Диссертация (1150109), страница 4
Текст из файла (страница 4)
В целом, однако,электрохимическое детектирование в условиях проточного анализа встречаетсяреже, чем спектральное. Это связано с проблемой использования электродов вмассовых анализах вследствие того, что либо необходимо обновлять поверхностьэлектрода, что приводит к плохой воспроизводимости результатов в сравнении соспектральными методами, либо использовать для анализа электроды одноразовогоиспользования, такие как screen-printed электроды, что не всегда выгодно сэкономической точки зрения.ВозможностьусловияхПИАинверсионно-вольтамперометрическогобыларассмотренанапримередетектированияопределениявдвенадцатифлавоноидов (физетина, галангина, гесперетина, гесперидина, кемпферола,морина, мирицетина, нарингина, кверцетина, кверцитрина, рутина, рамнетина) вполивитаминах [57].
В качестве рабочих электродов использовались углероднопастовые электроды на основе смесей нуйол – графит и дифениловый эфир –графит (Рисунок 12).Анализируемые капсулы разрезали на две части. Масляные составные частикапсулы, включая оболочку, растворяли в 50 % растворе этанола путем нагреванияпри температуре 45 °С в УЗ-поле в течение 15 мин. Отфильтрованные 4 млаликвоты раствора в дальнейшем разбавляли этанолом и буферным раствором27(рН=5,0).
Раствор анализируемого образца инжектировали в поток носителя ПИАанализатора и направляли в проточную ячейку, где снимали вольтамперограмму.Производительность разработанной методики составила 30 проб в час.Рисунок 12. Схема ПИА определения флавоноидов в сочетании с инверсионнойвольтамперометрией [57].В последнее время появились работы, в которых показана возможностьсочетания проточного фармацевтического анализа с методами высокоэффективнойжидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [58], газовой хроматографии (ГХ) [59] икапиллярного электрофореза (КЭ) [60].
Чаще всего для анализа фармацевтическойпродукции используется ВЭЖХ. В сравнении с ГХ данный метод детектированияболее подходит для анализа ЛП, вследствие недостаточной термическойустойчивости или низкой летучести большинства определяемых соединений, чтоделает непригодным детектирование методом ГХ. В сравнении с ВЭЖХ КЭ имеетболее высокую эффективность, а также является менее длительным методоманализа.Главнымдостоинствомгибридныхметодовявляетсявысокаяселективность, что позволяет определять соединения со схожей структурой, в томчислеизомеры.Такжегибридныеметодыхарактеризуютсявысокойчувствительностью, использованием небольших объемов проб и реагентов.
Однаков сравнении со спектральными и электрохимическими методами гибридныеобладают рядом недостатков, такими как длительность анализа, использованиедорогостоящих приборов, сложность в эксплуатации и в автоматизацииоборудования. К тому же к недостаткам гибридных методов стоит отнестинеобходимость предварительного отделения некоторых вспомогательных веществ,28вчастностисуспендирующихагентов,быстровыводящихизстрояметодовбылахроматографические колонки.ВозможностьпроиллюстрированасочетаниявработеВЭЖХпоипроточныхопределению4хиноноввЛП[61].Пробоподготовка основана на УФ-облучении хинонов, при котором образуютсяпероксид водорода и 3,6-дигидроксифталевая кислота.
Предполагаемый механизмреакции основан на дальнейшем взаимодействии 3,6-дигидроксифталевой кислотыс продуктом реакции пероксида водорода и бис-(2,4,6-трихлорфенил) оксалата, 1,2диоксэтандионом с высокой энергией. 1,2-диоксэтандион передает свою энергию3,6-дигидроксифталевой кислоте, в результате чего наблюдается испускание светавозбужденным флуорофором при его возвращении в основное состояние. Времяразделения хинонов составило 25 минут. В качестве раствора носителяиспользовали смесь имидазолового буферного раствора (рН=7,5) и ацетонитрила(95:5).
