Диссертация (1154846), страница 9
Текст из файла (страница 9)
С-пептид, ИФР-1 выполнены методом хемилюминисценциииммуноферментного анализа на аппарате Immulite 2000 производства SiemensHealthcare Global на реагентах той же фирмы. ТТГ, Т4 свободный - наавтоматическом анализаторе «Centaur CP».Исследование показателей клеточного иммунитета проводили методомпроточной цитофлюорометрии на проточном цитофлюориметре FACS Canto II(Becton Dickinson). Уровень сывороточных иммуноглобулинов А, М, G (IgA, IgM,IgG) определен методом радиальной иммунодиффузии (Manchini G. Et all, 1965).КопрограммасвыделениемКозловской, М.А.
Мартыновой 1975 г..синдромоввыполненаметодомЛ.В.50Ультразвуковое исследование щитовидной железы выполнено на аппаратеToshiba xario SSA-66OA.2.2.5 Микробиологические методыМикробиологические (бактериологические) исследования включали: анализкачественного и количественного состава микрофлоры просвета толстой кишки иисследование клинического материала, отделяемого верхних дыхательных путей.Бактериологическоеисследованиепроводиласьвмикробиологическойлаборатории КГБУЗ «Городская больница №5», г. Барнаул, главный врач И.А.Вильгельм.Микробиологические анализы проводились в соответствии с ПриказомМинздрава СССР от 22.04.1985 №535 «Об унификации микробиологических(бактериологических)диагностическихметодовлабораторияхисследования,применяемыхлечебно-профилактическихвклинико-учреждений»;методическими указаниями «Микробиологическая диагностика заболеваний,вызываемых энтеробактериями», Министерства Здравоохранения СССР от 1984года.Материалом для исследования отделяемого дыхательных путей был мазокиз зева, взятый натощак стерильным ватным тампоном.
Забор материалапроизводила С.В. Шабанова, заведующая бактериологической лабораториейКГБУЗ «Городская больница №5». Нативный материал был доставлен влабораторию в течение одного часа после забора.Первичная идентификация микроорганизмов производилась по данныммикроскопии мазков, окрашенных по Грамму. Качественный анализ микрофлорыпроводился посевом исследуемого материала на питательную среду Сабуро.Количественный анализ микрофлоры проводился посевом 0,1 мл исходногоразведения 1:10 в пептонной воде на питательную среду Эндо.Для микробиологического исследования кала выбирали 1 г кала стерильнойложечкой и помещали в стерильную пробирку. Материал доставлялся вбактериологическую лабораторию в течение 1 часа, где проводились посевы насоответствующие питательные среды. Для идентификации условно-патогенных51микроорганизмов использовали среду Эндо, дрожжеподобные грибы рода Candidaсеяли на среде Сабуро, бифидобактерии – на среде Блаурока, гемолитическиемикроорганизмы – на кровяном агаре, лактобактерии – на молоке, стафилококки –на среде ЖСА, клостридии идентифицировали на среде Вильсона-Блера иэнтерококки – на среде ДИФ-3.
При оценке микробиологического исследованиякала количество микроорганизмов выражали в lg числа КОЭ (колониеобразующихединиц) в 1 г фекалий (КОЕ/г). За норму принимали количественное содержаниемикроорганизмов, рекомендованных Н.М. Грачевой (1986).2.2.6 Метод определения микроэлементовОпределение микроэлементов в биологических объектах (волосы, кровь)проводилоськоличественнымспектрофотометрическиманализомметодоматомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной аргоновой плазмой(ИСП-АЭС и ИСП-МС) по методике, утвержденной Федеральным центромгоссанэпиднадзором Минздрава России, 2003 г.
[143]. Забор материалапроизводился сотрудниками лаборатории «ИНВИТРО», выполнение анализовосуществлялось в АНО «Центр биотической медицины», г. Москва, руководительд.м.н., профессор Скальный А.В. (сертификат ISO 15189:2003 №0001; лицензия №ЛО-54-01-000476 от 13 августа 2009 года).Методмасс-спектрометрии(ИСП-МС)–многоэлементныйметодопределения микро - и ультрамикроэлементов в биосубстратах. Преимуществомметода является чрезвычайно низкие пределы обнаружения (ниже 0,01 мкл).Микроэлементы цинк, селен, медь, железо определяли в венозной кровиутром натощак.
Забор материала производился согласно Методике определениямикроэлементов в диагностируемых биосубстратах атомной спектрометрией синдуктивно связанной аргоновой плазмой [143] в декретированные сроки общегоклинико-лабораторного обследования, что не потребовало дополнительногоинвазивного вмешательства.В качестве субстрата для определения йода использовались волосы,поскольку твердые ткани, такие как волосы, ногти характеризуют накоплениемикроэлементов, формирующееся в течение длительного времени (месяцы, годы),52что позволяет точно оценить микроэлементный статус пациента.
