Диссертация (1154825), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Далее на протяжении 10 дней ежедневно оценивали54влагалищные мазки крыс обеих подгрупп для уточнения характера влияниякисспептина на эстральный цикл животных.Было установлено, что введение кисспептина самкам крыс первой подгруппына фоне диэструса приводило к резкой активизации их репродуктивной системы ипоявлению в цитологической картине влагалища уже через 16 часов признаков ярковыраженного эструса (Рисунок 13), продолжительность которого увеличиваласьпочти до 2-х суток.абвРисунок 13 — Цитологическая картина влагалищного содержимого крыс1-й группы,10х20, окраска метиленовым синим: а — после введения блокаторакисспептинергических рецепторов и до введения кисспептина (диэструс);б — через 16 часов после введения кисспептина (проэструс/эструс);в — через 24 часа после введения кисспептина (эструс)При этом было отмечено резкое изменение КИ с 9,6% до 80,2% (р˂0,001), чтосоответствует произошедшей овуляции.Введениефизиологическогорастворакрысамвторойподгруппываналогичный период к изменению эстрального цикла не приводило, что55выражалось в удлинении фазы диэструса в 3–4 раза по сравнению с исходнымизначениями (в среднем, до 9,8±1,4 дня).
При этом у крыс сохранялись низкиепоказатели КИ (Таблица 17).Таблица 17 — Кариопикнотические индексы (КИ) крыс на фоне введениякисспептина и физиологического раствораГруппынаблюденияОпытнаягруппа, n=18Контрольнаягруппа, n=18На фоне введенияблокатора киссрецепторов9,6±3,6После введениякисспептина80,2±1,2После введенияфизиологическогораствора-10,1±2,9-10,0±3,2Таким образом, данные проведенного нами экспериментального изученияроли кисспептина подтверждают не только его регулирующую роль вформировании регулярного эстрального цикла, но и открывают возможностьвосстановления его нарушений экзогенным введением кисспептина, что,возможно, в дальнейшем поможет в создании неинвазивных методов лечениябесплодия у женщин с нарушениями менструального цикла.
В настоящее времяопубликованы лишь первые данные о вспомогательной роли кисспептина припроведении ЭКО [191].Кроме этого, экзогенное введение кисспептина у самок крыс с нарушениемэстрального цикла восстановило у них нормальную функцию репродуктивнойсистемы, что подтвердило возможность его использования в дальнейшем длялечения эндокринного бесплодия у женщин.56ГЛАВА 4.
РОЛЬ КИССПЕПТИНА В РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИЖЕНЩИН ДЕТОРОДНОГО ВОЗРАСТАДо недавнего времени считали, что уровень гормонов регулируется ГнРГ,вырабатываемым в гипоталамусе, по принципу обратной связи. Если в кровиснижается уровень гипофизарных гормонов, то увеличивается выброс ГнРГ, чтоприводит к усилению секреции гонадотропных гормонов в передней долегипофиза.
Последние у женщин оказывают стимулирующее влияние на яичники, врезультате увеличивается продукция стероидных гормонов. Однако послеоткрытиякисспептинабылоустановлено,чтоонможетоказыватьнепосредственное существенное регулирующее влияние на уровень ГнРГ ворганизме женщины, что уточнило взгляд на понимание причин развитиянекоторых форм бесплодия. Как показали проведенные на крысах эксперименты,расстройства (например, введение блокатора кисспептинергических рецепторов),нарушающие взаимодействие кисспептина и его рецепторов, приводят кневозможности овуляции, что может приводить к развитию бесплодия даже усамок крыс с нормально функционирующей ранее репродуктивной системой.Для уточнения корреляций между уровнем гипофизарных и стероидныхгормонов, кисспептина и состоянием репродуктивной функции у женщиндетородного возраста нами были проведены исследования уровня кисспетина уженщин различных групп.Включенные в исследование 237 пациенток для получения однороднойвыборки были подвергнуты максимально строгому отбору с формированием 4клинических групп.Лабораторные исследования, проведенные у них в рамках профилактическихосмотров, в период активных посещений также не выявили заболеваний(Таблица 18).57Таблица 18 — Показатели анализов крови обследованных женщинУсредненные показатели краснойкрови:- количество эритроцитов,х1012/л;-количество гемоглобина, г/лУсредненные показателиколичества лейкоцитов, х109/лУсредненные показателиколичества тромбоцитов, х109/лУсредненные показатели СОЭ,мм/чУсредненные показателиглюкозы крови, моль/лУсредненные показатели общегобилирубина крови, мкмоль/лУсредненные показателикреатинина крови, мкмоль/лУсредненные показателимочевины крови, ммоль/лУсредненные показателихолестерина крови, мкмоль/лУсредненные показатели АлАТкрови, Ед/лУсредненные показатели АсАТкрови, Ед/лI группа,n=82II группа,n=85III группа, IV группа,n=37n=333,89±0,273,81±0,263,06±0,243,84±0,22132,9±1,33 125,5±1,47 113,6±1,546,4±1,77,1±2,18,6±1,8130±1,326,5±1,3278 ±2,5255 ±2,8186,1 ±8,7237 ±2,99.7 ±2,111.1 ±2,415,2±2,28,7±2,64,3±0,74,5±0,34,1±0,44,3±0,65,4±1,36,6±1,87,1±1,45,9±1,768,4±1,271,3±1,358,6±1,567,5±1,43,5±0,44,4±0,65,1±0,33,7±0,83,4±0,233,5±0,424,1±0,313,6±0,2715±1,317±1,721±1,518±1,427±1,528±1,332±1,226±1,74.1 Уровень кисспептина у здоровых небеременных женщиндетородного возрастаДля уточнения референсных значений кисспептина у женщин в норме намибыли обследованы 2 группы небеременных женщин.
