Диссертация (1154497), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Аналогичная динамика наблюдалась при изучении измененияактивности фермента SOD – снижение активности на 18,7% (р≤0,01) в плазмекрови и на 48,6% (р≤0,001) в колоноцитах.Таблица 7 Активность ферментов АОЗ контрольной группы животных иживотных с экспериментальным ДБ (n=50)Группа животныхКонтрольДБАктивность KAT, (М±m)плазма,колоноциты,мкат/млмкат/г ткани11,87±1,1113,88±0,859,18±0,58*10,63±0,54**Активность SOD, (М±m)плазма,колоноциты,у.е.у.е14,47±0,7415,85±1,0311,77±0,62**8,14±0,87***Примечание: * - р≤0,05 по сравнению с контрольной группой, ** - р≤0,01 по сравнению с контрольной группой,*** - р≤0,001 по сравнению с контрольной группой.Проведенный КА количественного содержания продуктов ПОЛ и активностиферментов системы АОЗ как в колоноцитах, так и в плазме крови контрольнойгруппы животных статистически значимых взаимосвязей не выявил (таблицы 8 –11).Таблица 8 Корреляционная матрица количественного содержания продуктовПОЛ и активности ферментов системы АОЗ в колоноцитах контрольной группыживотных (n=50)НаименованиеKATSODMDAAGPKAT1,00- ,16- ,19,48SODMDAAGP1,00,10,211,00- ,261,0054Таблица 9 Корреляционная матрица количественного содержания продуктовПОЛ и активности ферментов системы АОЗ в плазме крови контрольной группыживотных (n=50)НаименованиеKATSODMDAAGPKAT1,00,34- ,07,16SODMDAAGP1,00- ,46- ,091,00,551,00Таблица 10 Корреляционная матрица количественного содержания продуктовПОЛ и активности ферментов системы АОЗ в колоноцитах животных сэкспериментальным ДБ (n=50)НаименованиеKATSODMDAAGPKAT1,00,18- ,03- ,05SODMDAAGP1,00,44,001,00- ,241,00Таблица 11 Корреляционная матрица количественного содержания продуктовПОЛ и активности ферментов системы АОЗ в плазме крови животных сэкспериментальным ДБ (n=50)НаименованиеKATSODMDAAGPKAT1,00- ,69,28- ,01SODMDAAGP1,00- ,33,011,00,661,00Проведенный сравнительный анализ корреляционных матриц биохимическихпоказателей колоноцитов контрольной группы животных и животных сэкспериментальным ДБ показал, что наблюдаемое значение F было большетеоретически ожидаемого значения в 17,5 раз, что подтверждает негативноевлияние ксенобиотика гентамицина на прооксидантно-антиоксидантный балансколоноцитовмышейприсозданииассоциированного ДБ (таблица 12).экспериментальногоантибиотик-55Таблица 12 Величина F-отношения между корреляционными матрицами приэкспериментальном ДБВеличина F(наблюдаемоезначение)45,66 р<0,001Наименование сравниваемых группКонтроль - ДБВеличина F(теоретическиожидаемое)2,61 р<0,053.3 Взаимосвязи между количественным составом пристеночноймикробиоты толстой кишки, содержанием продуктов липопероксидации иактивностью ферментов системы антиоксидантной защиты колоноцитовДлявыявлениявзаимосвязимеждусоставоммикробиоценозаТК,количественным содержанием продуктов ПОЛ и активностью ферментов системыАОЗ колоноцитов был проведен КА.