Скорость потока – 0,56 мл/мин. Пределы обнаружения составили 6,0·10-9моль/дм3, 4,4·10-9 моль/дм3,нафтохинона,0,2·10-91,4-нафтохинона,моль/дм3 и9,10-антрахинона0,45·10-9имоль/дм3 для 1,2-9,10-фенантренхинонасоответственно.1.2. Фармакологические и биологические свойства флавоноидов,антрахинонов и аскорбиновой кислотыФлавоноидами называется группа природных веществ – производных бензоγ-пирона, в основе которых лежит скелет, состоящий из двух бензольных колец (Аи В), соединенных между собой трехуглеродной цепочкой (пропановый скелет),т.е.
состоящий из С6-С3-С6 углеродных единиц. Это гетероциклические соединенияс атомом кислорода в кольце [62]. Флавоноиды входят в состав многих препаратоврастительного происхождения, к которым в настоящее время проявляетсяпристальное внимание, как к наиболее безопасным лекарственным средствам [63–65].29OBACOФлавонФармакотерапевтические действия флавоноидов:– повышают прочность стенок капилляров (Р-витаминная активность) за счетантиоксидантного действия, что важно при лечении хронической венознойнедостаточности, гипертонии и других сердечно-сосудистых заболеваниях,связанных с увеличением проницаемости кровеносных капилляров;– усиливают действие аскорбиновой кислоты;– седативное действие;– противовоспалительное и противоязвенное действия;– кровоостанавливающее действие [66, 67].Антрахиноны – большая группа природных соединений, в основе которыхлежит ядро антрацена (окисленное по среднему кольцу В).891ABC27635410АнтраценФармакотерапевтическое действие антрахинонов в большой степени зависитот их химического строения:– слабительное действие антрахиноны проявляют только в толстомкишечнике,гдеонигидролизуютсяподдействиемкишечнойфлоры.Образовавшиеся агликоны раздражают стенки прямой кишки и усиливают ееперистальтику.
Послабляющее действие развивается медленно и длительно (втечение 8–10 часов). В качестве слабительных антрахиноны используются впожилом возрасте, когда замедляется подвижность кишечника;30– диуретическое и нефролитическое действие проявляется в разрыхлениикамней в почках (фосфаты, карбонаты и ураты кальция и магния) с последующимвыведением их из организма.
Применяют при почечнокаменной болезни дляуменьшения спазмов и облегчения отхождения мелких камней;– антибактериальное и противовоспалительное действие;– стимулирующее и регенерирующее действие;– желчегонное действие [68].Аскорбиновая кислота (АК) – g-лактон 2,3-дегидро-L-гулоновой кислоты.АК является водорастворимым витамином [69].Фармакологические и биологические свойства АК:–антиоксидантная функция (окислительно-восстановительные свойства),т.е. способность обратимо окисляться и восстанавливаться.
Это обуславливаетведущую роль АК в тканевом метаболизме, связанную с процессами транспортаэлектронов. АК нейтрализует супероксид-анион радикал до пероксида водорода;– АК активизирует ряд ферментов, участвующих в метаболизме фолиевойкислоты, синтезе стероидных гормонов и катехоламинов, ингибирует ферменты,содержащие медь;– АК, наряду с АТФ, необходима для осуществления транспорта железаплазмы и включения его в состав тканевого ферритина (переводит трёхвалентноежелезо в двухвалентное, тем самым способствует его всасыванию);– предупреждает образование липопротеинов, вызывающих закупоркуартерий, следовательно, АК необходима при сердечно-сосудистых патологиях;– общеукрепляющее и стимулирующее иммунную систему средство приразличных болезнях (простудных, онкологических и т. д.);Также АК регулирует свертываемость крови, нормализует проницаемостькапилляров, необходима для кроветворения, оказывает противовоспалительное ипротивоаллергическое действие [70].