Забор волос дляпроведения исследования производили в непосредственной близости от корней, вчетырех местах на затылке ближе к области шеи в количестве не менее 0,1 г.Диаметр волосяного пучка составил 3 мм, длина - 4 см от корней [143].2.2.7 Методы статистического анализаСтатистическую обработку материала диссертации проводили методамивариационной статистики (Гланц, 1999; Румянцев, 2009) с применением программMicrosoft Excel 2013, SPSS Statistics 17. Результаты лабораторных исследованийпредставлены в единицах международной системы (СИ). Вычислялись средняяарифметическая (М) и стандартная ошибка средней (m), коэффициент вариации(Cv). Достоверность различий считали по t-критерию Стьюдента, Вилкоксона.Сравнение двух выборок по частоте встречаемости признака производилось по Fкритерию Фишера.
Для изучения силы связи между признаками применялсякорреляционный анализ. Коэффициент корреляции рангов (Спирмена) – ρрассчитывался по формуле 4:6 ∑d2ρ = 1- -----------n х (n2-1)(4),где, 6 – постоянный коэффициент, n - число коррелируемых пар, d - разностьрангов (между порядковыми номерами рядов), ∑ - знак суммы.Дляоценкипрогностическойзначимостиполученныхрезультатоврассчитывали отношение шансов (OR – Odds Ratio) влияния определенногофактора на исследуемые показатели в группах наблюдения. Расчет производился спомощью таблицы сопряженности (таблица 3) по формуле 5:Таблица 3 - Таблица сопряженности расчета отношения шансовРезультат естьРезультата нетОсновная группаАВКонтрольная группаСD53OR = A x D / B x C(5),Для отношения шансов рассчитывали 95% доверительный интервал (CI –ConfidenceInterval).Достоверностьпроверялисиспользованиемнепараметрического критерия χ2 Пирсона.Статистически значимыми считались значения соответствующие р<0,05.2.3. Объем исследованийОбъем проведенных клинических исследований составил 360 осмотровдетей Дома ребенка (таблица 4).
Общий объем лабораторных исследованийсоставил 3679 (таблица 5). Инструментальных ультразвуковых исследованийщитовидной железы - 120.Таблица 4 - Общий объем клинических исследованийПоказательКлиническоеисследование всехорганов и системОценка роста, смОценка массы тела,кгОценка окружностиплеча, ммОценка толщиныкожно-жировойскладки трицепса,ммВсего1 визит (до2 визитисследования) (через 2 месяца)1201203 визит(через 1 год)120Всего360120120120360120120120360120120120360120120120360600600600180054Таблица 5 - Общий объем лабораторных исследованийЛабораторный1 визит2 визит(через 2 месяца)3 визит(через 1 год)Всего120120360Общий анализ крови(доисследования)120Сывороточное железо120120120360Трансферрин120120120360Ферритин120120120360Общий белок120120-240Альбумин120120-240Глюкоза120120-240Биохимическийанализ мочиС-пептид120120-240120120-240ИФР-1120120-240ТТГ, Т4 свободный120120120360CD клетки120--120ИммунорегуляторныйиндексIg A, M, G120--120120-120240Копрограмма120120120360I, Zn, Se, Cu120120-240Микробиологическоеисследование из зеваМикробиологическоеисследование калаВсего45--45120-120240208515609604605показательПродолжение таблицы 5Таким образом, исследование проведено на достаточном количествеклинического материала с применением современных статистических методов,лабораторной и инструментальной диагностики.55ГЛАВА 3РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ3.1 Особенности заболеваемости детей при стандартных лечебнооздоровительных мероприятиях в Доме ребенкаДлярешениявопросаонеобходимостиоптимизациилечебно-оздоровительной помощи детям, воспитывающихся в Доме ребенка, проведенаретроспективная оценка показателей общей заболеваемости с учетом стандартныхмероприятий, проводимых детям в течение года.
Исследовались ретроспективныепоказатели структуры заболеваемости по нозологиям за три года (2008, 2009, 2010гг.), предшествующих данному исследованию у 183 воспитанников в возрасте от1 года до 3 лет, проживших в Доме ребенка в течение одного полного года.Группу сравнения составили 165 детей, того же возраста, воспитывающихся всемье.В структуре общей заболеваемости детей, воспитывающихся в Домеребенка, I ранговое место принадлежало болезням органов дыхания (Х класс),доля которых составила 37,72% (таблица 6). Болезни органов дыханияпредставлены острыми респираторными инфекциями верхних дыхательных путей(J00-J06), обструктивным бронхитом (J44), острым бронхитом (J20), пневмонией(J15.9), гипертрофией миндалин (J35.1), гипертрофией аденоидов (J35.2).На II ранговом месте находились болезни нервной системы (VI класс),которые представлены резидуальной энцефалопатией (G 93.4) с удельным весом9,16%.
