Диссертация (1154338), страница 21
Текст из файла (страница 21)
мм рт. ст.через 2 ччерез 4 чисходноеАДчерез 15 миндиастолическое,через 2 чмм рт. ст.через 4 чисходноеАД среднее, мм рт. через 15 минст.через 2 ччерез 4 чисходноечерез 15 минУО, млчерез 2 ччерез 4 чисходноечерез 15 минМОК, млчерез 2 ччерез 4 чисходноеОПСС, дин∙смчерез 15 мин5/103через 2 ччерез 4 чГруппа животных ( 9-в)0,1 мг/кг401,5±5,1393,3±4,4394,2±4,7399,7±4,5130,8±2,7129,0±2,3129,0±1,5129,1±2,1100,8±3,399,5±2,098,8±1,399,2±1,1110,8±2,9109,3±1,5108,8±1,3109,2±1,10,11±0,0050,11±0,0050,11±0,0020,11±0,00546,8±2,345,0±2,144,7±0,845,8±2,40,27±0,010,26±0,010,27±0,020,28±0,004Достоверностьразличийp>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05p>0,05130Опираясь на собственные исследования, мы заключили, что оптимальнойдля изучения влияния верапамила на процессы спайкообразования в брюшнойполости является доза 0,1 мг/кг массы тела животного не вызывавшая привнутрибрюшинном введении значимых и достоверных изменений кардио- игемодинамики.5.2.
Влияние верапамила на формирование спаекв брюшной полости крыс и кроликов при гемоперитонеумеЭкспериментальное исследование новых свойств блокатора медленныхкальциевых каналов -верапамила по регуляции образования соединительнойткани при асептическом воспалении брюшины проведено нами с помощьюцеленаправленного применения верапамила в целостном организме на моделигемоперитонеумадлякоррекциинарушений,вызванныхпатологическимпроцессом, в дозе, при которой кардио- и гемодинамические эффекты препаратане проявляются.Внутрибрюшинное введение верапамила в дозе 0,1 мг/кг массы телаживотного, одновременно с моделированием гемоперитонеума, принципиальноменяло морфологическую картину спаечного процесса в брюшной полости.
Уэкспериментальных животных: крыс (серии III, 10-я группа) и кроликов (серииIV, 2-я группа) гемоперитонеум при профилактическом введении верапамиларазрешался с минимальным количеством перитонеальных спаек.Количество спаек у крыс 10-й группы составило 2,4% от аналогичныхпоказателей у животных с гемоперитонеумом без профилактического введенияверапамила (рис.18 , табл.
25) во 2-й группе серии I, у кроликов – 2,7%соответственно (рис.19, табл. 25).131Рисунок 18. Распределение спаек в брюшной полости крыс опытной группы(раствор верапамила внутрибрюшинно в дозе 0,1 мг/кг массы) по виду илокализацииРисунок 19. Распределение спаек в брюшной полости кроликов опытной группы(раствор верапамила внутрибрюшинно в дозе 0,1 мг/кг массы) по виду илокализации132Среди единичных идентифицированных спаек преобладали висцеропариетальные, число которых в верхнем и нижнем отделе брюшной полости быломеньше, чем в группе сравнения, сращения с брюшной стенкой такжерегистрировались реже (табл.25).
Спайки с сальником, печенью, селезенкой,кишками, мочевым пузырем отсутствовали. Не было обнаружено тяжелых иплоскостных спаек. В небольшом количестве выявлялись пленчатые, паутинные исмешанные спайки, количество которых было меньше, чем в группе сравнения.Очевидно, что число перитонеальных спаек в условиях нашего экспериментаявилось своеобразной характеристикой реактивности брюшины и ее измененийпод действием верапамила.Таблица 25.
