Диссертация (1154728), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Демидовым и соавторами [28], подробно освещенные вобзоре литературы.На втором этапе УЗИ проводили ЦДК матки, при котором зона «цветовогоокна» помещается на нужную область серошкального изображения дляопределения локализации сосудов. Исследование проводили с помощьювнутриполостного микроконвексного датчика, работающего в диапазоне частот5–9 МГц. Красный цвет при картировании обозначал движение крови к датчику,синий — от датчика. Во 2 фазу МЦ регистрацию показателей проводили толькопри наличии ультразвуковых признаков свершившейся овуляции. Оцениваливизуализацию сосудов миометрия: аркуатных; радиальных; базальных испиральных артерий.
Симметрию васкуляризации в маточных артериях неоценивали, так как по нашим наблюдениям (и они совпадают с даннымилитературы [56]) визуализация сосудов миометрия всегда лучше в стенке матки,ближе расположенной к датчику.Следующим этапом комплексного УЗИ стала допплерометрия сосудовматки. Ее проводили путем проецирования метки контрольного объема на место,где выявлена наиболее яркая точка цветового картирования, или «наложением» нацветовое картирование.
Фиксировали не менее трех последовательных цикловкривойскоростикровотока,распознаваемыхпоаудиосигналуивидеоизображению. Отличительной чертой кривой скоростей кровотока впролиферативную фазу является протодиастолическая выемка, которая достигаетиногда нулевой линии и исчезает в секреторную фазу. При допплерометрииоценивали следующие параметры:— уголнезависимыеиндексы:пульсационныйиндекс(PI);индексрезистентности (IR) и систоло-диастолическое отношение (S/D) в маточныхартериях;— скоростные показатели в маточных артериях: максимальная скорость13систолического кровотока (Vmax) и конечная диастолическая скорость (Vmin).В сосудах меньшего калибра допплерометрию не проводили, так как вработах других авторов [90, 103] показано, что допплерометрические показатели вмелких сосудах имеют такие же динамические изменения при ХЭ, что и вматочных артериях.Уголнезависимые индексы рассчитывали (автоматически) по следующимформулам:PI= (Vmax–Vmin):TAMX,где TAMX – усредненная по времени максимальная скорость.В некоторых аппаратах при расчете PI вместо TAMX используется средняяартериальная скорость (Vmean), в таком случае это будет модификацией формулы,описанной в отечественной и зарубежной литературе, что приводит к разницецифровых значений [49].
В нашем исследовании мы применяли значения,полученные при использовании базовой формулы (с применением TAMX):IR=(Vmax–Vmin):Vmax;S/D= Vmax:Vmin.IR и S/D — взаимозаменяемые индексы, исторически появившиеся раньшеPI, характеризуют соотношение скоростей.
PI более адекватен для описанияхарактера перфузии тканей.Занормальныеультразвуковыеидопплерометрическиепоказателипринимали:— величину М-эха в «окно имплантации» (на 22-24 день МЦ) более 7,0 мм[89];— отсутствиеультразвуковыхпризнаковХЭпоклассификацииДемидова В.Н. и соавт. [28];— диффузную визуализацию кровотока в миометрии на уровне всехартерий миометрия вплоть до спиральных артерий. Нормальной визуализациейсосудов считали визуализацию аркуатных и радиальных артерий в 100%,визуализация базальных артерий в среднюю пролиферативную фазу в 60-70%случаев, в секреторную – в 85% случаев, спиральные артерии в среднююпролиферативную фазу в 30% случаев и в секреторную в 45-50% [56];14— наличиесистолическойидиастолическойсоставляющейкривыхскоростей кровотока в маточных артериях [56].Затруднением кровотока считали отсутствие визуализации вышеописанныхсосудов, отсутствие систолической и диастолической составляющей, повышениеуголнезависимых индексов, отсутствие снижения IR и S/D во вторую фазу цикла.Исследование в периферической крови лимфоцитов с фенотипом CD16+,CD56+ производили в лимфоцитотоксическом тесте путем выявления маркеров,присутствующих на лимфоидных клетках, с помощью моноклональных антител кдифференцировочным антигенам лимфоцитов (производство ООО «СорбентЛТД», г.
Москва). Результаты оценивали на инвертированном люминесцентноммикроскопе «Биолам–П-1» (производство АО «ЛОМО», Российская Федерация).В биоптате из полости матки оценивали субпопуляционный составлимфоцитов с фенотипом CD16+, CD56+, CD20+ и CD138+, а также число клеток,экспрессирующих антиген HLA-DR. Забор материала осуществляли на 7-11 деньМЦ (использовали материал, полученный для гистологического исследования).Исследование фенотипического состава лимфоцитов в эндометрии выполненоиммуногистохимическим методом с использованием моноклональных антителфирмы «Novocastra» (Великобритания), подсчет лимфоцитов осуществлялся всветовом микроскопе при увеличении ×400 в трех полях зрения.Обозначение кластеров дифференцировки (CD) дано в соответствии сМеждународной классификацией.
