Диссертация (1145887), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Но определенная доля 1000кратного увеличения экспрессии может быть обусловлена и увеличениемразмеров клеток по мере их дифференцировки.Также была обнаружена экспрессияклаудинов-3 и -8. Клаудин-3 былпредставлен в эпителии желез девственных и беременных самок, в то время какклаудин-8 выявлялся только в период лактации (Blackman B. et al., 2005).Факторы, оказывающие влияние на белки плотных контактов всекреторном эпителии молочной железы. Механизмы, благодаря которымувеличение проницаемости плотных контактов эпителия влияет на формированиемолока, его секрецию, не до конца поняты, но эндокринные факторы, такие какглюкокортикоиды, пролактин и низкий уровень или отсутствие прогестерона,являются важными составляющими для формирования и поддержания функцийплотных контактов в молочной железе (Zettl et al.
1992, Thompson 1996, Stelwagenet al. 1998, 1999, Nguyen et al. 2001).Применение пролактина и дексаметазона на линии клеток молочной железыНС11 вызывало увеличение трансэпителиального сопротивления, снижениетранспорта радиоактивного инулина. Одновременно увеличивалась экспрессияокклюдина, авторы делают вывод о влиянии этих гормонов на формированиеплотных контактов в молочной железе (Stelwagen et al., 1999).Увеличение кортизола в плазме крови коров путем инъекции АКТГприводило к предотвращению увеличения лактозы в плазме крови при35использовании метода накопления секрета в молочной железе. По мнениюавторов, результаты свидетельствуют о том, что глюкокортикоиды снижаютпроницаемость плотных контактов эпителия молочной железы (Stelwagen et al.,1998b).
Эти результаты были подтверждены на клеточном уровне. На клеточнойлинии НС11, а также на линии клеток Comma-1D было установлено влияниеглюкокортикоидов (дексаметазона) на плотные контакты молочной железы.Оценку проводили по изменению величины трансэпителиального сопротивления,транспорту радиоактивного инулина, а также определения методом Вестерн-блотбелка плотных контактов окклюдина. Дексаметазон увеличивал сопротивление,снижал межклеточный транспорт инулина и увеличивал содержание окклюдина,что свидетельствовало о его влиянии на плотные контакты (Stelwagen et al., 1999).Совпадениефизиологическогоэффектаглюкокортикоидовбылоподтверждено при исследовании влияния изоляции (социальный стресс) у коров.Физиологический стресс, определяемый по повышенному уровню кортизола вплазме крови, увеличивал содержание лактозы в крови, свидетельствуя о том, чтои эндогенные глюкокортикоиды снижают проницаемость эпителия (Stelwagen etal., 2000).Существуют и противоположные данные.
Стресс, который вызывалиснижением питания, также определяемый по повышению кортизола в плазмекрови, приводил к повышению уровня лактозы в плазме крови и повышениюнатрия в молоке. Авторы делают вывод об увеличении проницаемости эпителияальвеол в этих условиях (Stumpf et al., 2013). Следовательно, не достаточнотолько повышения уровня кортизола для изменения проницаемости эпителия.На клеточной линии НС11 и Comma-1D было изучено влияние пролактинанаплотныеконтактымолочнойжелезы.Этотгормонувеличивалтрансэпителиальное сопротивление, снижал межклеточный транспорт инулина,увеличивалэкспрессиюокклюдина,чтосвидетельствуетоснижениипроницаемости эпителия альвеол (Stelwagen et al., 1999).В составе молока обнаружен один из членов семейства паратгормона,регулирующих обмен кальция в организме, паратгормон–связанный протеин36(PTHrP).
PTHrP, по-видимому, является важным гормоном,участвующим вподдержании клеточного гомеостаза ионов кальция и транспорта кальция вразных эпителиях, в том числе и в эпителии молочной железы (Seitz et al. 1993,Philbrick et al. 1996, Friedman 2000, Lafond et al. 2001). Продукция и степень егосекреции в молоко достоверно снижалась при однократном доении одной изчетвертей вымени коров по сравнению с другими четвертями, которые доиличетыре раза (Thompson et al. 1994).
При одновременном действии дексаметазона ипролактина наблюдали увеличение реакции (Stelwagen et al., 1999).Влияниенеорганическихиорганическихкомпонентовмолоканапроницаемость эпителия. Инъекция хелатора ионов кальция ЭГТА в выводныепротокимолочнойжелезыприводиткснижениюудояиизменениюпроницаемости эпителия. Концентрация натрия увеличилась в молоке с 20 до 162, а хлора – с 51 до135 ммоль/л. Концентрация калия в молоке уменьшилась с 52 до23 ммоль/л. Концентрация лактозы в плазме крови увеличилась с 48 до 690мкмоль/л. В лимфатических протоках, отходящих от молочной железы, появилсякраситель голубой Эванс (Evans blue) после введения его в выводные протокижелезы (Stelwagen et al., 1995).
