Диссертация (1154497), страница 11
Текст из файла (страница 11)
и грибоврода Candida, при этом в состоянии экспериментального ДБ концентрация MDAбыла сопряжена с количеством E.coli (lac«+»).60Глава 4. Микробный состав мукозной микробиоты толстой кишки иантиоксидантной защиты колоноцитов животных на стадии коррекциисостояния дисбиоза бактистатином и нормобактом4.1 Микробный состав мукозной микробиоты толстой кишки прикоррекции бактистатином и нормобактомПрименениебактистатинаоказалоположительноевоздействиенаколичественное содержание 12 из 13 представителей, определяемых в составемукозной микробиоты ТК. При этом использование пробиотика привело кувеличению численности Bifidobacterium spp. в 1,8 раза (р≤0,01), Lactobacillus spp.в 1,8 раза (р≤0,05), E.coli (lac«+») в 2,1 раза (р≤0,001), восстановлениюколичественныххарактеристикпредставителейродовCitrobacterlgКОЕ=(4,27±0,68) и Enterococcus lgКОЕ=(5,85±0,71).
Количественные значенияопределяемого показателя для Salmonella spp. lgКОЕ=(3,04±0,68), Streptococcusspp.lgКОЕ=(3,21±0,51),Staphylococcusspp.(коагулазоотрицательных)lgКОЕ=(3,14±0,66) и грибов рода Candida lgКОЕ=(1,25±0,55) на фоне коррекциистатистически значимо снизились по отношению к группе животных сантибиотик-ассоциированным ДБ.
При этом в составе мукозной микробиоты невыявлены Staphylococcus aureus и микроорганизмы рода Proteus (таблица 15).В группе животных, получавших синбиотик нормобакт, значимо изменилисьзначения lgКОЕ 9 из 13 представителей, определяемых в составе микробиоценозаТК. Количество E.coli (lac«+») и Lactobacillus spp. увеличилось в 2,0 раза(р≤0,001) и в 1,9 раза (р≤0,01), соответственно, и достигло значений контрольнойгруппы животных.
Содержание Streptococcus spp. и Staphylococcus spp.(коагулазоотрицательных) снизилось в 1,5 раза (р≤0,05) и в 2,0 раза (р≤0,05),соответственно. При этом в составе мукозной микробиоты не выявленыStaphylococcus aureus, микроорганизмы родов Proteus и Enterococcus. Citrobacterspp.,отсутствовавшиевгруппе«ДБ»,определялисьвколичествеlgКОЕ=(3,14±0,72), что является сопоставимым результатом со значениемопределяемого показателя в контрольной группе животных. Статистически61значимых изменений содержания E.coli (lac«-»), бактерий родов Enterobacter иSalmonella, Bifidobacterium spp. не выявлено (таблица 15).Таблица 15 Влияние бактистатина и нормобакта на состав мукозноймикробиоты ТК мышей (n=50)ВыделенныемикроорганизмыконтрольКоличество микроорганизмов, lgKOE/г (M±m)группа животныхДБкоррекциябактистатином3,18±0,466,63±0,58(ххх)5,22±0,733,76±0,465,08±0,485,85±0,78**6,14±0,763,04±0,68* (хх)0±04,27±0,68(ххх)0±05,85±0,71(ххх)6,64±0,783,21±0,51(ххх)5,87±0,943,14±0,66(х)E.
coli (lac«+»)6,58±0,75E. coli (lac«-»)3,48±0,57Enterobacter spp.3,01±0,47Salmonella spp.5,07±0,63Citrobacter spp.3,74±0,72Enterococcus spp.3,85±0,90Streptococcus spp.2,14±0,55Staphylococcus spp.2,54±0,67(коаг.)Staphylococcus0aureusProteus spp.0Candida spp.2,38±0,49Lactobacillus spp.6,48±0,66Bifidobacterium spp.8,10±1,05Примечание: * - р≤0,05 по сравнению5,87±1,480±0(ххх)коррекциянормобактом6,35±0,73(ххх)3,31±0,905,61±0,78*4,79±0,693,14±0,72(ххх)0±0***4,34±0,68* (х)2,90±0,64(х)0±0(ххх)3,12±0,450±0(ххх)0±0(ххх)(ххх)5,43±0,901,25±0,552,34±0,75(хх)(х)3,60±0,826,43±0,856,81±0,79(хх)(хх)4,76±0,948,60±1,027,78±1,22с контрольной группой, ** - р≤0,01 по сравнению с контрольнойгруппой, *** - р≤0,001 по сравнению с контрольной группой; х - р≤0,05 по сравнению с группой дисбиоз, хх - р≤0,01по сравнению с группой дисбиоз, ххх - р≤0,001 по сравнению с группой дисбиоз.При коррекции бактистатином проведенный КА выявил статистическизначимую взаимосвязь прямой направленности между Streptococcus spp.
