Диссертация (1154338), страница 22
Текст из файла (страница 22)
23). При этом содержание IL-1 неотличалось от уровня контроля (серия I, 3-я группа). Нормализация активностиперитонеальных макрофагов, моделирующих, в том числе и через системуцитокинов, коллагенсинтезирующую функцию фибробластов, под действиемверапамилавнесласвойвкладвпредотвращениеспайкообразования при асептическом воспалении брюшины.перитонеального140РезюмеПопытка подтверждения выявленных in vitro новых свойств у известногоБМКК верапамила по регуляции образования соединительнойасептическом воспалении брюшины, позволила доказать иткани приin vivo (вэкспериментах на крысах, кроликах) наличие у данного лекарственного средствавыраженного фармакологического эффекта по предупреждению избыточногоспайкообразования путем модуляции функционального состояния фибробластови макрофагов,через воздействие на кальциевый обмен.
В ходе экспериментабыла определена максимальная переносимая доза для внутрибрюшинноговведения верапамила, не вызывавшая значимых и достоверных измененийкардио- и гемодинамики и составившая 0,1 мг/ кг массы тела. Была выявленавозможность коррекции верапамилом в данной дозе при внутрибрюшинномспособевведениягемоперитонеуме.нормализующееизбыточнойпродукциисоединительнойтканиприВ процессе моделирования спайкообразования доказанодействиеверапамиланафункциональнуюактивностьфибробластов, темпы синтеза ими оксипролина и гиалуроновой кислоты, а такжецитокинсинтезирующуюфункциюмакрофагов.Комплексныйподходвисследовании наличия у БМКК верапамила нового фармакологического эффекта-торможения избыточного разрастания соединительной ткани, с выявлениемвозможностивоздействия данного препаратана патогенетические факторыформирования спаек, полученные в эксперименте (in vitro и in vivo на разныхвидах животных) и рубцов, подтвержденных в экспериментеin vitro,доказательства эффективности верапамила в патогенетической профилактике итерапииспайко- и рубцовообразования, являются основой для определениявозможности его применения в клинике.141ГЛАВА 6ФАРМАКОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯПО РАЗРАБОТКЕ ОПТИМАЛЬНОГО СОСТАВААНТИРУБЦОВОГО КРЕМА С ВЕРАПАМИЛОМИзвестен способ консервативного лечения пострадавших вследствиеожоговой травмы по поводу образования келоидных и гипертрофических рубцовпутем непосредственной инъекции раствора верапамила [540, 507, 554].Существеннымнеравномерностьегонедостаткамивоздействияявляютсялекарственногоболезненностьсредстванапроцедуры,рубцовуюиперифокальные ткани, опасность развития резорбтивных эффектов препарата,нарушения микроциркуляции и трофики тканей вследствие тугой инфильтрациивводимым раствором.
Эти обстоятельства послужили основанием для разработкитрансдермальной лекарственной формы, содержащей верапамил – антирубцовогокрема (патент 2290919 РФ). Исследования проводились в соответствии страдиционнойсхемойразработкинаружныхлекарственныхформ,предусматривающей: обоснование содержания действующих веществ; выбороптимальных вспомогательных компонентов (основы, консервантов), и назаключительномэтапе-предложенного состава крема.исследованиефармакологическойактивности1426.1. Обоснование выбора действующего веществаантирубцового крема – верапамилаВыборантирубцовоговсестороннеговерапамилакремавкачествебазируетсядоклиническогоосновногонадействующегорезультатахисследованиявеществапроведенногоБМККнамипроизводныхфенилалкиламина (верапамил), бензотиазепина (дилтиазем), дигидропиридина(нифедипин) с неоднократным повторением испытаний in vitro и in vivo иэкспериментальных доказательствах наличия у БМКК верапамила наибольшейфармакологическойэффективностипопредотвращениюизбыточногоформирования заместительной соединительной ткани.
Доказанная оптимизацияфункций фибробластов и образования соединительной ткани под действиемверапамила, а также универсальность его действия на молекулярные механизмыактивации перитонеальных фибробластов крысы и дермальных фибробластовчеловекаявилисьпатогенетическимобоснованиемцелесообразностииспользования верапамила как средства профилактики и лечения послеожоговыхгипертрофических и келоидных рубцов. Полученный экспериментальныйматериал послужил основанием для создания новой лекарственной формы дляместного применения – антирубцового крема с верапамилом.6.2. Выбор оптимальной основы для антирубцового кремаИзвестно, что качество основы мази или крема при лечении кожныхзаболеваний играет решающую роль в биодоступности лекарства. Процесстранспорта лекарственного вещества в патологически измененную кожу приместном применении зависит от многих факторов, в том числе от физикохимических свойств лекарственной формы (степени дисперсности, рН, наличияповерхностно-активных веществ), а также от условий ускорения такоготранспорта.
Скорость высвобождения лекарственного вещества и, следовательно,143фармакологический эффект крема зависит от удачного сочетания лекарственныхвеществ и мазевой основы. Основа,которая бы обеспечивала максимальныйтерапевтический эффект крема, должна отвечать следующим требованиям: иметьнеобходимыеструктурно-механическиесвойства:вязкость,пластичность,текучесть, тиксотропность и т.
