Диссертация (1154341), страница 30
Текст из файла (страница 30)
Активность GLU снижалась в следующем порядке: ЖГЭ > ПЭ > АГЭ.Фермент ACE был достоверно выше у женщин с АГЭ (p<0,05), чем в группахпациенток с ЖГЭ и ПЭ. Активность фермента АСЕ снижалась в следующемпорядке: АГЭПЭ>ЖГЭ.Как свидетельствуют данные, приведенные в Таблице 45, среди пациентокпостменопаузального возраста значимых отличий по ферменту b-D-глюкуронидазе(GLU) не выявлено, а по ферменту N-ацетил-b-D-глюкозаминидаза (АСЕ) лишь упациенток с ПЭ показатель активности был достоверно выше, в сравнении с ЖГЭи АГЭ.Активный выпуск лизосомальных гидролаз сопровождается снижением САфермента АСЕ, свидетельствующий не только о повреждении лизосомальных179мембран, но и о нарушении механизмов внутрилизосомной фиксации.
Какследствие, происходит снижение общей активности лизосомных ферментов (ОА:полип > железистая гиперплазия>аденоматозная гиперплазия), которое являетсязащитным механизмом предотвращения массивной энзимной деструкции клеток.Отсутствие значимых различий НСА и ДА в эндометрии свидетельствует обинтенсификации обменных процессов, требующих активного участия ферментовлизосом. Все показатели (НСА, ДА и ОА) по GLU были низкими.При изучении активности лизосомальных гидролаз в ткани эндометрия пригиперпластических процессах в период менопаузального перехода выявлены болеевысокие показатели лизосомальной активности по ферменту GLU (Таблица 4.8).Таблица 4.8 — Показатели лизосомной активности ткани эндометрия (Mm)ГруппаNПЭ70ЖГЭ58АГЭ48ПЭ42ЖГЭ93АГЭ38ПЭ45ЖГЭ32АГЭ22GLU-ОА GLU-ДА GLU-НСА ACE-ОА ACE-ДА ACE-НСАРепродуктивный возраст0,820,510,31 0,02 2,610,07* 0,810,02 0,850,030,02*0,020,870,510,36 0,02 2,240,03* 0,910,02 0,930,020,02*0,020,670,430,24 0,03 1,900,01* 0,730,01 0,770,070,03*0,01Период менопаузального перехода0,670,430,24 0,03 1,200,01 0,630,01 0,570,010,03*0,010,820,510,31 0,02 1,360,02 0,710,02 0,650,020,02*0,020,870,510,36 0,02 1,440,03 0,710,02 0,630,020,02*0,02Постменопаузальный возраст0,970,630,440,03* 1,230,01 0,630,01 0,570,010,03*0,01*0,810,500,32 0,02 1,350,02 0,720,02 0,660,020,02*0,020,860,500,34 0,03 1,480,03 0,740,01 0,430,02*0,03*0,01Примечание — * достоверность различий между группами в возрастном аспектеУ женщин с АГЭ выявлена тенденция к снижению НСА, ДА и ОА по GLU180по сравнению с ЖГЭ и ПЭ.
Все показатели по АСЕ у женщин с ГПЭ (p=0,029) былинизкими.Средипациентокпостменопаузальноговозрастализосомальнаяактивность АСЕ в ткани эндометрия имела следующие значения: НСА и ДА упациенток с АГЭ были достоверно ниже в сравнении с аналогичными показателямиу пациенток с ПЭ и ЖГЭ. При изучении показателей лизосомальной активностиGLU у женщин постменопаузального периода отмечена тенденция к снижениюпоказателей НСА, ДА и ОА при ЖГЭ.При сравнительном анализе АСЕ было отмечено, что лизосомы имеютхрупкую мембрану, отражением чего является значительное увеличение КПЛМпри ГПЭ в репродуктивном возрасте.
Коэффициент проницаемости лизосомальныхмембран АСЕ у женщин в период менопаузального перехода с АГЭ в 2 раза выше,чем при ЖГЭ и ПЭ. КПЛМ по GLU был достоверно выше (р=0,0012) у женщин сПЭ.В постменопаузе коэффициент проницаемости лизосомальных мембран поGLU у женщин с АГЭ был достоверно ниже 29,3%, чем при полипозе и ЖГЭ(37,25% и 38,9% соответственно).Таким образом, изменение активности лизосомального аппарата являетсяпатогенетическим звеном развития гиперпластических заболеваний в возрастномаспекте: при ГПЭ снижение содержание прогестерона в плазме приводит кнарушению целостности мембран лизосом и высвобождению кислых гидролаз.Особенно увеличивается активность GLU.