Характеристика спаек при профилактическом действии верапамила(M±m).ПоказательКоличествоРыхлыеПаутинныеСмешанныеВерхний отделНижний отделС брюшной стенкойС сальникомС печеньюС селезенкойС кишкойС мочевым пузыремПлоскостныеТяжелыеПленчатыеПаутинныеСмешанныеЖивотныеКрысы0,20±0,040,02±0,040,2±0,060,02±0,020,02±0,010,22±0,030,10±0,0100000000,04±0,010,16±0,020,04±0,03Кролики0,23±0,0200,22±0,03000,14±0,020,09±0,010,04±0,02000,09±0,0100000,22±0,010Достоверностьразличий>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05133Отсутствиеспаекубольшинстваживотныхвосновныхэкспериментальных группах крыс (серии III, 10-я группа) и кроликов (серии IV,2-я группа) характеризует снижение реактивности брюшины при воздействии нанее верапамила.На 7 сутки после моделирования гемоперитонеума и введения в брюшнуюполость верапамила как у крыс, так и у кроликов спайки были представленымолодой грануляционной соединительной тканью, в которой присутствовалифибробласты, фиброциты, единичные многоядерные клетки.
К 10 суткамформировалась созревающие спайки соединительной ткани с хаотичнымрасположением коллагеновых волокон с преобладанием фибробластов ифиброцитов; лимфоциты, плазмоциты обнаруживались в небольшом количестве.Сформированные к этому времени спайки были тоньше, нежнее и с меньшимколичеством клеточных элементов, по сравнению со спайками в группах безмедикаментозного воздействия (крысы – серия I, 2-я группа; кролики – серия IV,1-я группа).5.3. Воздействие верапамила на синтез фибробластамикомпонентов межклеточного матрикса при моделированииспаечного процесса в брюшной полостиПоказанный нами in vitro эффект нормализующего влияния верапамиланафункциифибробластовиклетокихмикроокруженияявляется патогенетическим обоснованием для проведения исследований новыхсвойств БМКК верапамила по регуляции образования соединительной ткани приасептическом воспалении брюшины in vivo на разных видах животных.Профилактическоеснижениевведениесодержанияверапамилабелковосвязанногокрысамопределилооксипролинавдостоверноеперитонеальнойжидкости к 10 суткам после моделирования аутогемоперитонеума (табл.
26).134Таблица 26. Содержание белковосвязанного оксипролина и гиалуроновойкислотывперитониальнойжидкостикрысикроликовсгемоперитонеумом (М±m)ПоказателиОксипролин(мкмоль/л)Гиалуроноваякислота(ммоль/л)КрысыКроликиБез введения Введениелекарственных верапамиласредств7,5±0,65,4±0,3*Безвведения Введениелекарственных верапамиласредств7,6±0,36,6±0,1*-1,0±0,04-0,8±0,02*Примечание: * – достоверность различий показателей в группах без введениялекарственных средств и с введением верапамила, р<0,05.Была установлена прямая и тесная корреляционная связь междуколичеством спаек и содержанием исследуемого биохимического субстрата вперитонеальной жидкости. Плотность этой корреляции прослеживалась как вгруппе животных без профилактического введения лекарственных средств (серияI, 2-я группа, r=0,92, p<0,05), так и при воздействии верапамила (серия III, 10-ягруппа, r=0,76, p<0,05) – рис.20.Несколько более низкий коэффициент корреляции между исследуемымибиохимическимипоказателями и числом перитонеальных спаек у животных,подвергшихся воздействию верапамила, может быть объяснен дискретностьюпоказателя, характеризующего интенсивность спайкообразования (число спаек, ане их масса, площадь), и потому – преобладанием его нулевых (незначимых)значений у большинства экспериментальных животных данной группы.135Рисунок 20.
Корреляция между числом брюшинных спаек и содержаниемоксипролина в перитонеальной жидкости кроликов опытной группы(раствор верапамила внутрибрюшинно в дозе 0,1 мг/кг массы)Профилактическое внутрибрюшинное введение верапамила кроликамтакже определяло достоверное снижение его содержания в перитонеальнойжидкости к 10 суткам после моделирования гемоперитонеума (табл.26). Былаустановлена прямая и тесная корреляционная связь между содержаниемисследуемогобиохимическогосубстратавперитонеальнойжидкостииколичеством спаек (рис.
20).Таблица 27. Корреляционная связь интенсивности процесса спайкообразования иметаболизма соединительной ткани у кроликов с гемоперитонеумом,получавших верапамил.Оксипролин,мкмоль/л0,75Гиалуроноваякислота, ммоль/л0,69Оксипролин, мкмоль/л 0,751,000,33Гиалуроновая кислота, 0,69ммоль/л0,331,00Количество спаекКоличествоспаек1,00136Плотность этой корреляции прослеживалась как в группе кроликов безмедикаментозного воздействия (количество спаек – оксипролин r=0,95, p<0,05),так и в группе животных с введением верапамила (количество спаек – оксипролинr=0,75, p<0,05).*100%**75%контроль50%верапамил25%0%ОП крысыОП кроликиГК кроликиРисунок 21.