В первую группу былиотнесены 82 женщины (средний возраст 20,1±0,7 года), не имевшие детей, вторуюгруппу составили 85 пациенток (средний возраст 25,9±1,6 лет), имевшие в анамнезебеременность и нормальные роды. Все женщины были дообследованы и не имели58на момент исследования острых гинекологических заболеваний и аномалий. Припроведении УЗИ органов малого таза и брюшной полости у 100% женщин,включенныхвисследование,результатысоответствовалинормальнымпоказателям.У всех женщин первой и второй групп изучали уровень кисспептина. Былоустановлено, что у женщин обеих групп он колебался в пределах от 2,5 нг/мл до9,56 нг/мл и не имел достоверных различий на протяжении фаз менструальногоцикла.Анализ акушерского анамнеза у женщин второй группы показал, чтонесмотря на наличие в анамнезе нормально протекавшей беременности, котораязавершилась нормальными родами здоровым ребенком, сроки наступлениябеременности от момента начала регулярной половой жизни без применениясредств контрацепции значительно колебались — от нескольких месяцев до 1,5–2 лет.
Проведенный корреляционный анализ между уровнем кисспептина всыворотке крови у них и сроками наступления беременности выявил прямуюсильную корреляционную связь (r= 0,98, Рисунок 14).Средний срок наступления беременностиУровень кисспептина выше 9,0нг/мл6,7Уровень кисспептина от 7,0 до9,0 нг/млСредний срокнаступлениябеременности11,2Уровень кисспептина от 4,5 до7,0 нг/млЭкспоненциальная(Средний срокнаступлениябеременности)18,3Уровень кисспептина от 2,5 до4,5 нг/мл24,6051015202530месяцРисунок 14 — Взаимосвязь между уровнем кисспептинаи сроками наступления беременности у женщин I группы59В связи с установленными соответствиями между уровнем кисспептина исроками наступления беременности все женщины второй группы были разделенына несколько подгрупп, отличающихся уровнем кисспептина (Таблица19).Таблица 19 — Уровень кисспептина у женщин второй группы, n=85Группы наблюденияУровень кисспептина в сывороткекрови, нг/мл9,45± 0,137,43± 0,28*5,89±0,63**3,21±0,53***II А подгруппа, n=17II Б подгруппа, n=28II В подгруппа, n=24II Г подгруппа, n=16Примечание:Доля в группе,%17,837,330,814,1*р≥0,001 между показателями II Б и II А подгрупп;**р≥0,05 между показателями II Б и II В подгрупп;***р≥0,01 между показателями II В и II Г подгрупп.У женщин первой группы уровень кисспептина соответствовал показателямгруппы рожавших женщин.
Структура группы по уровню кисспептинапредставлена в Таблице 20.Таблица 20 — Уровень кисспептина у женщин первой группы, n=82ГруппынаблюденияI А подгруппа,n=11IБ подгруппа, n=34IВ подгруппа,n=22IГ подгруппа, n=15Примечание:Уровень кисспептина в сыворотке крови,нг/мл9,37± 0,15Доля в группе,%16,27,22± 0,17*5,55±0,26*38,231,63,35±0,62**14,0*р≥0,001 между показателями IА и IБ подгрупп, IБ и IВ подгрупп;**р≥0,01 между показателями IВ и IГ подгруппСравнениесреднихпоказателейпогруппамвыявилоотсутствиестатистически значимой разницы между уровнем кисспептина у здоровых60рожавших и нерожавших женщин (Таблица 21).Таблица 21 — Уровень кисспептина у женщин первой и второй группУровень кисспептинаКритерий Стьюдентав сыворотке крови, нг/млI группа, n=826,45± 2,270,072II группа, n=856,68±2,23*Примечание — *р≥0,05 между показателями первой и второй группДля подтверждения нормального гормонального фона у женщин первой ивторой групп наблюдения слепым методом в выявленных пропорциях былисформированы две когорты по 50 человек.
Первую составили: 8 (16,0%) человек изI А подгруппы, 19 (38,0%) человек из I Б подгруппы, 16 (32,0%) человек из I Вподгруппы и 7 (14,0%) из I Г подгруппы. Соответственно во вторую вошли 9(18,0%) человек из II А подгруппы, 19 (38,0%) – из II Б подгруппы, 15 (30,0%) – изII В подгруппы и 7 пациенток из II Г подгруппы (14,0%).Было установлено, что у всех этих женщин уровень гормонов, взятых на 6–7день менструального цикла (фолликулярная фаза) и на 20–22 дни менструальногоцикла (лютеиновая фаза), соответствовал нормальным референсным значениямгормонов у женщин данного возраста.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