Это приводит к разрушениюжелезистого эпителия, предецидуальных клеток стромы и местных кровеносныхсосудов. Эндометрий при нарушениях механизмов апоптоза развивается,гиперплазируется (Таблица 4.9).С целью изучения возможной роли лизосомальных гидролаз в генезе ГПЭнами проведено исследование активности лизосомальных ферментов ACE и GLUв эндометрии.Активность АСЕ в плазме крови женщин с ГПЭ значимо отличалась исоставляла в репродуктивном возрасте 0,012±0,006, в период менопаузальногоперехода — 0,0400,005, в постменопаузальном – 0,0690,002 нмоль/мг (p=0,03).181Таблица 4.9 — Расчетные показатели лизосомной активности ткани эндометрия(Mm)Группа NПЭЖГЭАГЭ705848ПЭЖГЭАГЭ429338ПЭЖГЭАГЭ453222GLU –GLU –ACEКЛЛМ КПЛМ ЛатентностьРепродуктивный возраст37,81%62,19% 31,25%*47,79%41,37%*58,62%* 49,31%*50,69%35,28%64,17% 37,32%*47,52%Период менопаузального перехода47,76%52,56% 31,91%47,76%37,8%62,19% 31,25%47,79%41,37%*58,62%* 49,3%*50,62%Постменопаузальный возраст34,38%63,07% 37,25%47,5%36,71%62,12% 37,34%47,7%43,31%*57,67%* 29,32%*50,7%GLUЛатентностьACEКЛЛМACEКПЛМ52,20% 32,83%49,30% 27,98%52,54% 52,41%*52,56% 31,91%52,25% 34,58%49,33% 38,42%*52,5%33,4%53,26% 31,9%49,35% 29,28%*Примечание — * достоверность различий между группами в возрастном аспектеКак видно из представленных данных (Рисунок 4.6), активность АСЕ быланаибольшей у женщин с ГПЭ в постменопаузе.
Низкие значения этого показателябыли у пациенток с ГПЭ в репродуктивном возрасте и в период менопаузальногоперехода. Коэффицент проницаемости лизосомальных мембран АСЕ у женщин сГПЭ в репродуктивном возрасте составил 37,7% с тенденцией к снижению в пре(34,97%) и постменопаузальном возрасте (31,6%). В плазме крови фермент GLUбыл самым высоким у пациенток с ГПЭ в период менопаузального перехода(0,074±0,0056); самые низкие значения этого показателя были у пациенток с ГПЭ врепродуктивном и постменопаузальном возрасте (0,0040±0,006 и 0,025±0,001соответственно).Активность АСЕ в эндометрии женщин с ГПЭ значимо отличалась исоставляла в репродуктивном возрасте 2,25±0,04, в период менопаузальногоперехода — 1,330,005, в постменопаузальном возрасте — 1,350,002 нмоль/мг(p=0,022).
Как видно из представленных данных (Рисунок 4.7), активность АСЕбыла наибольшей у женщин с ГПЭ в репродуктивном возрасте. Низкие значенияэтого показателя были у пациенток с ГПЭ в пре- и постменопаузальном возрасте.Учитывая повышенную проницаемость лизосомальных мембран (по ферменту182АСЕ) в эндометрии у женщин с ГПЭ, можно предположить, что эти изменения врепродуктивном возрасте создают предпосылки для инвазивного роста эпителия истромы базального слоя эндометрия в подлежащий миометрий, а высокий уровеньлизосомальных ферментов GLU при ГПЭ в пре- и постменопаузальном возрастеусиливает интенсивность пролиферативных процессов.0,0740,080,0690,070,060,050,040,04репродуктивный0,04пременопаузальный0,0250,03постменопаузальный0,0120,020,010GLUACEРисунок 4.6 — Показатели активности лизосомальных ферментовсыворотки крови0,550,62ACE-HCA0,850,690,680,82ACE-ДA1,351,33ACE-OA2,250,370,30,3GLU-HCA0,540,480,48GLU-ДA0,880,790,79GLU-OA00,5постменопаузальный11,5пременопаузальный22,5репродуктивныйРисунок 4.7 — Показатели лизосомной активности эндометрия183Нами была выявлена корреляционная зависимость между аллельнойпринадлежностью по гену GP-IIIа и результатами Эли-П-теста в прогнозированииГПЭ.
