Диссертация (1154740), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Снаружи область вшитоймембраны была прикрыта жировой тканью, причем, признаков воспалительнойреакции вокруг не было отмечено (Рисунок 24А).При вскрытии мочевого пузыря и осмотра его изнутри выявлено, чтослизистая оболочка практически на всем протяжении выглядит неизмененной, заисключением небольшой зоны, прилегающей к области имплантации мембраны,где видна отечная слизистая без признаков гиперемии (Рисунок 24Б). При этом69зона вшитой мембраны, не покрытая уротелием, значительно уменьшена посравнению с более ранними сроками наблюдения.
То есть, визуально имеет местосубтотальная эпителизация внутренней поверхности коллагенового имплантата срезорбцией вшитой мембраны с постепенным ее замещением собственнымитканями мочевого пузыря.АБРисунок 24 — Внешний вид мочевого пузыря через 21 сутки после вшиваниясвиной коллагеновой мембраны.А – вид с наружной стенки, Б – вид внутренней поверхностиПри гистологическом исследовании можно отметить, что воспаление70существенно уменьшилось, по сравнению с 14 сутками наблюдения, однакомембранапо-прежнемубылаокруженаочагамивоспаления(очаговыелейкоцитарные инфильтраты).
Однако они были разбросаны по площади среза изанимали небольшую площадь. Имплантированная мембрана на препаратахвыглядела сморщенной, наружная ее поверхность была покрыта уротелием,отмечали также ее значительное замещение соединительной тканью (Рисунок 25).Приэтом нив одном из экспериментов мы не выявиливрастаниягладкомышечных клеток в имплантат.Рисунок 25 — Гистологическая картина стенки мочевого пузыря через 21 суткипосле вшивания коллагеновой мембраны.Окраска гематоксилином и эозином, ув. 100хРезультатыэтойсерииэкспериментовсвидетельствуютовысокойбиологической инертности мембраны, приготовленной из свиного коллагена, и еевысокой способности интегрироваться в ткани организма. Ни в одном изэкспериментов не выявлено недостаточности швов и нарушения герметичностимочевого пузыря.
В связи с высокой концентрации мочи у кроликов внутренняяповерхность вшитой мембраны может покрываться ее компонентами, какбелковыми, так и солевыми. Это вызывает определенный воспалительныйпроцесс в прилежащей зоне, но, по всей видимости, существенно не нарушает71процесс эпителизации внутренней поверхности мембраны, поскольку ее площадьсо временем прогрессивно уменьшается.Сравнение результатов экспериментов с использованием мембран изсвиного и бычьего коллагена позволяет сделать определенный вывод опреимуществах мембран из свиного коллагена для уропластики.
Этот материалобладает более выраженной биоинертностью, вызывает менее выраженнуювоспалительную реакцию при его имплантации в мочевые пути по сравнению сбычьим коллагеном, как в самих органах мочевой системы, так и в прилежащихокружающих тканях. При имплантации свиной коллагеновой мембраны в мочевойпузырь происходит более быстрая ее эпителизация и замещение собственнымитканями мочевого пузыря. Однако при этом на всех сроках наблюдения непроисходит регенерации мышечной оболочки новообразованной стенки мочевогопузыря (как и в опытах с бычьей коллагеновой мембраной).В то же время и мембрану из бычьего коллагена можно считать приемлемымпластическим материалом, но не лишенным недостатков в виде недостаточнойбиологической инертности.Функциональные исследования с определением максимальной емкостимочевого пузыря (определяли по объему физиологического раствора, введенногочерез уретральный катетер, до начала подтекания жидкости помимо катетера)также выявили определенные различия между этими группами опытов.
Приопределении этого показателя через 7 дней после операции выявили его снижениев обеих группах до примерно одинаковых значений (34±1 и 37±2 мл прииспользовании мембран из бычьего и свиного коллагена, соответственно) принорме 48±2 мл (Рисунок 26). Через 14 дней и 21 день в опытах с бычьейколлагеновой мембраной емкость мочевого пузыря возросла незначительно,составив 36±1 и 39±1 мл, соответственно (различия достоверны только присравнении результатов через 7 и 21 день), тогда как в опытах со свинойколлагеновой мембраной уже через 14 дней происходило достоверное увеличениемаксимальной емкости мочевого пузыря — до 43±1 мл с дальнейшимпостепенным возрастанием до 45±1 мл (p<0,05).72Рисунок 26 — Динамика максимальной емкости мочевого пузыря (мл) после егорезекции и имплантации мембраны из бычьего и свиного коллагенаТаким образом, при использовании мембраны из свиного коллагена наряду сменее выраженной воспалительной реакцией в стенке мочевого пузыряпроисходит более быстрое восстановление его функциональных свойств, вчастности, максимальной емкости.В связи с этими данными, в дальнейших экспериментах для заместительнойпластики мочевых путей мы использовали препараты коллагена, изготовленные изтканей свиньи, учитывая их лучшие биологические свойства.2.3 Результаты пластики уретры трубчатым коллагеновым протезом.В этой серии опытов мы попытались использовать трубчатый коллагеновыйпротез для заместительной пластики мочеиспускательного канала.К сожалению, результаты этих экспериментов оказались неутешительными,однако причина неудачи была связана не с самим материалом, а с трудностямиобеспечения условий операции на мочевых путях, в частности, надежностьюдренирования реконструированной уретры в течение времени, достаточного длясрастания тканей уретры с имплантатом и герметизации уретры.Несмотря на фиксацию уретрального катетера нитью к головке половогочлена и использования пластикового «воротника» для затруднения доступа73кролику к катетеру, уже через сутки или на 2-й день животным удавалось извлечькатетер, который, по всей видимости, вызывал у них выраженный дискомфорт.
