………………………………………………………………….…1656.2.1.
Определения осмотической резистентности ТИА загруженных эритроцитов……………………………………………………………………………1666.2.2. Определение турбулентной хрупкости ТИА загруженных эритроцитов……………………………………………………………………………….1686.3. Изучение условий высвобождения гемоглобина из ТИА загруженных эритроцитов………………………………………………………………………….1716.4. Определение стабильности клеточных носителей и клеточных форм VCR иVLB при хранении………...……………………………………………………174ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 6………………………………………………......………….178ОБЩИЕ ВЫВОДЫ……………………………………………………...………….182СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ………………………………………………...………185ПРИЛОЖЕНИЯ……………………………………………………………………..2196СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ:АТФ - aденозинтрифосфатВЭЖХ - высокоэффективный жидкостный хроматографияГЛФ – готовая лекарственная формаГФ / ГХ- гель фильтрация / гель хроматографияДМСО- диметилсульфооксид (dimethylsulfoxide; DMSO)ДМФА - диметилформамид (dimethylformamide)ЖХ/МС-ВР - жидкостная хроматография–масс-спектрометрияс высоким раз-решениемКН– клеточные носителиЛС- лекарственные средстваМКА - моноклональные антителаМСД - масс-спектральный детекторНД– нормативная документацияОРЭ- осмотической резистентности эритроцитовППМЭ - показатель проницаемости мембран эритроцитовПЭГ- полиэтилингликоль (polyethylene glycol; PEG)РЭС- ретикулоэндотелиальная системаСДЛС - системы доставки лекарственных средствТИА - терпено индольные алкалоидыТСХ- тонкослойная хроматографияУЭЖХ - ультрапроизводительная жидкостная хроматографияФРСЭ - фактор роста сосудистого эндотелияХТС- химиотерапевтические средстваЦД- целенаправленное действиеЭН- эритроцитарные носителиЭМВ - электромагнитные волныЯМР - ядерного магнитного резонансB.Ph.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