игрибами рода Candida (r=0,84) (таблица 16).Дендрограмма 5, полученная по результатам КЛА, иллюстрирует, что прикоррекции бактистатином формируется независимый простой кластер междубактериями рода Streptococcus и грибами рода Candida.62Таблица16Корреляционнаяматрицаколичественногосодержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК животных при коррекции бактистатином(n=50)НаименованиеE. coli1 E. coli2 Enterob SalmмикроорганизмаE. coli11,00E.
coli2,671,00Enterob,57,101,00Salmon- ,32- ,65,121,00Citr- ,37,34- ,41- ,61Enteroc,64,14,17,12Strept,02,60- ,51- ,58Staph- ,37- ,35,21- ,08Cand,18,64- ,33- ,45Lact- ,17,09,03- ,06Bif- ,30- ,31,13- ,17* - статистически значимые коэффициенты (р<0,05).CitrEnterocStreptStaphCandLactBif1,00- ,63,52,37,26,42,121,00- ,37- ,46- ,19- ,10- ,531,00- ,40,84*- ,10,101,00- ,54- ,05,121,00- ,13,051,00,231,00Дендрограмма 5 корреляционных взаимосвязей количественного содержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК животных при коррекции бактистатиномПри коррекции нормобактом КА выявил статистически значимые взаимосвязипрямой направленности между Streptococcus spp. и бактериями рода Citrobacter(r=0,88);обратнойнаправленности–междуStaphylococcusspp.(коагулазоотрицательными) и Lactobacillus spp. (r= -0,74); бактериями родаSalmonella и Lactobacillus spp.
(r= -0,71) (таблица 17).63Таблица17Корреляционнаяматрицаколичественногосодержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК животных при коррекции нормобактом(n=50)НаименованиеE. coli1E. coli2 EnterobмикроорганизмаE. coli11,00E. coli2,021,00Enterob- ,05- ,011,00Salm- ,07,03- ,02Citr- ,28- ,42,01Strept- ,57- ,37,23Staph,50- ,26- ,12Cand,11- ,18,16Lact,05,02- ,03Bif,02- ,23,44* - статистически значимые коэффициенты (р<0,05).SalmCitrStreptStaphCandLactBif1,00,24,24,48- ,37-, 71*,611,00,88*- ,07,37,07,621,00- ,10,18- ,17,641,00- ,01- ,74*,491,00,44,291,00- ,501,00Выполненный на базе корреляционной матрицы КЛА определил, что прикоррекциинормобактомколичественныепоказателимикроорганизмовформировали отдельный кластер между Streptococcus spp.
и бактериями родаCitrobacter. Кластеры между бактериями рода Salmonella и Lactobacillus spp.;между Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательными) и Lactobacillus spp. несформированы в виду наличия статистически значимой обратной взаимосвязи(дендрограмма 6).Дендрограмма 6 корреляционных взаимосвязей количественного содержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК животных при коррекции нормобактом64Для проверки статистически значимых различий в характере взаимноговарьирования показателей микробного состава ТК в пределах каждой группы былиспользован ДА. Проведено сравнение корреляционных матриц групп коррекциипрепаратами с доказанным пробиотическим эффектом как между собой, так и скорреляционными матрицами животных с экспериментальным ДБ и контрольнойгруппы животных.
При этом наблюдаемое значением F-отношения междукорреляционными матрицами статистически значимо было больше теоретическиожидаемого значения F: «Коррекция бактистатином» – «Контроль» – в 4,8 раза,«Коррекция бактистатином» – «ДБ» – в 65,4 раза, «Коррекция нормобактом» –«Контроль» – в 9,2 раза, «Коррекция нормобактом» – «ДБ» – в 24,2 раза,«Коррекция бактистатином» – «Коррекция нормобактом» – в 33,9 раза.Полученные данные свидетельствуют о том, что применение препаратов свыраженнымкачественногопробиотическимиэффектомколичественногоспособствовалосоставанормализациимикробиотыТКприэкспериментальном антибиотик-ассоциированном ДБ.