CD 56+, 16+ — маркеры, специфичные длялимфоцитов с функцией NK, CD20+ — клетки гуморального иммунитета (Влимфоциты),CD138+экспрессирующие—антигенплазматическаяинфильтрация.HLA-DR, отражают аутоиммунныйКлетки,компонентвоспалительной реакции. В периферической крови оценивали лейкоцитарнуюформулу, относительное (%) и абсолютное количество лимфоцитов с фенотипомCD 56, 16+.
В биоптатах из полости матки оценивали количество лимфоцитов сфенотипом CD 56+, CD 16+, CD20+, CD138+, а также клеток, экспрессирующихантиген HLA-DR, в поле зрения.ДляколичественногоопределенияАМГФосуществлялизаборменструальной крови на 2-3 день МЦ. Забор осуществляли в сухую пробирку-15эвакуэту и доставляли в лабораторию.Концентрацию АМГФ определяли твердофазным иммуноферментныманализом, который включает иммунологическую реакцию антиген-антитело посэндвич-принципу и ферментативную реакцию. Исследование проводили у всехпациенток, вошедших в исследование (n=97).Референсными значениями считали 16000–70000 нг/мл. Планированиебеременности рекомендовали при показателях АМГФ не менее 16000 нг/мл [7].Для оценки количественного и качественного состава микрофлорыцервикального канала материал получали с помощью специального стерильногоурогенитального зонда со щеточкой.
Зонд на 1,0–1,5 см вводили в цервикальныйканал, осторожно ротировали по часовой стрелке на 360°, извлекали, не допускаяконтакта со стенкой влагалища. Биоптат из полости матки, полученный во времягистероскопии, также был исследован на состав микрофлоры. Материалыпомещали в специальные транспортные контейнеры TRANSYSTEM AMIES W/OCH (производитель компания TRANSYSTEM, Соединенные Штаты Америки).В лаборатории клинической бактериологии производили посев материалана серию питательных сред для определения различных групп микроорганизмов:маннитсолевой агар (для выделения стафилококков); 5% кровяной агар на основебруцеллезного агара с добавлением витаминных ростовых факторов (длявыделения анаэробов); среду Сабуро (для выделения грибов); среду Левина (длявыделения грамотрицательных бактерий). Для культивирования анаэробовиспользовали анаэростаты фирмы «Becton Dickinson» (Соединенные ШтатыАмерики).
Среды с кровяным агаром культивировали в термостате с повышеннымсодержанием углекислого газа (5-10%).Идентификацию микроорганизмов и определение их чувствительности кантибиотикам проводили с помощью бактериологического анализатора «Vitek»(производитель BioMerieux, Российская Федерация). Учет результатов вели постандартам национального комитета по клиническим и лабораторным стандартамСША (NCCLS) (1999-2000 г.). Инкубацию посевов проводили при температуре37°С, 24–48 часов, просматривали ежедневно. В условиях с повышеннымсодержанием СО2 инкубировали чашки с 5% кровяным агаром.16Подсчет колоний различной морфологии проводилис учетом ихсоотношения, определяли видовую идентификацию микроорганизмов и ихчувствительность к антибактериальным препаратам.
При отсутствии роста на всехпитательных средах в течение 72–96 часов фиксировали отрицательный результатисследования.Для диагностики методом ПЦР материал забирали из полости маткистерильным урогенитальным зондом, после чего его помещали в специальнуюпробирку типа «Эппендорф» с транспортным раствором. В лабораториипроводили анализ на наличие облигатно-патогенных микроорганизмов (Chlamydiatrachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium и Neisseria gonorrhoeae).Согласно дизайну исследования, лечение ХЭ после трех и более НБсостояло из двух этапов и включало аппаратное физиотерапевтическоевоздействие [46].В аппарате используется комплексное воздействие следующих физическихфакторов: полупроводниковое низкоинтенсивное лазерное и светодиодноеизлучение, электрическая стимуляция органов малого таза, локальное магнитноеполе, нейростимуляция по зонам Захарьина-Геда, цветоритмотерапия.Комплекс работает от сети переменного тока частотой 50 Гц с номинальнымнапряжением 220 В при отклонении напряжения в сети на +10%.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