д.; обладать абсорбирующими способностями;обладать химической стойкостью; быть индифферентной в фармакологическомотношении; не подвергаться обсеменению микроорганизмами.Были исследованы следующие составы основ:1. Вода-вазелин-эмульгатор Т2 в соотношении (30-60-10)2. Вода-ланолин-вазелин (30-60-10)3. Стеарин-вазелиновое масло-карбонат натрия-карбонат калия-вода (101,5-1-0,5-70)4. Воск-спермацет-ланолин-персиковое масло-вода (1-1-2-8-10)Установлено, что основа вода-ланолин-вазелин в соотношении 30:60:10обеспечивает оптимальную скорость и полноту высвобождения входящих в еесостав лекарственных веществ. Вазелин в количестве 11-19 мас.
% не изменяетскорость высвобождения верапамила из крема, менее 11 мас.% не обеспечиваетдолжной растекаемости, а более 19 мас.% увеличивает прочность связиверапамила с основой.Введение в рецептуру ланолина в количестве 40-60 мас. % обеспечиваетоптимальное высвобождение верапамила из крема, менее 40 мас.% - не позволяетобеспечить необходимую влагоемкость крема, а введение ланолина больше 60мас.% уменьшает отдачу верапамила в ткани. В тех же интервалах ланолинявляется структурообразователем, смягчителем, повышающим влагоемкостькомпонентов крема.В качестве консервирующего, противовоспалительного, антимикробного ипротивоотечного компонента, а также для повышения проникающей способностикрема в состав введен димексид в количестве 4-6 мас.%.
Содержание его ниже 4мас.%необеспечиваетнадлежащейконсистенциикрема,снижается144противовоспалительная, антимикробная активность димексида. Содержаниедимексида больше 6 мас.% повышает токсичность крема и ухудшает структурукрема.Предлагаемая основаантирубцового крема с верапамилом полностью"копирует" состав кожного жира по водно-жировому балансу и может служитьактивным проводником препарата через кожу в ткань рубца.6.3. Биофармацевтическое изучение процесса высвобождения верапамилаиз различных количественных композиций антирубцового кремаДля определения степени «отдачи» действующего вещества – верапамилаисследовали различные количественные комбинации данного лекарственногосредства ибылоланолина, вазелина, димексида.
Для экспериментальной проверкиподготовлено5смесей,содержащихразличныеколичественныекомпозиции антирубцового крема (табл. 29).Таблица 29. Количественные комбинациикомпонентов антирубцовогокрема в 5 экспериментальных смесях.Смесь (содержание вещества, мас. %)Компоненты12345Ланолин безводный3040506070Вазелин231915117Димексид76543353025201001001001000,25%раствора 40верапамилаВсего:100Проведен диализ каждой смеси через полупроницаемую мембрану сотбором диализата и определением в нем количества верапамила методом145обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии высокогодавления в изократическом режиме.
Количественное содержание определяли сиспользованием в качестве стандартного образца субстанции верапамилагидрохлорид (раствор верапамила 0,25% концентрации в ампулах по 2 млпроизводства ОАО ―Биосинтез‖, г. Пенза, Россия). В расчетах использовалипоказатель величины доминирующего пика с временем удерживания tr 4,44±0,2min.
Показатели диодноматричного детектора для вещества с tr 4,44 min: UVλmax1 228 nm, λmax2 278 nm, λmin 250 nm – соответствуют стандартному образцуверапамила гидрохлорида (рис.24).17234086mAU1250 254nm,4nm (1.00)30002041000mAU4.440.02002.55.0657324300400500600700nm101973843158425000984413825555002781000513064475022820007.510.0minРисунок 24.
ВЭЖХ хроматограмма раствора стандартного образцаверапамила гидрохлоридаВеличина площади доминирующих пиков ВЭЖХ хроматограмм приисследовании различных концентраций стандартного образца верапамила врастворе приведены в таблице 30.Таблица 30. Зависимость площади пика от концентрации стандартногообразца верапамила в раствореКонцентрация верапамила в Площадь пика – в УЕрастворе, %0,00256022460,0324843790,053299295146Продолжение таблицы 30Концентрация верапамила в Площадь пика – в УЕрастворе, %0,07551467930,161584360,12579562310,15101956280,2134896250,25172340880,3215698740,4293026840,534159775Для проведения вычислений строили калибровочный график зависимостивеличины площади пика от концентрации в диапазоне от 0,0025 до 0,5 %.Рисунок 25.
График зависимости показателя площади пика от концентрациираствора верапамила гидрохлорида на ВЭЖХ-хроматограммеГрафик зависимости описывается формулой: y = 70316067x-155480 (рис.25).Коэффициент корреляции r=0,996 свидетельствует о высокой линейной связимежду показателем площади пика и концентрацией верапамила гидрохлорида врастворе.147Согласно проведенным исследованиям образцов смесей с различнымиколичественными комбинициями компонентов антирубцового крема содержаниеверапамила в диализатах образцов колебалосьот 0,01% до 0,05% (табл.31).Наибольший процент высвобождения данного лекарственного средства из составаантирубцового крема регистрировался в образце № 3, а также в образцах № 2, №4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