При этом результат,полученный при коррекции бактистатином, оказался более выраженным (таблица18).Таблица 18 Величина F-отношения между корреляционными матрицами прикоррекции бактистатином и нормобактомНаименование сравниваемых группКоррекция бактистатином - КонтрольКоррекция бактистатином - ДБКоррекция нормобактом - КонтрольКоррекция нормобактом - ДБКоррекция бактистатином - КоррекциянормобактомВеличина F(наблюдаемоезначение)9,69 р<0,01130,71 р<0,00118,45 р<0,00148,34 р<0,00167,93 р<0,001Величина F(теоретическиожидаемое)2,00 р<0,05654.2 Биохимические показатели крови и колоноцитов мышей на стадиикоррекции состояния дисбиоза бактистатином и нормобактомСодержание MDA при коррекции препаратами с зафиксированным в опытепробиотическим эффектом снизилось в колоноцитах в 1,3 раза (р≤0,05)(бактистатином) и в 1,5 раза (р≤0,001) (нормобактом), осталось без изменений вплазме крови.
Концентрация AGP в условиях коррекции не имела статистическизначимых изменений как в колоноцитах, так и в плазме крови (таблица 19).Таблица 19 Содержание продуктов ПОЛ при коррекции пробиотикамибактистатин и нормобакт (n=50)Группа животныхКонтрольДБКоррекция бактистатиномКоррекция нормобактомСодержание MDA, (М±m)плазма,колоноциты,мкмоль/лмкмоль/г ткани2,41±0,182,32±0,193,98±0,314,67±0,373,69±0,21*** 3,57±0,18*** (х)3,50±0,30** 3,16±0,19** (ххх)Содержание AGP, (М±m)плазма,колоноциты,у.е.у.е0,86±0,070,35±0,041,24±0,100,82±0,061,02±0,070,68±0,06***1,06±0,060,71±0,07***Примечание: ** - р≤0,01 по сравнению с контрольной группой, *** - р≤0,001 по сравнению с контрольнойгруппой; х – р≤0,05 по сравнению с группой дисбиоз,ххх– р≤0,001 по сравнению с группой дисбиозДанные исследования показали, что активность фермента KAT при коррекциибактистатином по сравнению с полученным результатом у животных сэкспериментальным ДБ увеличилась в 1,5 раза (р≤0,001), препаратом нормобакт –в 1,6 раза (р≤0,001) в плазме крови, достигнув уровня значений контрольнойгруппы животных.
При этом в колоноцитах статистически значимые измененияне выявлены. Аналогичную динамику наблюдали в плазме крови при изученииизмененияактивностиферментаSODприкоррекциисостоянияэкспериментального антибиотик-ассоциированного ДБ бактистатином – в 1,3 раза(р≤0,01), нормобактом – в 1,2 раза (р≤0,05) и в колоноцитах – в 1,7 раза (р≤0,001)и в 1,8 раза (р≤0,001), соответственно (таблица 20).66Таблица 20 Активность ферментов АОЗ при коррекции бактистатином инормобактом (n=50)Группа животныхКонтрольДБКоррекция бактистатиномКоррекция нормобактомПримечание:хАктивность KAT, (М±m)плазма,колоноциты,мкат/млмкат/г ткани11,87±1,1113,88±0,859,18±0,5810,63±0,54ххх13,52±0,8612,26±0,6514,43±0,75ххх11,64±0,67- р≤0,05 по сравнению с группой ДБ,ххАктивность SOD, (М±m)плазма,колоноциты,у.е.у.е14,47±0,7415,85±1,0311,77±0,628,14±0,87хх15,45±0,9814,15±1,07ххх14,68±0,99х14,83±0,68ххх- р≤0,01 по сравнению с группой ДБ,ххх- р≤0,01 посравнению с группой ДБ.Проведенный КА по показателям активности ферментов системы АОЗ исодержания продуктов ПОЛ, статистически значимых взаимосвязей как вколоноцитах, так и в плазме крови животных при коррекции нормобактом невывил.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