Недостаток АК в организме проявляется впотере аппетита, анемии, быстрой утомляемости, неясных болях в различныхчастях тела, склонности к кровотечениям и инфекционным заболеваниямдыхательных путей.31Применение АК для медицинских целей дает исключительно большойэффект при лечении различных заболеваний; в частности, АК способствуетзаживлениюран,сращениюпереломов,атакжерекомендуетсяприартериосклерозе, остром инфекционном гепатите, стоматите и тромбозах [71].Существуют данные, показывающие профилактическую роль АК в отношениирака толстой кишки, пищевода, мочевого пузыря и эндометрия [72].Втаблице3приведенаинформацияосодержаниифлавоноидов,антрахинонов и АК в различном ЛРС [73].Таблица 3.
ЛРС, содержащее флавоноиды, антрахиноны и аскорбиновую кислоту.БАВЛекарственноерастительное сырьеЦветки бессмертника>6 (в пересчете напесчаногоизосалипурпозид)Цветки пижмы>2,5 (в пересчете на лютеолин)Листья вахты трехлистной>1 (в пересчете на рутин)Плоды боярышникаФлавоноидыТрава сушеницы топянойТрава зверобояТрава горца птичьегоАнтрахиноныАскорбиноваяСодержание БАВ, %>0,06 (в пересчете нагиперозид)>0,2 (в пересчете нагнафалозид А)>1,5 (в пересчете на рутин)>0,5 (в пересчете наавикулярин)Трава горца перечного>0,5 (в пересчете на кверцетин)Кора крушины>4,5 (в пересчете на истизин)Листья сенны>1,35 (в пересчете нахризофановую кислоту)Корни ревеня>2 (в пересчете на истизин)Корневища и корни марены>3 (в пересчете на ализарин)Плоды шиповника>0,232кислотаПлоды калины>0,03Плоды рябины>0,021.3.
Методы определения флавоноидов в лекарственных препаратах илекарственном растительном сырьеВсе методы определения флавоноидов можно разделить на две группы:методы, которые подразумевают определение общего содержания флавоноидов(спектрофотометрические и электрохимические методы) и методы, направленныена определение индивидуальных веществ (хроматографические методы).Классической схемой определения суммы флавоноидов в фармацевтическоманализе является методика, основанная на образовании окрашенных комплексовпри их взаимодействии с ионами алюминия (III) в спиртовой среде [73, 74, 75].Процесс извлечения флавоноидов из ЛРС проводят с использованием 50 %раствора этанола на кипящей водяной бане в течение 30 минут.
Эта методикашироко используется для анализа различного лекарственного сырья. Содержаниефлавоноидов в ЛРС пересчитывают на рутин.Предложенавысокоселективнаяспектрофотометрическаяметодикаопределения дигидрокверцетина в ЛРС [76], в основе которой лежит реакцияобразования цианидинхлорида из дигидрокверцетина при обработке реакционнойсмеси цинковой пылью в присутствии соляной кислоты:OHCl-OHHOOZn, HClHOконцентрацийПредложеннаяOHOHдлина волныдигидрокверцетинаметодикаOHOOHOH OОптимальнаяOHλмакс=550составляетиспользованадлянм. Диапазонопределяемых(2,46–16,38)·10-5определениядигидрокверцетина в образцах древесины лиственницы сибирской.моль/дм3.содержания33Авторами [77] в качестве фотометрического реагента для определенияфлавоноидовпредложентетрафторборат4-нитрофенилдиазония(4-НФД).Показано, что в щелочной среде 4-НФД вступает в реакцию азосочетания скверцетином, нарингенином, хризином, морином, рутином и нарингином собразованием окрашенных в желто-оранжевый цвет продуктов реакции:NON2OHOOHOHOHOHN NNO2Na2CO3NOHOOHBF4OHOOHOHOМаксимумы поглощения спектров азосоединений флавоноидов находятсяпри 425–435 нм в зависимости от природы флавоноида.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
