Диссертация (1154825), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Это подтверждалось длительным КИ до 9,6±3,6 и характеризовалонарушение уровня эстрогенной стимуляции в организме самок крыс; изменениемхарактера ректальной температуры (монофазная кривая) и пролонгацией фазыдиэструса в 3–4 раза по сравнению с исходными значениями по даннымкольпоцитологического исследования. Введение таким животным (на фонепролонгированного диэструса) 10 мкл раствора kisspeptin-234 (2х10-2 моль),наоборот, приводило к резкой активизации их репродуктивной системы ивозникновению в цитологической картине влагалища уже через 16 ч картины ярковыраженного эструса и восстановления двухфазного характера кривой ректальнойтемпературы, что свидетельствовало о значимости кисспептина для регуляции77репродуктивной сферы.Полученные в ходе исследования на крысах данные, по нашему мнению,могутбытьраспространенынаженщин,посколькуимеетсявысокаяаллометричность функционирования репродуктивной системы крысы и человека[28, 113].
Так, например, один из важнейших параметров — амплитуда импульсовгонадотропинов менструального цикла у женщин и эстрального цикла у животных(крыса) — полностью идентичны. Высокая аллометричность репродуктивныхсистем женщин и крыс подтверждается не только схожестью нормальногофункционирования, формированием бесплодия, но и аналогичностью процессовинволюции половой сферы [83].Для определения уровня кисспептина во время беременности былаобследована группа соматически и гинекологически здоровых женщин, у которыхтроекратно (по триместрам) во время беременности определяли уровенькисспептина в сыворотке крови. Было установлено, что во время беременностиуровень кисспептина достоверно повышен по сравнению с его уровнем унебеременных женщин. Так, это повышение в первом триместре беременности посравнению с показателями пациенток I и II групп наблюдения составляло около46,4%, во втором триместре — 35,7% и в третьем — 51,0%, соответственно.Некоторое снижение уровня кисспептина во втором триместре, возможно,объяснялось наиболее высокими показателями уровня пролактина в это время (в1,7 раза выше, чем в первом и в 3,4 раза выше, чем в третьем триместре), посколькув экспериментах на мышах была выявлена способность пролактина эффективноингибировать секрецию кисспептина [89, 163].Выявленное противоречие между повышением уровня кисспептина на фонебеременности и одновременное снижение уровней ФСГ и ЛГ, возможно,объясняется сложным характером взаимосвязей между гипоталамусом, гипофизоми гонадами [182, 201].
Регуляция секреции кисспептина, предположительно,«обеспечивается за счет цепей обратной связи: повышение уровня ЛГ и ФСГприводит к торможению его синтеза и высвобождения, а пониженнаяконцентрация ЛГ и ФСГ стимулирует процессы его выработки» [104]. Поэтому на78фоне беременности и зарегистрированного снижения уровней ФСГ и ЛГпроисходит усиление продукции кисспептина. Высказываются предположения,сделанные на основе экспериментальных исследований, о том, что на повышениеуровня кисспептина при беременности может влиять уровень ХГЧ [57, 165, 110].Механизмизмененияфункциональнойактивностинейронов,продуцирующих либерины, до конца не изучен и особенно после открытиякисспептина требует дальнейшего исследования (Рисунок 18).Эстрогены↑GPR54GPR54↓чувствительности↓функциональнойактивностинейроновGPR54↓выброса гонадолибериновУровень кисспептина↑ХГЧ↑↓уровней ФСГ и ЛГЭстрогены↑Прогестерон↑Рисунок 18 — Механизм повышения уровня кисспептинаи снижения уровней ФСГ и ЛГ при беременностиОднако, как установлено в настоящее время, уровень эстрогенов ипрогестерона определяет избирательную активность нейроэндокринных клетокгипоталамуса и гонадотрофов [87, 54].
Одновременное повышение содержания вкрови прогестерона и эстрогенов (как это происходит во время беременности)снижает функциональную активность нейронов, ответственных за выработку79гонадолиберинов (как раз тех нейронов, на поверхности которых находятсярецепторы GPR54 и при присоединении кисспептина к которому происходитвыброс гонадолиберинов), что увеличивает интервал между фазами усиленнойсекреции ГнРГ до 2–3 ч [88, 151].
Поскольку период физиологической активностиГнРГ не превышает 2–4 минут, то ослабление его продукции в свою очередьблокирует продукцию гонадотропных гормонов в гипофизе (ФСГ и ЛГ), а,следовательно, рост и созревание очередного фолликула, что позволяет женщиневыносить беременность [169, 92, 206].Возможно, это происходит из-за снижения функциональной активностинейронов и/или снижения экспрессии на их поверхности рецептора GPR54 подвоздействием изменения гормонального фона. Весьма вероятно, что в дальнейшеми сам рост уровня кисспептина на этом фоне приводит к де- или гипосенситизациирецепторов GPR54 к кисспептину.Такимобразом,уровенькисспептинаможнорассматриватькакдополнительный критерий риска развития эндокринного бесплодия.Исследование гормонального статуса женщин с ановуляторной формойбесплодия показало, что у них отмечено резкое снижение уровня кисспептина вкрови до 0,203±0,047 нг/мл по сравнению со здоровыми, рожавшими женщинами,у которых содержание кисспептина в сыворотке крови колебалось в пределах9,45±0,13—3,21±0,53 нг/мл.