Коэффициенты корреляций в каждой группеживотных демонстрируют степень взаимозависимости значений показателей. КАвыявил наиболее выраженные статистически значимые взаимосвязи прямойнаправленности между продуктом ПОЛ MDA и бактериями рода Citrobacter(r=0,88), MDA и грибами рода Candida (r=0,79) (таблица 13).Таблица13Корреляционнаяматрицаколичественногосодержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК, продуктов ПОЛ и активности ферментовсистемы АОЗ колоноцитов контрольной группы животных (n=50)Наименованиемикроорганизма/фермента АОЗ/продукта ПОЛKATSODMDAAGPE.
coli1E. coli2EnterobSalmCitrEnterocStreptStaphCandLactBifKATSODMDAAGP1,00- ,16- ,19,48- ,25- ,65- ,44- ,42,18- ,51,08- ,51,11- ,03- ,311,00,10,21- ,42- ,15,37,63,12,04,35- ,04- ,34,11,311,00- ,26- ,21- ,13,45,51,88*- ,33- ,09- ,20,79*,33,061,00- ,40,12- ,45- ,53,13,36,22,28- ,03- ,32- ,43E.coli1E.Enterob Salmcoli21,00,18- ,35- ,22- ,53- ,08- ,00,35- ,37- ,66- ,181,00- ,10- ,34- ,25,72*- ,03,74*- ,01- ,34- ,37* - статистически значимые коэффициенты (р<0,05).1,00,70,35- ,03,39- ,42,14,49,541,00,29- ,24- ,03- ,29,01,55,70Citr1,00- ,30,03- ,33,85*,36,07Enteroc Strept Staph Cand1,00- ,09,78*- ,22- ,09,131,00- ,27- ,30- ,46- ,231,00- ,21- ,44- ,131,00,39- ,21LactBif1,00,641,0056Проведенный КЛА показал приоритетность во взаимосвязях, которые получилиотражение в дендрограммах.
Дендрограмма 3 иллюстрирует формированиекластера между продуктом ПОЛ MDA и бактериями рода Citrobacter, которыйпоследовательно связан с количественным содержанием грибов рода Candida.Дендрограмма 3 корреляционных взаимосвязей количественного содержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК, продуктов ПОЛ и активности ферментовсистемы АОЗ колоноцитов контрольной группы животныхУ животных с экспериментальным ДБ при проведении КА прямую взаимосвязьнаблюдали между продуктом ПОЛ MDA и E.coli (lac«+») (r=0,73) (таблица 14).В группе мышей с антибиотик-ассоциированным ДБ независимо был выраженкластер между продуктом ПОЛ MDA и E.coli (lac«+») (дендрограмма 4).57Таблица14Корреляционнаяматрицаколичественногосодержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК, продуктов ПОЛ и активности ферментовсистемы АОЗ колоноцитов при экспериментальном ДБ (n=50)Группа ДБНаименованиемикроорганизма/фермента АОЗ/продукта ПОЛKATSODMDAAGPE.
coli1E. coli2EnterobSalmStreptStaphStaph. auProtCandLactBifKATSOD1,00,18- ,03- ,05- ,30- ,19,09,18,32,11,34,43,15,10- ,661,00,44,00,08,07- ,43,19- ,08- ,12,12,50- ,60,09,16MDA1,00- ,24,73*- ,40,49,16,25,26,34,09- ,25,66- ,24AGP1,00,24- ,09,05- ,05- ,06- ,24,01- ,09- ,24- ,39,62E.coli1E.coli21,00- ,19,67,06,16,25,20- ,20- ,41,34,081,00- , 59- ,02,04,42- ,25,02- ,17- ,37,07EnterobSalmStreptStaph1,00,24,22,14,28- ,27,09,42- ,371,00- ,62- ,36- ,49- ,33- ,44- ,42-, 101,00,82*,79*,46,31,70- ,511,00,38,10,31,70- ,51Staph.au1,00, 78*- ,11,83*- ,33ProtCandLactBif1,00- ,37,53- ,181,00,04- ,401,00- ,461,00* - статистически значимые коэффициенты (р<0,05).Дендрограмма 4 корреляционных взаимосвязей количественного содержаниямикроорганизмов в муциновом слое ТК, продуктов ПОЛ и активности ферментовсистемы АОЗ колоноцитов при экспериментальном ДБ58Таким образом, по результатам исследования установлено, что созданиеэкспериментального антибиотик-ассоциированного ДБ привело к изменениюкачественного и количественного микробного состава ТК – в мукозноймикробиоте появились Proteus spp.
