Диссертация (1154338), страница 16
Текст из файла (страница 16)
Благодаря проведенным расчетам идополнительному увеличению исследуемых в группах численность выборки вкаждомконкретномслучаепозволилообеспечитьприемлемыйуровеньстатистической мощности (>80%).Статистическую обработку данных проводили с использованием пакетов«Statistica 6,0 for Windows», биостатистика (StatSoft, Inc.США) и MS Excel в средеWindows. Анализ характера распределения полученных данных осуществлялипостроением гистограмм споследующей проверкой на нормальность покритерию Шапиро-Уилка. Средние выборочные значения количественныхпризнаков приведены в тексте в виде M±m, где M – среднее выборочное, m –стандартная ошибка среднего.
Данные, не подчинявшиеся закону нормальногораспределения представлены в виде медианы (Me) и интерквартального размаха(25 и 75-процентили) [73]. Для сравнения двух групп данных использовался t-тест(Стьюдента).КритерийМанна-Уитниприменяли,еслисравниваемыесовокупности не подчинялись закону нормального распределения (191). Присравнении качественных признаков применяли 2 .Для анализа взаимосвязи и взаимовлияния данных разных групп вычисляликоэффициент корреляции Пирсона [223].
Отсутствие корреляционной связимежду величинами наблюдалось при r = 0±0,25, прямая корреляционная связь при положительных значениях r, обратная связь - при отрицательных значениях r.Сила корреляционной связи оценивалась следующим образом:- при r от 0,0 до -0,25 и до 0,25 – как отсутствие;- при r от 0,26 до 0,5 ( от -0,26 и до- 0,5) – как умеренную;90- при r от 0,51 до 0,75 ( от -0,51 и до- 0,75) – как среднюю;- при r от 0,76 до 1,0 ( от -0,76 и до-1,0) – как сильную;Вовсехпроцедурахстатистическогоанализакритическийуровеньзначимости статистических гипотез принимали равным 0,05, так как при этомвероятность различия составляла более 95%. Значения p могли ранжироваться по3 уровням достигнутых статистически значимых различий: p<0,05; p<0,01;p<0,001.91ГЛАВА 3МОДЕЛИРОВАНИЕ СПАЕЧНОГО ПРОЦЕССА БРЮШНОЙ ПОЛОСТИИ КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ ЕГО ВЫРАЖЕННОСТИ3.1.
Степень выраженности спаечного процесса,макро- и микроскопическая характеристика спаекпри гемоперитонеуме у крыс и кроликовСпаечныйпроцессвбрюшнойполостикрыси/иликроликовмоделировался однотипно путем однократного инъекционного внутрибрю-Рисунок 2.Распределение спаек в брюшной полости кроликов контрольнойгруппы (без верапамила) по виду и локализации92шинного введения экспериментальному животному аутокрови через прокол вкаудальной трети белой линии живота после ее забора в количестве 1% массытела из дорсальной хвостовой вены крысы, или из краевой вены уха кролика(патент 2260854 РФ).
Наличие спаечного процесса у всех животных былоподтверждено макро- и микроскопически на 7-10 сутки с моментавведенияаутокрови в брюшную полость (рис. 2). Моделирование гемоперитонеумаприводило к образованию в брюшной полости экспериментальных животныхмножественныхсоединительнотканныхспаек,количествокоторыхбылосопоставимо в экспериментальных группах крыс и кроликов (табл.4).Таблица 4.
Характеристика спаек в брюшной полости животных примоделировании гемоперитонеума (M±m).ПоказательКоличествоРыхлыеПаутинныеСмешанныеВерхний отделНижний отделС брюшной стенкойС сальникомС печеньюС селезенкойС кишкойС мочевым пузыремПлоскостныеТяжелыеПленчатыеПаутинныеСмешанныеЖивотныеКрысыКролики8,2±1,88,6±2,34,2±0,24,5±0,31,5±0,11,4±0,32,4±0,42,9±0,22,7±0,23,2±0,45,3±0,35,6±0,82,0±0,22,4±0,41,2±0,41,7±0,30,4±0,080,6±0,060,7±0,070,7±0,093,8±0,73,1±0,40,04±0,020,03±0,050,6±0,11,0±0,41,5±0,11,8±0,33,6±0,73,5±0,20,4±0,070,6±0,092,2±0,52,2±0,4Достоверностьразличий (р)>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,05>0,0593Поскольку характер распределения полученных данных в их совокупностиприближался к нормальному, то оценка степени достоверности производилась сиспользованием параметрических критериев (рис.