Низкий уровень кисспептина имел сильную обратнуюкорреляцию с уровнем пролактина (r=-0,98), уровень которого был повышен уженщин с бесплодием по сравнению с верхней границей нормы в среднем на 23,7%,и прямую корреляционную связь с уровнями снижения ФСГ и ЛГ (r=0,97) у даннойгруппы женщин. Причины повышения уровня пролактина у ряда женщин остаютсяактуальными вопросами современной медицины, так как единого мнения на этотвопрос нет, а наличие аденомы в ЦНС подтверждается далеко не у всех пациенток.Вместе с тем на выработку одного из наиболее важных гормонов - ГнРГ, которыйопределяет репродуктивные способности женщины и фертильность негативновлияет увеличение уровня пролактина, [49, 134].
Объяснение угнетающемудействию пролактина на нейроны гипоталамуса, в которых секретируется ГнРГ до80настоящего времени не существовало. Причиной этому был известный фактотсутствие сродства рецепторов большинства этих нейронов к пролактину. Такимобразом, была сформирована гипотеза о наличии неизвестного «передаточногозвена», которым оказался кисспептин [81]. Было установлено, что «пролактиндействует на гонадолиберин опосредованно» [108]. При помощи лабораторныхмышей, установлено что пролактин действует на нейроны, вышестоящего звена поотношению к гонадолибериновым нейронам [123]. «Эти “вышестоящие” нейронысекретируют нейрогормон, известный как кисспептин.
Взаимодействуя в головноммозге со своим рецептором, кисспептин активирует нейроны, высвобождающиеГнРГ. Он действует на гипофиз, в котором секретируются ФСГ и ЛГ, необходимыедля нормального функционирования репродуктивной системы» [91, 88, 118].Воздействие же пролактина инактивирует эту группу нейронов, приводя ксбою во всей цепочке продукции половых гормонов (Рисунок 19).Повышение уровняпролактинаСнижение активностинейронов аркуатногоядраСнижение уровнягонадолиберинаСнижение уровнякисспептинаСнижение уровнягонадотропиновСнижение уровня ФСГ иЛГОВУЛЯЦИЯРисунок 19 — Механизм снижения уровня кисспептина и формированияановуляторного бесплодия у женщин на фоне гиперпролактинемииВозможно, что на фоне гиперпролактинемии, управляя высвобождениемкисспептина, можно восстанавливать секрецию ГнРГ, перезапуская тем самымовариальный цикл и стимулируя овуляцию [118, 70].Для подтверждения этой гипотезы нами была проведена вторая часть81эксперимента.
Сначала половозрелым самкам линии Wistar с устойчивымэстральным циклом был введен, как и в первой части эксперимента, блокаторкисспептинергических рецепторов, что привело к нарушению его воздействия наGPR54–рецепторы, прекращению выработки гонадолиберинов и спровоцировалопролонгацию диэструса. В данном случае блокатор GPR54–рецепторов выступал вкачестве конкурентного антагониста по отношению к естественному медиаторукисспептину. При конкурентном антагонизме вещество вступает в конкурентноеотношение с естественным регулятором (медиатором) за места связывания вспецифических рецепторах.
Блокада рецептора, вызваннаяконкурентнымантагонизмом, может быть снята большими дозами вещества-агониста илиестественного медиатора.В связи с этим в эксперименте с половозрелыми самками крыс линии Wistarнам удалось введением раствора кисспептина «разблокировать» заблокированные(блокатором кисспептинергических рецепторов) рецепторы кисспептина ивосстановить нарушенную репродуктивную функцию, что свидетельствует овозможности использования кисспептина для лечения ановуляторного бесплодия,связанного с недостаточной продукцией или с нарушением связываниякисспептина со специфическими рецепторами.
Об изменении функциональногосостояния яичников подопытных крыс судили по соотношению эпителиальныхклеток в содержимом влагалища у животных. Подтверждением перехода стадиипокоя в фазу эструса стало появление соответствующей кольпоцитологическойкартины (появление «чешуек» — безъядерных клеток в кольпоцитологическоммазке крыс).
Кроме того, было зарегистрировано возрастание на фоне введениякисспептина КИ до 80,2%, что свидетельствовало о произошедшей на фоневведения кисспептина овуляции.Таким образом, была подтверждена важная роль кисспептина в регуляцииженскойрепродуктивнойсистемы,атакжевозможностьиспользованияэкзогенного кисспептина для нормализации гормонального баланса у женщин сэндокринной формой бесплодия.82ЗАКЛЮЧЕНИЕРезультаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что уровенькисспептина у здоровых женщин колеблется в широких пределах. Этотнейропептид оказывает существенное влияние на репродуктивную систему черезкисспептин-опосредованное снижение уровней ФСГ и ЛГ и нарушениефолликулогенеза в яичниках.
Это, в свою очередь, влияет на сроки зачатия прирегулярной половой жизни со здоровым партнером. Кроме того, кисспептин, повидимому, принимает участие в регуляции гестационных механизмов, чтоподтверждается увеличением его уровня на фоне беременности. Снижение уровнякисспептина ниже 1,7 нг/мл в сыворотке крови у соматически и гинекологическиздоровых женщин ассоциируется с риском ановуляции.Полученные в ходе исследования данные и разработанная на их основеметодика (Патент на изобретение №2574669 «Способ экспресс-диагностикиженского эндокринного бесплодия») позволяют рекомендовать кисспептин дляиспользования в качестве маркера риска и критерия диагностики бесплодия,связанного с отсутствием овуляции, а также для прогнозирования сроковвозможного наступления беременности.В результате исследования разработаны референсные значения уровнякисспептина у здоровых небеременных женщин и критерии для экспрессдиагностики эндокринного бесплодия.Полученные результаты позволяют сделать следующие выводы:1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