Содержание белковосвязанного оксипролина (ОП) и гиалуроновойкислоты (ГК) в перитониальной жидкости крыс и кроликов сгемоперитонеумом, получавшихверапамил (процент отклонения отпоказателей в группах с гемоперитонеумом без введения лекарственныхсредств). * - р<0,05.Сопоставлениеуровнейгиалуроновойкислотывперитонеальнойжидкости кроликов с гемоперитонеумом без введения верапамила и в группеживотных, получившихданное лекарственное средствоодновременно смоделированием асептического воспаления брюшины, также выявило снижениеее уровня в результате действия верапамила (р<0,05, рис 21).
При этом плотность137корреляционной связи числа перитонеальных спаек с уровнем исследуемогобиохимического субстрата в перитонеальной жидкости оставалась высокой (рис.22)Рисунок 22. Корреляция между числом брюшинных спаек и содержаниемкислоты гиалуроновой в перитонеальной жидкости кроликов опытнойгруппы (раствор верапамила внутрибрюшинно в дозе 0,1 мг/кг массы)Таким образом, в условиях нашего опыта уровень белковосвязанногооксипролина и гиалуроновой кислоты в перитонеальной жидкости животныххарактеризовалснижениеанаболическойактивностифибробластовпригемоперитонеуме под действием верапамила.5.4. Коррекция цитокинсинтетической активности макрофаговкрыс при гемоперитонеуме с использованием верапамилаСопряжение воспаления, регенерации и фиброза реализуется благодарямакрофагально-фибробластическому взаимодействию, играющему ключевую138роль в регуляции роста соединительной ткани. In vitro, в культуре клеток намиопределена чрезмерная активность перитонеальных фибробластов и клеток ихмикроокружения: моноцитов и макрофагов у крыс с гемоперитонеумом,установлен фармакологический эффект регуляторного воздействия БМКК нафункциональную активность перитонеальных клеток, в том числе и макрофагов,наиболее выраженный у верапамила.
Эффективность действия верапамила порегуляции чрезмерной активности фибробластов при асептическом воспалениибрюшины было подтверждено нами in vivo на разных видах животных. Длявыявленияуниверсальностиобнаруженногофармакологическогоэффектаверапамила, в том числе и по его действию на клетки системы мононуклеарныхфагоцитов, проведена серия экспериментов in vivo в целостном организме. Каквидно из таблицы 28, внутрибрюшинное введение верапамила, одновременно смоделированием аутогемоперитонеума, предотвращало чрезмерную активациюклеток моноцитарно-макрофагального ряда, снижая избыточную продукциюпровоспалительных цитокинов: TNF- и IL- 1.Таблица 28.
Влияние верапамила на содержание провоспалительных цитокинов вперитониальной жидкости крыс с гемоперитонеумом (М±m)ПоказателиГруппы животных2-я (гемоперитонеум)10-я (верапамил)TNF-, пг/мл251,1 ± 7,3*104,1±42,2IL-1, пг/мл12,7 ± 0,8*3,3±1,2Примечание: * – достоверность различий показателей в группах без введениялекарственных средств и с введением верапамила, р<0,05.139100%90%80%70%*60%Контроль50%*40%Верапамил30%20%10%0%TNF-αIL-1Рисунок 23. Снижение уровня провоспалительных цитокинов в перитониальнойжидкости крыс с гемоперитонеумом под влиянием верапамила (процентотклонения от показателей в группах с гемоперитонеумом без введениялекарственных средств). * - P<0,05.Введение верапамила (серия III, 10-я группа) предотвращало повышениесодержания данных цитокинов в брюшной полости крыс, останавливая наработкуTNF- в среднем на уровне 104,1±42,2 пг/л (р<0,01), IL- 1 на уровне 3,3±1,2 пг/л(р<0,01), что было соответственно в 2 и 3 раза ниже, чем в экспериментальнойгруппе без лечения (серия I, 2-я группа, рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
