Диссертация (1150109), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Такженедостатком ПИА является отсутствие универсальных схемных решений иснижение чувствительности автоматизируемых аналогов за счет дисперсии зоныпробы в гидравлических трассах [11].Возможности анализа фармацевтической продукции в условиях ПИАпроиллюстрированы на большом количестве аналитов и объектов анализа [12–21].10Как правило, пробы предварительно растворяют с последующим проточноинжекционным анализом приготовленных растворов.Авторами [22] была разработана ПИА методика определения кверцетина врастительном сырье с хемилюминесцентным детектированием.
Методика основанана взаимодействии кверцетина со смесью H2O2, люминола и перманганата калия.Для выполнения анализа образцы сушили на воздухе и экстрагировали аналит 80% раствором метанола. Кверцетин отделяли от других полифенолов с помощьюпрепаративной тонкослойной хроматографии, после чего выделенный кверцетинрастворяли в 0,01 М растворе Na2CO3 и проводили его ПИ-определение. Для этого100 мкл раствора перманганата калия инжектировали в поток пробы и направлялив первую смесительную спираль (Рисунок 1). Во вторую смесительную спиральподавали растворы пероксида водорода и люминола.
Затем оба потока смешивали,направляли в проточную ячейку и проводили измерениеинтенсивностивозникающей хемилюминесценции. Производительность анализа составила 80проб в час.Рисунок 1. Cхема ПИА определения кверцетина в растительном сырье [22].Важнейшим решением унификации гидравлических схем стал SIA [23]. Вэтом методе вместо «сети» трубок, характерных для ПИА, используется однажидкостная линия, по которой с помощью реверсивного насоса движется потокрастворов попеременно в двух противоположных направлениях, что позволяетсущественно сократить расход реагентов.В данном варианте проточного анализа порции раствора носителя, пробы ирастворов реагентов последовательно вводятся в удерживающую спираль.
После11переключения многоходового крана-переключателя и реверса насоса происходитобразование аналитической формы за счет проникновения зоны пробы в зонуреагента в процессе их передвижения через реакционную спираль к детектору. Приэтом создается концентрационный градиент, в котором зоны пробы и реагентачастично перекрываются, формируя область, внутри которой образуется продуктреакции.
Недостатком SIA по отношению к ПИА является более низкаяпроизводительность.В качестве примера использования метода SIA в фармацевтическом анализерассматривается методика определения АК в таблетках витамина С соспектрофотометрическимдетектированием[24].Методикаосновананаокислительно-восстановительной реакции между АК и перманганатом калия вкислойсреде,котораяприводиткуменьшениюоптическойплотностиперманганата калия при 525 нм. Для этого в удерживающую спираль отбиралираствор носителя (дистиллированная вода), пробу, растворы серной кислоты,перманганата калия и снова раствор серной кислоты и раствор носителя (Рисунок2).
Затем растворы прокачивались через реакционную спираль, где происходило ихперемешивание,кдетектору,иизмерялсяаналитическийПроизводительность методики составила 60 проб в час.Рисунок 2. Cхема SIA определения АК в таблетках витамина С [24]..сигнал.12Авторами[25]разработанаметодикаSIAспектрофотометрическогоопределения АК в ЛП с использованием в качестве фотометрического реагента 11–молибдовисмутофосфорной (11–МВФ) гетерополикислоты:PBiIIIMoVI11O406-H2AsAH2PBiIIIMo2VMo9VIO406-AsAВ удерживающую спираль при помощи шприцевого насоса последовательноотбирали 800 мкл раствора носителя (раствор серной кислоты рН=1,7), 60 мклраствора 11–МВФ и 140 мкл раствора пробы (Рисунок 3).
Затем растворыпрокачивали в реакционную спираль, где происходило их смешение и далее кдетектору и на сброс. Цистеин, гидрохинон и гидроксикислоты оказываютсущественное мешающее влияние на определение АК. Диапазон SIA определенияАК составил (1,06–88)·10-3 г/дм3. Производительность – 15 проб в час.Рисунок 3. Схема SIA определения АК в ЛП [25].В настоящее время в рамках метода SIA выделено отдельное направление –последовательнаяинжекционнаяхроматография(SIC)[26].МетодSICпредполагает сочетание возможностей жидкостной хроматографии и SIA. Вданном варианте проточного анализа потоки пробы и растворы элюентовпоследовательно направляются через хроматографическую колонку схемы SIC спомощью шприцевого насоса и крана-переключателя к детектору, где происходитизмерение аналитического сигнала (Рисунок 4).13Рисунок 4.
