Диссертация (1154341), страница 32
Текст из файла (страница 32)
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ РОЛЬ МАРКЕРОВ ПРОЛИФЕРАЦИИИ АПОПТОЗА, БИОМОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ(KI67, P27, P53, CYCLINE), РЕЦЕПТОРНОГО СТАТУСА ЭНДОМЕТРИЯВ ИДЕНТИФИКАЦИИ ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССАЭНДОМЕТРИЯ5.1 Результаты иммуногистохимических методов исследованиярецептивного статуса эндометрияПроведенное иммуногистохимическое исследование позволило установитьособенности экспрессии ER и PR при ГПЭ в возрастном аспекте. Оценку уровнястероидных рецепторов проводили как в эпителии желез, так и строме эндометрия(Рисунок 5.1).
Чувствительность эндометрия к ER в репродуктивном возрастепредставлена следующим образом: при электронной микроскопии в 72,7%эпителиальных клеток и 58,3% клеток стромы при ЖГЭ, в 83,4% и 72,8%соответственно при ПЭ выявлено интенсивное окрашивание ядер в коричневыйцвет. Результаты иммуногистохимической реакции на PR в репродуктивномвозрасте представлены следующим образом: число ядер, экспрессирующих PR, вжелезистом эпителии при гиперплазии эндометрия составило 66,9%, в клеткахстромы — 52,7%. Морфометрическое исследование железистых структур на PRпри ПЭ выявило в 79,6% эпителиоцитов и 61,2% клеток стромы интенсивноеокрашивание ядер в коричневый цвет.В переходном возрасте число ядер, экспрессирующих ЕR, в железистомэпителии при гиперплазии эндометрия составило 42,9%, в клетках стромы —58,1%. Морфометрическое исследование железистых структур на ER при ПЭвыявило в 40,3% эпителиоцитов и 32,4% клеток стромы интенсивное191Экспрессия ER(гиперплазияэндометрия)Экспрессия PR(гиперплазия эндометрия)Экспрессия ER(полип эндометрия)Экспрессия PR(полип эндометрия)Экспрессия ER (атипическая Экспрессия PR (атипическаягиперплазия эндометрия)гиперплазия эндометрия)Рисунок 5.1 — Экспрессии стероидных рецепторов (ER и PR) пригиперпластических процессах в эндометрииокрашивание ядер в коричневый цвет.
Число ядер, экспрессирующих PR, вжелезистом эпителии при гиперплазии эндометрия составило 36,9%, а в клетках192стромы — 53,2%, при ПЭ — 42,3% и 51,9% соответственно. Экспрессия ER и PR,выявленная при АГЭ, характеризовалась мозаичной картиной за счет обеднения(вплоть до полного опустошения) ядер эпителия отдельных желез и клеток стромыв отношении окрашивания, что указывало на снижение экспрессии рецепторов какв репродуктивном возрасте, так и в период менопаузального перехода.Для оценки достоверности полученных результатов также было приняторешение провести пересчет экспрессии ER и PR в ядрах клеток эпителия желез истромы исследуемых биоптатов эндометрия по методу гистологического счета Hscore. При сравнении уровня рецепторов в эпителии желез эндометрия наоснованииподсчетаиммуногистохимическогоиндекса(H-score)былоустановлено, что в репродуктивном возрасте средний уровень ER в эпителии железсоставляет 248,1 балла и достоверно выше, чем в период менопаузального перехода(208,5 баллов), средний уровень PR — 245,3 и 203,2 балла соответственно.