III ранговое место занимали болезни эндокринной системы, расстройствапитания и нарушения обмена веществ (IV класс), доля которых составила 7,41%.Указанные расстройства у детей Дома ребенка были представлены последствиями56рахита (Е64.3), белково-энергетической недостаточностью (Е44), задержкойразвитиявследствиебелково-энергетическойнедостаточности(Е45),гипотиреозом (Е02, Е03).
IV ранговое место принадлежало врожденныманомалиям (порокам развития), деформациям и хромосомным нарушения судельным весом 6,58%. Данный класс болезней включал функционирующееовальное окно (Q21.1), гипоспадию (Q54), ложные хорды левого желудочка(Q28.8). V ранговое место занимали болезни органов пищеварения, доля которыхсоставила 5,91%. Болезни органов пищеварения включали кариес зубов (К02),гипоплазию эмали (К00.4), стоматит (К12), паховые грыжи (К40), пупочныегрыжи (К42), гастроэзофагеальный рефлюкс (К21), функциональные кишечныенарушения (К59).Последующие ранговые места – VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XVсоответственно занимали болезни крови (железодефицитные анемии – D50) –3,99%, психические расстройства и расстройства поведения (расстройства сна –F51, расстройства настроения - F39, неспецифические расстройства поведения –F59) – 5,25%, болезни органа зрения и его придаточного аппарата (ангиопатиясетчатки – H35.0, частичная атрофия зрительного нерва – H47.2, косоглазие –H50.0) – 4,91%, инфекционные и паразитарные болезни (цитомегаловируснаяинфекция – B25, гепатит – B18, герпетическая инфекция – B00.9, ветряная оспа –B01) – 4,08%, болезни мочеполовой системы (инфекция мочевыводящих путей –N39.0, дисметаболическая нефропатия – N28.9, пиелонефрит – N11) – 3,33%,болезни костно-мышечной системы (нарушения осанки – M40.0, варуснаяустановка стоп – M21.1, кифоз грудного отдела позвоночника – M40, плосковальгусная дисплазия стоп – M21.0, продольное плоскостопие – M21.4) – 2,83%,болезни уха (отит – H65) – 2,25%, болезни кожи (атопический дерматит – L20) –2,08%, нарушения системы кровообращения (функциональная кардиопатия –I42.8, пролапс митрального клапана – I34.1, нарушения ритма сердца – I49.8) –1,83%, новообразования (гемангиомы – D18) – 1,33%.57Таблица 6 - Структура заболеваемости, распространенности (Р, %) и удельный вес (%) болезней детей ±m по МКБ - 10Класс болезнейШифрДети Дома ребенка, n = 183Дети из семьи, n = 165поВсегоР, % ±mр Удельный ±mВсегоР, % ±mр Удельный ±mМКБ болезней**вес, %болезней**вес, %101201100358100I НекоторыеA004926,78 3,274,080,571911,52 2,495,311,19инфекционные иВ99паразитарные болезниII НовообразованияC00168,74 2,091,330,3321,21 0,850,560,39D48III Болезни крови,D506434,97 3,535,33*0,65106,06 1,862,790,87кроветворных органовD89и отдельныенарушения,вовлекающиеиммунный механизмIV БолезниE008948,63 3,697,41*0,7684,85 1,672,230,78эндокринной системыE89расстройства питанияи нарушения обменавеществV ПсихическиеF006334,43 3,515,250,642012,12 2,545,591,21расстройства иF99расстройстваповеденияVI Болезни нервнойG0011060,11 3,629,160,833018,18 3,08,381,46системыG9958Продолжение таблицы 6VII Болезни глаза иH00его придаточногоH59аппаратаVIII Болезни уха иH60сосцевидного отросткаH95IX Болезни системыI00-I99кровообращенияX Болезни органовJ00дыханияJ99XI Болезни органовK00пищеваренияK93XII Болезни кожи иL00подкожной клетчаткиL99XIII Болезни костноM00мышечной системы иM99соединительной тканиXIV БолезниN00мочеполовой системыN99XVII ВрожденныеQ00аномалии (порокиQ99развития), деформациии хромосомныенарушения5932,243,464,910,622816,97 2,927,821,422714,752,622,250,43116,671,943,070,912212,022,401,830,3953,031,331,40,62453247,54037,72*1,410764,85 3,7229,892,427138,803,605,910,683219,39 3,088,941,512513,662,542,080,412515,15 2,796,89*1,353418,582,882,830,48169,702,34,471,094021,863,063,330,52159,092,244,191,067943,173,666,58*0,7295,451,772,510,359Продолжение таблицы 6XIX Травмы,S00отравления иT98некоторые другиепоследствиявоздействия внешнихпричин0----2112,73 2,595,87*Примечание: ** в понятие "всего болезней" включена сумма классов I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XII, XIII, XIV, XVII, XIX.Классы XV, XVI, XVIII в общую сумму не входили и не анализировались.Р-prevalence – распространенность заболеваний.