Врезультате этого во всех экспериментах развивался мочевой затек, который в 2случаях привел к выраженному воспалительному процессу в области операции снекрозом окружающих тканей и деструкцией имплантата (Рисунок 27). Этихживотных пришлось вывести из эксперимента в пределах 2 недель послеоперации.Рисунок 27 — Внешний вид области реконструкции уретры через 2 недели послеоперации. Выраженное воспаление с нагноением и некрозом окружающих тканейВ двух других экспериментах воспалительные изменения были не стольвыражены и со временем стихли, но образовалась облитерация дистальногоанастомоза и мочевой свищ, через который и осуществлялась эвакуация мочи(Рисунок 28). Эти 2 кролика были выведены из эксперимента через 1 месяц послеоперации.74Рисунок 28 — Внешний вид области реконструкции уретры коллагеновымпротезом (стрелкой указан мочевой свищ)При выполнении фистулографии выявлено, что контраст попадает вмочевой пузырь через реконструированную уретру, хотя большая его частьвытекает наружу (Рисунок 29).Рисунок 29 — Фистулография у кролика через 1 месяц после пластики уретрытрубчатым коллагеновым протезом75При ревизии области операции вывили, что коллагеновый имплантатполностью интегрирован в окружающие ткани.
Признаков воспалительнойреакции вокруг него не имеется. Окружающие ткани имеют нормальный вид(Рисунок 30).Рисунок 30 — Внешний вид удаленного коллагенового имплантата через 1 месяцпосле операции (стрелками указана область имплантата)При гистологическом исследовании выявили, что коллагеновая матрицаполностью замещена соединительной тканью организма. Внутренняя поверхностьнеоуретры выстлана атрофичным эпителием. Подслизистый слой склерозирован,содержит большое количество разнокалиберных кровеносных сосудов. Вокружающих тканях отмечена слабо выраженная воспалительная лейкоцитарнаяинфильтрация (Рисунок 31).Рисунок 31 — Гистологическая картина через 1 месяц после замещения уретрыколлагеновым трубчатым имплантатом.Окраска гематоксилином и эозином.
Увеличение 200х76Таким образом, результаты этой серии экспериментов показали, чтотрубчатый коллагеновый имплантат хорошо приживается в тканях при замещенииимучасткамочеиспускательногоканала.Онполностьюзамещаетсясоединительной тканью, прорастающей из собственных тканей, окружающихимплантат, и постепенно реваскуляризируется. Однако технические сложности вобеспечении адекватного дренирования мочевых путей не позволили получитьжелаемого результата. В связи с этим дальнейшие исследования мы проводили натехнически более простой модели — заместительной пластики мочевого пузыряпосле его резекции.2.4 Результаты заместительной пластики мочевого пузыряколлагеновым имплантатомЦелью этого раздела исследований было изучение характера регенерацииновообразованной стенки мочевого пузыря после его замещения мембраной изсвиногоколлагена1-готипа,содержащейилинесодержащейкондиционированную среду культивирования мезенхимальных стволовых клетокжировой ткани человека, а также определение показателей функциональногосостояния мочевого пузыря после цистопластики этими мембранами.
Контролем кэтим исследованиям служили опыты с резекцией мочевого пузыря беззаместительной цистопластики. Предпосылками к этим исследованиям сталиданные литературы и полученные нами в предыдущих сериях результаты,свидетельствующие, что коллагеновый имплантат замещается преимущественносоединительной тканью без регенерации мышечной оболочки, что можетсущественно влиять на функциональное состояние реконструированного мочевогопузыря.Оценку характера регенерации новообразованной стенки и функциональныхпоказателей проводили через 1 месяц после операции.В экспериментах с имплантацией нативной коллагеновой мембраны приревизии области операции через 1 месяц выявляли выраженную гиперемиюстенки мочевого пузыря в области операции.
Область вшитой мембраны прикрыта77новообразованными тканями мочевого пузыря (Рисунок 32).Рисунок 32 — Внешний вид мочевого пузыря через 1 месяцпосле пластики нативной коллагеновой мембранойМочевой пузырь наполнен мочой, стенка его выглядит расслабленной, чтосвидетельствует о нормальном тонусе мышечной оболочки.При вскрытии мочевого пузыря выявили, что внутренняя поверхностьимплантированной мембраны почти на всем протяжении покрыта слизистойоболочкой, с небольшими участками нерассосавшегося коллагена. Слизистаяоболочка новообразованной стенки выглядит цианотичной. Отека слизистой и еегиперемии, что может являться признаками выраженного воспаления, не выявили(Рисунок 33).Рисунок 33 — Вид внутренней поверхности мочевого пузыря через 1 месяц послеимплантации нативной коллагеновой мембраны(стрелкой указан нерассосавшийся коллаген)78При гистологическом исследовании выявили субтотальное замещениеимплантированной коллагеновой мембраны соединительной тканью с врастаниемотдельных кровеносных сосудов (Рисунок 34А).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