и Staphylococcus aureus, уменьшилоськоличественное содержание E.coli (lac«+»), увеличилась численность E.coli(lac«-»),Enterobacterspp.,Streptococcusspp.,грибовродаCandidaиStaphylococcus spp. (коагулазоотрицательных), значимо снизилось количествоLactobacillus spp., Bifidobacterium spp.. При этом в микробиоценозе ТК неидентифицировались представители родов Citrobacter и Enterococcus.При введении животным антибиотика широкого спектра действия негативныеизменения произошли и в системе АОЗ организма – снизилась активностьосновных ферментов, формирующих первую линию защиты (SOD и KAT), чтопривело к увеличению содержания в исследуемом биоматериале продуктов ПОЛ(AGP и MDA), как в эпителиоидных клетках ТК, так и в плазме крови.
Стоитотметить, что нарушение АОЗ было более выражено в колоноцитах – это,вероятнее всего, обусловлено как тем, что при экспериментальном антибиотикассоциированном ДБ в микробиоте ТК произошло увеличение численностиотдельных видов микроорганизмов, соответственно, накопление продуктов ихметаболизма, так и действием самого гентамицина.Анализзакономерностейвзаимосвязанногоизмененияколичественныххарактеристик в микробиоценозе ТК при проведении КА показал, что в группеживотных с экспериментальным ДБ сохранилось число ассоциативных связей посравнению с контрольной группой, однако общие взаимосвязи не были выявлены.В контроле сформировались группы сопряжения между Citrobacter spp. и грибамирода Candida; Staphylococcus spp.
(коагулазоотрицательными) и бактериями родаEnterococcus; E.coli (lac«-») и Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательными);E.coli (lac«-») и Enterococcus spp. При гентамициновом ДБ образовано четыревзаимосвязи прямой направленности между Lactobacillus spp. и Staphylococcusaureus; Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательными) и бактериями рода59Streptococcus; Staphylococcus aureus и Streptococcus spp.; Staphylococcus aureus ибактерями рода Proteus.При проведении КЛА в контрольной группе животных установлено, чтовзаимосвязь между бактериями Citrobacter spp. и грибами рода Candida являласьнезависимойот другихпредставителеймикробиоценозаТК.ПриэтомStaphylococcus spp.
(коагулазоотрицательные), бактерии рода Enterococcus и E.coli(lac«-») сформировали сложный кластер, в котором значение коэффициентакорреляциямеждуEnterococcusиspp.Staphylococcusspp.(коагулазоотрицательными) было наиболее высоким.При экспериментальном ДБ КЛА выявил многокомпонентный кластер, в составкоторого вошли Lactobacillus spp. и Staphylococcus aureus, коррелирующие междусобой; группа сопряжения Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательные) ибактерии рода Streptococcus, которые были взаимосвязаны друг с другом ипоследовательно связаны с Proteus spp.Стоитотметить,чтостатистическизначимыхвзаимосвязеймеждуколичественным содержанием продуктов ПОЛ и активностью ферментов АОЗ какв колоноцитах, так и в плазме крови обеих групп животных КА не выявил.ПрипроведенииДАбылаопределенастепеньразличиямеждукорреляционными матрицами как количественных показателей микробиоценозаТК, так и значений, характеризующих статус прооксидантно-антиоксидантногобаланса исследуемого биотопа обеих групп.
Численное значение наблюдаемого Fотношения статистически значимо отличалось от теоретически ожидаемогозначения F.Важное значение для понимания процессов, происходящих на клеточном иорганизменном уровне при ДБ ТК, имеет определение взаимосвязей в комплексе:«представители микробиоты ТК – активность ферментов системы АОЗ –содержание продуктов ПОЛ». Применение КА и КЛА помогло установить, что вконтроле содержание MDA зависело от численности Citrobacter spp.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
