Диссертация (1154338), страница 24
Текст из файла (страница 24)
Сравнительная морфологическая характеристикапатологических рубцов у крыс после экспериментальнойтерапии верапамилом в составе антирубцового крема иводно-вазелин-ланолиновой основой крема7.3.1. Структура кожи спины контрольных крысПриморфологическомисследованиикожиспиныбелыхкрысконтрольных групп: интактных (контроль 1) и с нанесением верапамил-154содержащего крема на неповрежденную кожу (контроль 2) различий не выявлено.У контрольных животных обнаружено большое количество толстых волос,эпидермис имел неравномерную толщину, был представлен базальным слоеммелких эпителиоцитов, которые в некоторых участках накладывались друг надруга, несколькими рядами шиповатых эпителиоцитов, зернистыми клетками ирасположенными над ними роговыми эпителиоцитами, содержащих большоеколичествокератина(рис.27А).Кромеэпителиальных,вэпидермисеприсутствовали внутриэпидермальные макрофаги, меланоциты, тактильныеэпителиоциты и небольшое количество лимфоцитов.
Сосочковый слой дермы какправило был сглажен, а сосочки в нем располагаются редко. Тонкие волокнасубэпидермальной соединительной ткани проникали в сетчатый слой дермы,окружая железы и волосяные фолликулы. Вокруг волос выявлялись связанные сволосяной сумкой сальные железы, потовые железы отсутствовали (рис. 27Б).Основную часть кожи занимала дерма, которая переходила в подкожнуюжировую клетчатку (рис.
27Б, В). Волосы располагались в коже на небольшомрасстоянии друг от друга. Волосяные луковицы находились в подкожной жировойклетчатке. Наружное эпителиальное влагалище было образовано несколькимислоями клеток. Выявлена тесная структурно-функциональная и пространственнаявзаимосвязь между волосами и сальными железами кожи. Протоки железоткрывались в воронку волоса (рис. 28).В эпидермисе наиболее крупные ядра и наибольший показатель ядерноцитоплазматического отношения (ЯЦО) были в клетках базального слоя (рис.
27;табл. 33), а в дерме (рис. 28, 29) – в волосяных фолликулах и корневыхвлагалищах, являющихся в совокупности основным источником незрелых клетокдля посттравматической регенерации эпидермиса.155АБВРисунок 27. Поперечный срез кожи спины из полноценно иссеченноголоскута контрольной белой крысы на различных уровнях послойной организации:А – эпидермис, Б – дерма, В – переход в жировую подкожную клетчатку –стрелка). Д – дерма, Э – эпидермис. Окраска гематоксилином и эозином. Об. х20.Шкала – 50 мкм.156Рисунок 28. Поперечный срез кожи спины из полноценно иссеченноголоскута контрольных крыс: В – волос, окруженный волосяной сумкой, Д – дерма,Э – эпидермис, Ф –волосяной фолликул (волосяная луковица) вместе сокружающим его корневым влагалищем, стрелки – сальные железы.
Окраскагематоксилином и эозином. Об. х40.157Рисунок 29. Фрагмент среза кожи спины из полноценно иссеченноголоскута контрольной белой крысы. Группа волосяных фолликулов – стрелки.Окраска гематоксилином и эозином. Об. х100. Шкала – 50 мкм.Таблица 33 – Морфометрические показатели клеток эпидермиса кожиспины контрольных белых крысПоказатель, Me (Ql-Qh)ПлощадьЯдерноКлеткиПлощадь ядрацитоплазмыцитоплазматическое(Sя), мкм(Sц), мкмотношение (ЯЦО), у.е.Клетки базального 19,08,502,5слоя (n=185)(15,5-21,8)(7,8-9,5)(2,2-2,8)Клетки шиповатого 16,89,41,8слоя (n=140)(14,4-17,8)*(8,2-9,7)*(1,4-2,3)*Клетки зернистого 12,813,60,95слоя (n=90)(11,4-12,6)***^ (12,5-14,9)**^^ (0,8-1,4)***^^Примечание: * – различия статистически значимы в сравнении с клеткамибазального слоя при p <0,05, ** – при p<0,01, ** – при p<0,001; ^ – различиястатистически значимы в сравнении с клетками шиповатого слоя при p<0,05, ^^ –при p<0,01.
Me (Ql-Qh) – медиана, нижний и верхний квартили (критерийКолмогорова-Смирнова для независимых выборок).158В норме основную часть кожи спины занимали коллагеновые волокнасоединительной ткани сетчатой части дермы (рис. 27, 28), которая переходила вподкожную жировую клетчатку. При окраске гематоксилином-эозином в дерме кромеколлагеновых волокон выявлялись кровеносные сосуды с эндотелиальнымиклетками, фибробласты, фиброциты, макрофаги, тканевые базофилы, лимфоциты,плазматические клетки и гранулоциты (рис.
