Диссертация (1150109), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Извлечение АК изЛРС проводили при 10 оС в течение 4 часов. Для хроматографического анализаиспользовали колонку С 18, элюент – смесь растворов NaH2PO4 (рН=2,25) иацетонитрила. Скорость потока подвижной фазы составляла 1,2 мл /мин. Объемвводимой пробы – 20 мкл. Предел обнаружения – 0,5·10-4 г/дм3.381.5. Методы определения антрахинонов в лекарственном растительном сырьеВсе методики определения антрахинонов направлены либо на определениеобщего содержания антрахинонов, либо на определение конкретных веществ.ВГосударственнойфармакопееXIиздания[73]принятспектрофотометрический метод, основанный на способности антрахиноновреагировать со щелочью.
По этой методике предварительно проводят кислотныйгидролизприпомощиледянойуксуснойихлороводороднойкислот,выделившийся агликон экстрагируют органическим растворителем (диэтиловымэфиром), а далее антрахиноны переэкстрагируют в водный щелочной раствор.Оптическую плотность окрашенных растворов определяют при длине волны 530нм в пересчете на истизин. Концентрацию антрахинонов определяют покалибровочному графику, построенному с помощью растворов хлорида кобальта[73]. В другом варианте данной методики общее содержание антрахинонов в корекрушины проводят в пересчете на франгулин А, спектр поглощения котороготакже совпадает со спектром поглощения лекарственного сырья [97].Разработана методика для определения общего содержания антрахинонов впересчете на реин [98].
Методика основана на извлечении антрахинонов в воднуюфазу в течение одного часа при 95–98 оС и измерении аналитического сигнала придлине волны 515 нм. Диапазон линейности составил (1,92–9,60)·10-3 г/дм3.Стандартное отклонение не превышает 5 %.Разработаныметодики[99,100]определенияобщегосодержанияантрахинонов, в пересчете на ализарин, основанные на способности антрахиноновпоглощать электромагнитное излучение в видимой области спектра. Измерениеаналитического сигнала проводили при длине волны 435 нм.
Особенностьюметодики [99] является получение экстрактов корней Morinda citrifolia при помощиМОИ в УЗ-поле. Экстракцию проводили при 80 оС в 1 % водный раствор Triton X100 в течение 2 часов. В [100] предложено проводить экстракцию антрахинонов изкорней Morinda citrifolia в водно-спиртовой раствор в течение 1 часа при 60 оС вУЗ-поле с последующим их спектрофотометрическим определением.39На сегодняшний день разработано большое количество ВЭЖХ методикопределенияантрахинонов.УсловияВЭЖХопределенияантрахиноновпредставлены в таблице 4.Таблица 4. Характеристики ВЭЖХ методик определения антрахинонов.АналитПробаНеподвижная фазаРеин, эмодин,хризофановаяКассияС 18кислотаРеин, алоэКорнихризофанол икассииС 18фисционэмодин, реин,хризофанол,фисционСмесь метанола иуксусной кислотыСмесь ацетонитрила,эмодин, эмодин,Алоэ-эмодин,Подвижная фазаметанола и водногораствора ацетатааммонияКореньревеня,C 18горца, ЛППределЛитеробнаруженияатура2,5–15 мг/дм3[101](0,23–4,61)·10-6[102]моль/дм3Смесь раствора(2,20–метанола и12,50)·10-6муравьиной кислотыг/дм3[103]ЭкстрактыАлоэ-эмодини настойкилистьевC 18Смесь воды иметанола3·10-6 г/дм3[104]–[105]алоэПсевдопурпурин,пурпурин,ализарин,Корнилюцедин,маренымунжестин,Смесь ацетонитрилаC 18и ацетатногобуферного растворанордамаканталПредложена методика определения антрахинонов при помощи капиллярногоэлектрофореза с УФ-детектированием.
В качестве фонового электролита былавыбрана смесь раствора 60 мМ 1-бутил-3-метилимидазолий тетрафторборат (1B3mi-TFB) и 4,0 мМ раствора циклодекстрина (рН=10). Анализ проводили приприложенном напряжении 20 кВ, с детектированием при длине волны 254 нм.Время анализа 5 минут. Пределы обнаружения от 0,56·10-3 до 3,75·10-3 г/дм3 для40различных определяемых веществ. Методика была использована для анализаэкстракта из растения Paedicalyx attopevensis [106].1.6.
ЗаключениеТаким образом, на сегодняшний день автоматизация фармацевтическогоанализа представлена в условиях ПИА, SIA, SIC, CIA, FBА и BIA в сочетании сразличными способами детектирования. Однако данные проточные методы имеютограничения. Общим ограничением неравновесных проточных методов, таких какПИА, SIA, SIC и BIA является дисперсия порции пробы в потоке носителя, котораявлияет на прецизионность и чувствительность анализа. Для обеспечениявоспроизводимости результатов необходимо строго контролировать скоростьпередвижения потоков по гидравлическим трассам системы, а также времянахождения пробы в проточной системе.