По истечении пяти суток, исследованныепараметры вернулись к норме, что свидетельствует о возможности адаптивныхизменений в структуре плотных контактов. Следовательно, для поддержанияфункций плотных контактов, обеспечивающих изоляцию секрета в полостиальвеол, необходимо наличие в полости альвеолы ионов кальция.Показано вовлечение противовоспалительных соединений в регуляциюпроницаемости эпителия.
У гипериммунизированных коров из молока выделялипротивовоспалительные вещества (более точного указания на их природу неприводится), которые тестировали на клетках линии НС11. Эти соединенияспособствовалиформированиюплотныхконтактовиувеличивалиихнепроницаемость, которую определяли по изменению трансэпителиальногосопротивления (Stelwagen et al., 1998с).Дальнейшее развитие данного направления показало, что все элементывоспалительной реакции могут быть вовлечены в регуляцию проницаемости37эпителия. Эндотоксин Escherichia coli, введенный в выводные протоки молочнойжелезы коров, вызывал увеличение концентрации лактозы в плазме крови,сигнализируя об увеличении проницаемости эпителия (Stelwagen et al., 2000).Механическое воздействие на секреторный эпителий и сохранениеструктурной целостности альвеол в ходе лактации. Помимо регуляциимежклеточной проницаемости секреторного эпителия альвеол при участиибиологически активных веществ, следует обратить внимание на физическиефакторы, оказывающие на него влияние.
В ходе накопления секрета и еговыведения при сокращении миоэпителиальных клеток железистый эпителийиспытываетзначительныеразнонаправленныемеханическиевоздействиярастяжения и сжатия. С одной стороны, при периодическом характеревскармливания потомства секрет накапливается в железе и его гидростатическоедавление оказывает механическое воздействие на окружающие структуры.Секреторныеклеткимолочнойжелезы,образующиестенкуальвеолы,испытывают на себе механическое воздействие при накоплении молока вполостях альвеол. В этом случае происходит апикально-базальное растяжениеальвеолы, то есть механическая сила действует на эпителий с апикальнойстороны.С другой стороны, у мышей в ходе кормления детенышей происходитразвитие рефлекса выведения молока с небольшим интервалом между ними ивыделение окситоцина в кровь (Марков, 2001).
Сокращение миоэпителиальныхклеток, вызванное окситоцином, вызывает периодическое сжатие альвеол,которое необходимо для развития давления в полости альвеолы и продвижениясекрета по протокам наружу (Марков, 2005). При этом воздействии секреторныеклетки подвергаются базально-апикальному сжатию, то есть механическая силасокращения миоэпителия действует с базальной стороны клеток. В том и другомслучае должна быть сохранена целостность структуры молочной железы, так какее нарушение приводит к развитию дисфункций молочной железы.
Несомненно,что межклеточные структуры, связывающие секреторные клетки, являютсямолекулярными компонентами, включенными в обеспечение этого процесса.38Динамика сократительных реакций миоэпителиальных клеток в молочнойжелезе мышей. Динамика сократительных реакция отражает динамику сжатияальвеол, то есть частоту механического воздействия на эпителий альвеол.Характер вскармливания потомства и осуществление рефлексов выведениямолока носит ритмический характер, обуславливая многократное воздействиеокситоцина на миоэпителиальные клетки.Миоэпителиальные клетки лежат под общей базальной мембранойальвеолы. Морфологические методы (Pinkstaff, 1980), окраска актиновых нитей спомощью флюоресцентного красителя NBD-фаллациадина (Moore et al., 1987), атакже исследования с применением моноклональных антител к α-актину гладкоймускулатуры (Hellmen, Isaksson, 1997) показали, что миоэпителиальные клеткиимеют отростки, которые расположены между секреторными клетками или вовдавленияхнаповерхностисекреторныхклеток.Этимиотросткамимиоэпителиальные клетки соединяются друг с другом и с базальной мембраной(Pinkstaff, 1980).
Миоэпителиальные клетки образуют своеобразную сеть, внутрикоторой находятся секреторные клетки и это способствует сжатию секреторныхклеток и обеспечению выведения секрета из полости альвеолы в системупротоков.Проведено длительное исследование процесса вскармливания детенышей, врезультате чего показано, что процесс вскармливания потомства занимает у самкибольшую часть суток.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