В Таблице 4.9 представлены сочетания данных ЭЛИ-П-теста и гомо- игетерозиготности по аллелям PL-AI и PL-AII и его влияния на возможностьвозникновения гиперпластических процессов в эндометрии.Таблица 4.9 — Эффективность определения аллельной принадлежности по генуGP-IIIа и Эли-П-теста в прогнозировании гиперпластических процессов маткиГруппаНормоГипореактивностьреактивностьАIАI 10580(76,8%)ПЭ157АIАII 5226(50%)АIАI 123102(83,3%)ЖГЭ183АIАII 6030(50%)АIАI 766(7,58%)38(50%)АГЭ108АIАII 32Примечание — * достоверность различий между группамиNГеныnГиперреактивность25(23,2%)26(50%)21(16,7%)30(50%)32(42,4%)-Учитывая тот факт, что интегрины участвуют в регуляции процессовапоптоза, мы предположили возможность существования зависимости междулизосомами и геном GP-IIIа.
У больных с ГПЭ лизосомальные показатели (АСЕ) саллельной принадлежностью PLAIAI в сравнении с носителями аллеля PLAIAIIдостоверно не различались. Лизосомальные показатели GLU были больше уженщин с аллелем PLAIAI, чем у женщин с аллелем PLAIAII (Таблица 4.10).Таким образом, сочетание носительства аллеля PLAIAI гена GP-IIIa иувеличение активности лизосомального фермента GLU может быть факторомриска по развитию ГПЭ. Сочетание носительства аллеля PLAIAII и увеличениеактивности лизосомальных ферментов снижают вероятность развития ГПЭ.Определение лизосомальной активности в сочетании с выявлением аллельнойпринадлежности по гену GP-IIIa выступает прогностическим маркером развитияГПЭ и может быть использовано в качестве доклинической диагностики ГПЭ.Таблица 4.10 — Корреляционная зависимость между аллельной принадлежностью по гену GP-IIIа и лизосомальнойактивностьюГруппыЛизосомныеПоказателиПолип эндометрияЖелезистая гиперплазияэндометрияАденоматозная гиперплазияэндометрияN-ацетил-β-D-глюкозаминидазы (АСЕ)ОАДАНСАСвАβ-D-глюкуронидазы (GLU)ОАДАНСАСвААIАI 1,23±0,16* 0,51±0,09* 0,30±0,05* 0,47±0,02 0,77±0,06 0,37±0,03 0,14±0,04 0,37±0,08АIАII 1,19±0,12 0,43±0,02 0,25±0,03 0,45±0,01 0,69±0,05 0,02±0,02 0,01±0,02 0,29±0,01АIАI 1,19±0,65* 0,58±0,03* 0,34±0,02* 0,35±0,01 0,72±0,06 0,36±0,08 0,13±0,04 0,36±0,09АIАII 1,11±0,12 0,49±0,01 0,29±0,01 0,28±0,02 0,62±0,02 0,01±0,01 0,02±0,01 0,31±0,01АIАI 1,61±0,13* 0,73±0,01* 0,69±0,07* 0,44±0,08 0,53±0,08 0,25±0,05 0,11±0,05 0,21±0,05АIАII 0,21±0,12 0,01±0,01 0,02±0,05 0,03±0,01 0,04±0,07 0,11±0,03 0,02±0,01 0,03±0,02Примечание — * достоверность различий между группами в возрастном аспектеПринимая во внимание мультифакторность ГПЭ и учитывая возможную рольгенетических факторов в их развитии, нами были изучены иммунореактивностьорганизма женщин, особенности аллельного полиморфизма генов детоксикации(CYP1A1, GSTP1) и гена межклеточных взаимодействий – GP-IIIа и лизосомальнаяактивность ферментов ACE и GLU в сыворотке крови и эндометрии.При анализе генетической составляющей в патогенезе ГПЭ выявленоизменение полиморфизма гена детоксикации GSTP1: увеличение мутантногоаллеля GSTP1 D в 10 раз, дефект которого приводит к снижению защитныхсвойств клетки.