Приоценке равномерности распределения рецепторов в эпителии желез эндометриябыло выявлено, что у 68,5% женщин в репродуктивном и у 44,8% в периодменопаузального перехода имеет место нерегулярное распределение метки ERи/или PR, вплоть до их полного исчезновения. При этом наибольшее число«рецептор-негативных» зон (78,1% в репродуктивном и 41,6% в периодменопаузального перехода) приходилось на ER.Таким образом, при ГПЭ наблюдается снижение уровня ER в железистомкомпоненте в репродуктивном возрасте и снижение ER и PR в периодменопаузального перехода, что сопровождается дефектами распределениярецепторов в обеих группах. При оценке экспрессии рецепторов в стромеэндометрия при ГПЭ выявлено, что в репродуктивном возрасте экспрессия ERсоставляет 246,1 баллов и PR — 208,5 балла, в переходном периоде уровень ERсоставляет 214,3 балла, что достоверно ниже, чем в репродуктивном возрасте;уровень PR — 202,8 балла (p=0,091) по сравнению с таковыми в групперепродуктивного возраста.
Из вышеизложенного следует, что уровень рецепторовв строме эндометрия при ГПЭ характеризуется снижением ER, подобно состояниюER в эпителии желез эндометрия. Количество PR не имеет достоверных различий193между группами.Таким образом, при сравнительном анализе рецепторов в эпителии желез иклетках стромы эндометрия при ГПЭ в возрастном аспекте выявлено, чтоэкспрессия PR статистически значимо превышает экспрессию ER как врепродуктивном возрасте, так и в период менопаузального перехода. Соотношениеуровней экспрессии ER/PR в норме соответствует 1,0 в эпителии желез и 0,9 – вклетках стромы. При ГПЭ в репродуктивном возрасте этот показательсоответствует норме (1,0) и увеличивается до 1,2 (при норме – 0,9) в клеткахстромы.
В переходномном возрасте — 1,03 и 1,1 соответственно.Итак,содержаниерецепторовгормоновприГПЭ характеризуетсяпреобладанием уровня PR относительно ER как в репродуктивном, так и в периодеменопаузального перехода. При этом различия в отношении PR как в железах, таки в строме достоверны.
Это наблюдение соответствует представлениям о развитииотносительной гиперэстрогении у женщин в период менопаузального перехода.Анализируя экспрессию рецепторов к стероидным гормонам в зависимости отнозологической формы заболевания, следует отметить, что для ЖГЭ и ПЭхарактерна умеренная экспрессия рецепторов, в то время как при АГЭ отмеченанизкая экспрессия рецепторов как к эстрогену, так и к прогестерону.5.2 Результаты иммуногистохимических методов исследованияпролиферативного и антионкогенного статуса эндометрия пациентокизучаемой когортыОдним из основных маркеров пролиферативной активности является Кi67,кодирующий одноименный белок.
Белок Кi67 участвует в митотическом делении иявляется маркером пролиферации клетки. Однако наряду с проонкогенами имеютсягены-антионкогены, продуцирующие белки, ингибирующие пролиферацию клетокитемсамымоказывающиепонижающеерегулирующеедействиенапролиферацию. Одним из антионкогенов является ген р53, кодирующий ядерныйбелок, модулирующий экспрессию генов, отвечающих за репарацию ДНК и194способствующийапоптозуклеток.Следствиянедостаточностир53—нестабильность хромосом и высокий риск малигнизации клеток. Указанныепредпосылки явились основанием для определения продуктов генов Кi67 и р53 вклетках эндометрия у пациенток, находящихся в репродуктивном возрасте и впериод менопаузального перехода и имеющих различные формы ГПЭ.В наших исследованиях при иммуногистохимической оценке маркерапролиферации Ki67 в репродуктивном возрасте была обнаружена слабаяэкспрессия гена в ядрах эпителия желез и в строме при ЖГЭ и ПЭ и высокаяэкспрессия белка в эпителии желез и в строме при АГЭ.Уровень стероидных рецепторов оценивали в корреляции с маркеромпролиферации Ki67.
В репродуктивном возрасте и особенно в периодменопаузального перехода выявлена отрицательная корреляционная связь междуER и PR и Ki67 в эпителии желез и строме эндометрия при железисто-кистозной(r=-0,68; p=0,02) и АГЭ (r= -0,71; p=0,02). При ПЭ как в репродуктивном возрасте,так и период менопаузального перехода взаимосвязи пролиферации и уровня ER иPR не найдено, что не исключает появления своего рода автономностипролиферативного процесса в эндометрии.Таким образом, результаты исследования экспрессии пролиферативногомаркера Кi67 свидетельствуют о высокой пролиферативной активности клетокэндометрия, находящихся в состоянии аденоматозной и железистой гиперплазии(р=0,012), в то время как при ПЭ этот показатель менее выражен.