3, 4, 5, 6).Рисунок 3. Распределение количества соединительнотканных спаек у кроликов.Проверка на нормальность распределения с помощью критерия ШапироУилки, W=0,94468, p=0,24691- нормальное распределениеРисунок4.Проверкананормальностьсоединительнотканных спаек у кроликовраспределениячисла94Рисунок 5. Распределение количества соединительнотканных спаек у крыс.Проверка на нормальность распределения с помощью критерия ШапироУилки, W=0,93584, p=0,01127- нормальное распределениеРис.6 Проверка на нормальность распределения числа соединительнотканныхспаек у крыс- нормальное распределение95Спайки преимущественно локализовались в нижнем (каудальном) этажебрюшной полостивовлечениеми были представлены висцерально-париетальными (сбрюшнойстенки)ивисцеро-висцеральнымиспайками.Макроскопически спайки могли быть разделены на тяжевые, плоскостные,пленчатые, паутинные и смешанные (табл.4, рис.
2).Микроскопически спайки были представлены волокнистой соединительнойтканью, степень зрелости которой зависела от сроков наблюдения. Так от 7 к 10суткам фибринозные наложения и рыхлая соединительная ткань с хаотичнымрасположением коллагеновых волокон и отсутствием врастания капилляроворганизовывалисьдоплотнойволокнистойсоединительнойткани,представленной толстыми пучками упорядоченныхколлагеновых волокон снебольшимиврастаниемкапилляров.Отмечаласьдинамикаизмененияклеточного состава. На 7 – 8 сутки - большое количество лимфоцитов,гистиоцитов, фибробластов, единичные гигантские многоядерные клетки; наповерхности спаек имелось небольшое количество мезотелиоцитов.
К 9 суткамначинали преобладать фибробласты; лимфоциты, плазмоциты обнаруживались внебольшом количестве; встречались единичные фиброциты и гигантскиемногоядерные клетки; поверхность спаек частично покрыта мезотелиоцитами. На10 сутки формировалась зрелая рубцовая соединительная ткань с упорядоченнымрасположением коллагеновых волокон, где присутствовали гомогенные участки иволокнистые структуры. Клеточный состав был представлен фиброцитами,фибробластами,мононуклеарами,встречалисьединичныеплазматические,тучные клетки и многоядерные клетки типа гигантских клеток инородных тел; 2/3поверхности спаек было покрыто мезотелиоцитами.Таким образом, экспериментальное моделирование спаечного процесса вбрюшной полости животных путем введения аутокрови, вызывало к 10 суткампоствоспалительного периода формирование спаек. Уровень спайкообразования,локализация спаек, их микроскопические характеристики в экспериментах накрысах и на кроликах не разнились.963.2.
Функциональная активность перитонеальных фибробластов имакрофагов при развитии спаечного процесса в брюшной полости3.2.1. Биохимическая характеристика процесса перитонеальногоспайкообразованияИзучениереализующихсямежклеточныхвипроцессеклеточно-матриксныхспайкообразования,механизмов,макрофагально-фибробластического взаимодействия, играющего ключевую роль в регуляциироста соединительной ткани,основныхклетоквыявило наличиесоединительнойткани–чрезмерной активностифибробластовиклетокихмикроокружения - макрофагов. Как показали наши исследования, выраженное ираспространенноегемоперитонеумеспайкообразованиесочеталосьсввысокойбрюшиннойактивностьюполостиприперитонеальныхфибробластов - основных клеток-продуцентов межклеточного матриксаТаблица 5.
Содержание белковосвязанного оксипролина и кислоты гиалуроновойв перитониальной жидкости кроликов с гемоперитонеумом (М±m)ПоказателиОксипролинГруппы животных1-я (гемоперитонеум)3-я (интактные )7,6±0,3*1,1±0,2(мкмоль/л)Кислота гиалуроновая 1,0±0,04*0,3±0,01(ммоль/л)Примечание:* – достоверность различий показателейживотных и животных с гемоперитонеумом, р<0,05.в группе интактных97соединительной ткани, которые синтезируют как основные волокнистыеструктуры, в том числе коллаген, специфической маркѐрной меткой которогоявляется оксипролин, так и основные компоненты аморфного вещества, в томчисле гликозаминогликаны.
Исследование коллагенсинтетической функциифибробластов, заключающееся в определении в перитонеальной жидкостибелковосвязанногооксипролина,продемонстрировалоотчетливыйростпоказателя к 10 суткам после моделирования гемоперитонеума. Его значениепревышало аналогичныепоказателиинтактных животныхв 7 раз, чтосвидетельствует об усилении выработки коллагена (табл. 5, рис. 7).*800%600%*400%КонтрольАктивированные клетки200%0%ОксипролинКислота гиалуроноваяРисунок 7.
Увеличение количества оксипролина и гиалуроновой кислоты вперитониальной жидкости кроликов с гемоперитонеумом (процент от уровняконтроля). * - p<0,05.Приопределениивзаимосвязиколлагенсинтетическойактивностиперитонеальных фибробластов при гемоперитонеуме с уровнем спаечногопроцесса в брюшной полости была установлена прямая и тесная корреляционнаясвязьмеждусодержаниемисследуемогобиохимическогосубстратаперитонеальной жидкости и количеством спаек (табл.6, r=0,95, p<0,05).в98Таблица 6.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