Недостаток метода FBА в том, чтоконструкционные особенности используемых в FBА смесительных камер,оснащенныхустройствомсоответствующеготипа,перемешиваниявызываютрастворовограниченияпоидетекторомварьированиюдлиныоптического пути, а также перемешиваемых в них объемов проб и растворовреагентов.Поэтому разработка новых подходов к автоматизации фармацевтическогоанализа на принципах проточных методов по-прежнему остается актуальнойзадачей аналитической химии.
В качестве одного из альтернативных решенийпроблемы автоматизации фармацевтического анализа интерес представляетциклический инжекционный анализ, обеспечивающий унификацию проточногоанализа и его максимальную чувствительность.41Глава 2. Аэрогидравлическая схема циклического инжекционногоанализа лекарственного растительного сырья с вскрытием проб в УЗ-поле, иее обоснованиеДля создания условий полной автоматизации процесса извлечения аналитовиз твердофазных проб ЛРС для их последующего определения, в отличие от ранеепредложенных схем ЦИА, в разработанной схеме (Рисунок 13) предполагаетсякоммутациянесколькихкранов-переключателейивключениевкачествевспомогательных устройств пробоподготовки (ВУП) специальных картриджей сполитетрафторэтиленовыми (ПТФЭ) фильтрами, которые помещены в УЗ-ванну срегулируемыми температурными режимами и коммутируются с каналами одногоиз кранов.
Число картриджей ограничено количеством каналов используемогокрана. В картриджах производится экстракционное извлечение аналитов из ЛРС ипоследующее отделение экстракта от «отработанного» сырья. Второй кранпредназначен для автоматизации процесса образования аналитической формы в РЕпри смешении в ней экстракта и растворов реагентов потоком газовой фазы.Рисунок 13.
Принципиальная схема циклического инжекционного анализалекарственного растительного сырья с вскрытием проб в УЗ-поле: 1, 2, 3 –картриджи с ПТФЭ фильтрами; 4 – УЗ-ванна; 5, 7 – многоходовые краныпереключатели; 6 – перестальтический реверсивный насос; 8 – реакционнаяемкость; 9 – проточная кювета, подключенная с помощью оптоволоконных кабелейк источнику света и спектрометру.42В картриджи воронкообразной формы (высота – 50 мм, внутренний диаметр– 5 мм) помещены пористые ПТФЭ фильтры соответствующих размеров,изготовленные из порошка ПТФЭ (Фторопласт-4) двухстадийным спеканием спромежуточным изготовлением ПТФЭ пластины и отборкой фракции частиц сразмером 0,45 – 0,9 мм.БылоизученовлияниеразмерафракцийпорошкаПТФЭнавоспроизводимость аналитического сигнала, получаемого при определениифлавоноидов в ЛРС.
Минимальное значение СКО (3 %) наблюдалось прииспользовании ПТФЭ фильтра, полученного из 0,45 – 0,9 мм ПТФЭ фракции. Прииспользовании 1 – 2 мм фракции не наблюдалась эффективная фильтрацияэкстракта; при использовании 0,1 – 0,4 мм фракции СКО возрастало до 5 %, чтосвязаносувеличениемгидродинамическогосопротивлениявпроцессефильтрации. Таким образом, 0,45 – 0,9 мм ПТФЭ фракция была выбрана в качествеоптимальной для проведения дальнейших экспериментов.Традиционными способами извлечения БАВ из ЛРС в соответствующийэкстрагент являются методы мацерации [107], перколяции [108], циркуляционногоэкстрагирования[109],противоточнойэкстракции,холодногоигорячегопрессования и другие.
Однако все они используются в препаративных процессах иимеют ряд недостатков, такие как длительное высокотемпературное воздействие,которое может приводить к потере БАВ, низкая производительность, а такженеполнота экстракции действующих веществ и трудоемкость. Для интенсификациипроцессов гомогенизации и извлечения БАВ из растительного материалаиспользуют различные подходы. К ним относят электроплазмолиз и электродиализ[110], а также методы экстракции БАВ при воздействии высоких частот (ВЧ),сверхвысоких частот (СВЧ), сжиженных газов и УЗ.Электроимпульсныйспособэкстрагированиявеществпроводитсяспомощью высоковольтного разряда, образующегося в результате аккумулированияэлектрической энергии и ее выделения в короткие промежутки времени.Электрические разряды позволяют ускорять течение внутриклеточной диффузии за43счет возникновения конвективной диффузии и частичного разрушения клеточныхоболочек [111].При электромагнитной обработке ЛРС происходит одновременный нагреввсей массы обрабатываемого материала как в макро-, так и микрообъемах.
Важнымпреимуществом данной обработки является то, что в отличие от традиционноготепломассообмена нет необходимости создавать большие градиенты температур идавления [112].Методы извлечения при помощи СВЧ- и ВЧ-воздействия нашли широкоеприменение в аналитической практике. Так авторы [113] проводили ВЭЖХопределение антрахинонов (алоэ-эмодина, эмодина, хризофанола, реина ифисциона) в семенах Кассии с использованием мицеллярно-опосредованногоизвлечения в СВЧ-печи.В литературе встречаются публикации, посвященные экстракции аналитовсжиженными газами [114].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