Число интенсивноокрашенных ядер клеток эпителия желез при аденоматозной гиперплазии в 2,5 раза,а клеток стромы — в 2,7 раза выше, чем при ПЭ, при железистой гиперплазии — в2,1 и в 1,5 раза соответственно. Однако по экспрессии маркера пролиферации Ki67группы больных репродуктивного возраста и периода менопаузального переходадостоверно не различались. В период менопаузального перехода выявлена высокаяэкспрессия белка пролиферации Ki67 в железах эпителия при АГЭ.Иммуногистохимическая оценка гена р53 в репродуктивном возрасте и впериод менопаузального перехода (Рисунки 5.2–5.3) свидетельствует о достоверновысокой экспрессии гена у больных с ЖГЭ и ПЭ; слабой — при АГЭ. На основании195полученных данных можно предположить, что при ЖГЭ и ПЭ отмечена небольшаякомпенсаторная активация апоптоза, которая заметно угасает при АГЭ.p53 (в строме)Ki67 (в строме)p53 (в железах)Ki67 (в железах)6,85,8АГЭполипы7,816,611,53,9019,714,410,93,7ЖГЭ13,67,9510152025% маркированных ядерРисунок 5.2 — Экспрессия про- и антионкогенных белков в клетках эндометрияженщин репродуктивного возрастаp53 (в строме)Ki67 (в строме)4,2 5,8АГЭполипы6,30511,323,310,6 13,49,34,2ЖГЭp53 (в железах)Ki67 (в железах)12,315,71015% маркированных ядер19,72025Рисунок 5.3 — Экспрессия про- и антионкогенных белков в клетках эндометрияженщин периода менопаузального переходаВ ходе настоящего исследования показано, что гиперэкспрессия p53 (12,6%196маркерных ядер) и Ki-67 (11,8% маркерных ядер) в репродуктивном и особенно впериод менопаузального перехода (11,6% и 17,4% маркерных ядер соответственно)связана с высокой пролиферативной активностью эндометриальных клеток вусловиях низкого уровня апоптоза.Таким образом, полученные результаты иммуногистохимических методовисследования углубляют и существенно расширяют имеющиеся представления опатогенезе ГПЭ.
При ГПЭ снижение уровня ER в железистом компоненте врепродуктивном, а также ER и PR — в период менопаузального переходасопровождается дефектами распределения рецепторов: преобладанием уровня PRотносительно ER. При этом различия в отношении PR как в железах, так и в стромебыли одинаково достоверны.
Экспрессия рецепторов к стероидным гормонам взависимостиотнозологическойформызаболеванияприЖГЭиПЭхарактеризуется умеренной экспрессией рецепторов, в то время как при АГЭ —низкой экспрессией рецепторов как к эстрогену, так и к прогестерону. Выявленнаяположительная корреляционная связь между ER и PR рецепторами с p53 иотрицательная — с Ki67 в эпителии желез и строме эндометрия при железистой иАГЭ подтверждают возможности использования этих маркеров в качествепредиктороввысокогорискаразвитияонкологическойтрансформацииэндометрия, прогноза возможности рецидивирования и для обоснования лечебнойтактики у пациенток репродуктивного возраста и периода менопаузальногоперехода.197ГЛАВА VI.
НАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ АЛГОРИТМА РАННЕЙДИАГНОСТИКИ И ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКИХПРОЦЕССОВ ЭНДОМЕТРИЯ, ОЦЕНКА ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТИ6.1 Прогнозирование риска развития и прогрессирования течениягиперпластических процессов эндометрияв различные возрастные периоды жизниНедостаточная изученность патогенетических механизмов развития ГПЭчрезвычайно затрудняет возможность целенаправленного прогнозирования, а,следовательно, и профилактики этих заболеваний.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