Принципиальная схема SIC [26].В качестве примера использования метода SIC в фармацевтическом анализерассматривается методика определения аброксола и доксициклина в ЛП [27]. ЛПрастворяли в 100 мл метанольного раствора фосфорной кислоты, после чегополученный раствор разбавляли в 25 раз при помощи смеси ацетонитрила и воды(20:80).ПолученныйрастворанализировалиметодомSIС,разделениеосуществлялось на монолитной пористой колонке Chromolith Flash RP-18e. Вкачестве раствора носителя и подвижной фазы была выбрана смесь ацетонитрила иводы (20:80). Определение проводили при помощи УФ-детектора при длине волны213 нм.
Производительность методики составила 7 проб в час.Анализ фармацевтической продукции в условиях CIA представлен вединственной работе по спектрофотометрическому определению содержания Fe(II) и Fe (III) в ЛП по реакции с 1,10-фенантролином [28]. Гидравлическая схемаCIA отличается от ПИА и SIA техническими решениями системы ввода проб впоток носителя. В этом методе используется специальная CIA-ячейка сцилиндрическими каналами для подачи потоков растворов пробы и реагентов,перпендикулярно расположенными по отношению к каналу с потоком раствораносителя (Рисунок 5).14Рисунок 5. Принципиальная схема CIA [28].Для проведения автоматизированного анализа в вертикальные каналы CIAячейки подавали растворы пробы и 1,10-фенантролина.
Затем с помощьюперистальтического насоса в горизонтальный канал CIA-ячейки подавали растворносителя – ацетатный буферный раствор (рН=5,2) для перенесения зон пробы ираствора 1,10-фенантролина в смесительную спираль, в которой происходилосмешение растворов и образование ферроина. После этого раствор окрашенногокомплекса прокачивали в проточный детектор, где происходило измерениеаналитического сигнала, который представлял собой концентрационный пик,высота которого пропорциональна содержанию Fe (II).
После этого проводилиопределение содержания общего железа: в вертикальные каналы подавали порциианализируемого раствора, гидроксиламина (восстановитель) и 1,10-фенантролина,после этого насос останавливали и в CIA ячейку с помощью перистальтическогонасоса подавали раствор носителя – ацетатный буферный раствор (рН=5,2) дляперенесения порции пробы и растворов реагентов в смесительную спираль, вкоторой происходило восстановление ионов Fe (III) и образование ферроина.После этого раствор аналитической формы прокачивали в проточный детектор, гдепроисходило измерение аналитического сигнала, высота которого зависит отсодержания ионов Fe (II, III).
По разности двух определений устанавливаютсодержание ионов Fe (III) в пробе. CIA обеспечил производительность – 60 проб вчас.Концепция CIA позволяет устранить необходимость применения кранов иснизить расход реагентов по сравнению с ПИА. Однако существует необходимость15создания индивидуальной топологии CIA-ячейки для решения каждой конкретнойаналитической задачи.Оригинальнымвариантомпроточныхметодов,используемымдляфармацевтического анализа, является последовательный инжекционный анализ свозобновляемыми колонками (с инжекцией частиц) (BIA). В методе BIA (Рисунок6) суспензия модифицированных частиц инжектируется в поток носителя, которымчастицы переносятся в удерживающую спираль, затем инжектируется проба,которая проникает сквозь частицы, в результате чего аналит реагирует сфункциональными группами микрочастиц.
После этого в систему направляетсяпорция раствора хромогенного реагента, в результате чего происходит образованиеаналитической формы непосредственно на поверхности модифицированныхчастиц. На заключительном этапе частицы направляются в проточный детектор,где происходит измерение аналитического сигнала.Рисунок 6. Принципиальная схема BIA.Анализ фармацевтических препаратов в условиях BIA представлен в работепо определению прометазина [29]. Определение основано на окислениипрометазина ионами Fe (III). Полученные ионы Fe (II) образуют окрашенныйкомплекс с реагентом феррозином (Fz). В целях повышения селективности ичувствительности анионный комплекс [Fe (II) Fz3]4-образуется на поверхностимодифицированных частиц Sephadex QAE A-25, размещенных в зоне удерживания.Разработанная методика обеспечила производительность – 12 проб в час.16В методе BIA реализуется эффективное взаимодействие молекул аналита среагентом на поверхности большого количества модифицированных частиц.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