30; табл. 34).Таблица 34. Содержание клеток соединительной тканив дерме кожиспины контрольных белых крысЛокализацияКлеткиЗона сосочкового слояСетчатый слой(50-150 мкм)(250-350 мкм)Фибробласты74,8 (61,1-81,5)4,3 (1,2-9,5)*Фиброциты15,1 (9,9-22,8)91,5 (79,0-95,8)*Макрофаги4,2 (1,3-11,8)2,5 (0,7-8,0)Тканевые базофилы2,5 (0,9-7,5)0 (0-3,6)Лимфоциты2,2 (0,8-7,5)0 (0-3,6)Гранулоциты0,9 (0,2-5,2)0 (0-3,6)Плазмациты0,8 (0,01-5,2)0 (0-3,6)Примечание: * – различия между сосочковой и сетчатой зонойстатистически значимы (сравнение 95% доверительных интервалов пропорции).Базофилы чаще выявлялись вокруг сосудов в гиподерме и сосочковом слоедермы. Цитоплазма этих клеток была заполнена крупными метахроматическимигранулами.
Численная плотность клеток дермы у интактных животныхварьировала в пределах 37,0-41,0% от всех клеток кожи.Межклеточное вещество сосочкового слоя дермы состояло из тонких,немногочисленных коллагеновых волокон. В сетчатом слое дермы располагалисьтолстые пучки коллагеновых волокон (рис. 30).159Глубже сетчатого слоя располагалась гиподерма с большим количествомадипоцитов и заключенные в соединительнотканный футляр поперечнополосатыемышцы.Рисунок 30. Преобладание фибробластов и фиброцитов в соединительнойткани сетчатого слоя кожи спины контрольной белой крысы. Окраскагематоксилином и эозином. Об. х100. Шкала – 50 мкм.Таким образом, в коже спины контрольных белых крысключевыеклеточныедиффероны–фибробластический, лимфогистиоцитарный,эпителиоцитарный,выявленыэндотелиальный,играющие значительную роль вструктурно-функционально состоянии кожи в норме и после повреждения. Всеэтидиффероныимеютпулнезрелыхклеток.Приэкспериментальноммоделировании раны и рубца все эти диффероны и придатки кожи (волосы,железы)удалялись на площади спины 4х5 см.
Поэтому заживление раны иформирование рубца происходило очень долго и только за счет клеток кожиокружающей неповрежденной зоны, граничащей с искусственно сформированнойраной.1607.4. Формирование рубцов после иссечения кожного лоскутаПосле иссечения на спине крысы (n = 76) полнослойного лоскута кожи иподшивания краев сформированного кожного дефекта к подлежащим мышцам (сцелью ограничения ранней фазы контракции) образовывалась рана размером 4х5см, которая заживала в течение 50-55 сут с образованием рубца. Условно можнобыло выделить несколько стадий заживления раны.1. Воспаление и эпителизация (7-10 сутки после травмы).
В течение этойстадии сначала активировались процессы воспаления, затем посттравматическоевоспаление кожи постепенно уменьшалось, формировались элементы струпа, краяраныпокрывалисьнепрочнойгрануляционнойтканью,активировалосьобразование и смешение в рану молодых эпителиоцитов, рубца как такового ещѐне отмечалось (рис. 31).Рисунок 31. Начальная стадия образования рубца на границе иссеченноголоскута: стрелка – детрит в ране, Д – дерма, Э – эпидермис.
В дерме видныклетки лейкоцитарного инфильтрата. Окраска гематоксилином и эозином. Об.х40. Шкала – 50 мкм.1612. Стадия образования молодого рубца (10-25 сутки после травмы) былосвязано с тем, что в грануляционной ткани начинают интенсивно формироватьсяволокна коллагена и эластина. Сохраняется повышенное кровоснабжение областитравмы (рис 32).
Все это происходит под струпом.Рисунок32.Стадияобразованиямолодогорубца,фрагментгрануляционной ткани и коллагеновые волокна: стрелка – кровеносные сосуды. Вдерме видны фибробласты. Окраска гематоксилином и эозином. Об. х40. Шкала –50 мкм.3. Стадия образования зрелого рубца (50-55 сутки после травмы).Увеличивалось количество волокон коллагена и эластина, которые начиналивыстраиваться в направленные пучки (рис.
33). При этом количество сосудовуменьшалось, рубец уплотнялся и становился бледным. Площадь рубцасоставляла 25-30% площади удаленного лоскута. При этом отмечалосьдлительное нарушение процесса эпителизации раны с неполным восстановлениемархитектоники эпидермиса и явлениями кариопикноза. В толще рубца отмечалосьналичие толстых, грубых пучков коллагеновых волокон с явлениями мукоидногонабухания.Отмечалосьотсутствиеэластическихволоконивновь162сформированных придатков кожи. При этом выявлялось многообразие клетокфибробластического дифферона различной степени зрелости, что обеспечивалодлительное поддержаниепопуляции клеток в активном состоянии ипрепятствовало процессам окончательного ремоделирования рубцовой ткани и еегипертрофии.Рисунок 33.