Диссертация (1145887), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Плотные контактыявляются кластером функционально связанных белков.92.Межклеточная диффузия ионов через порообразующие клаудиныплотных контактов включена в формирование состава секрета в полости альвеолмолочной железы мыши.3.Накопление секрета в полости альвеолы приводит к увеличениюмеханического давления на апикальную поверхность клеток и вызываетизменение уровня клаудинов в плотных контактах секреторного эпителия альвеолмолочной железы мыши. При механическом воздействии на эпителий плотныеконтакты обеспечивают сохранение его структурной целостности.Личный вклад автора.
Данные, изложенные в диссертационной работе,получены лично автором. Автор участвовал в разработке концепции иобсуждениирабочегоплананаучногоисследования,проведенииэкспериментальной работы, обсуждении результатов и написании выводов.Соавторы указаны в соответствующих статьях и тезисах.Апробация результатов исследования. Материалы диссертации былидоложены и обсуждены на XXII и XXIII Cъездах Физиологического общества им.И.П.
Павлова (Волгоград 2013, Воронеж 2017) и конференциях: Internationalconference «Barriers and channels formed by tight junction proteins. From mechanismsto diseases and back» (Berlin, 2011); 91st Annual Meeting of The GermanPhysiological Society (Dresden, 2012); По теме диссертации опубликованы 2 статьив журналах, входящих в список ВАК, и 4 тезисов докладов.Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзоралитературы, глав о методических приемах, экспериментальных исследованиях иих обсуждений, заключения, выводов, списка цитируемой литературы. Работаизложена на …..
страницах печатного текста, содержит 4 таблицы ииллюстрирована 15 рисунками. В списке цитируемой литературы приведено 202источника.10ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫТканевые барьеры. Основной структурой, которая вносит вклад в созданиетканевых барьеров, являются эпителиальные клетки, соединенные между собоймежклеточными контактами (Cereijido et al., 1981).
Барьерные свойства ипроницаемость этих слоев, в первую очередь, обеспечивается клеточнымимембранами, в которые интегрированы транспортные АТФазы, каналы ипереносчики. Однако для образования электрохимических и осмотическихградиентов должно существовать препятствие неконтролируемой обратнойутечке ионов и молекул (Марков, 2013). Степень проницаемости эпителиальногопласта для парацеллюлярного транспорта определяется плотными контактами –апикальныммежклеточнымкомплексоммеждусоседнимиклетками.Использование электронноплотных маркеров показало, что эти вещества,нанесенные на апикальную или базо-латеральную часть клеток не проникают стой и другой стороны дальше плотных контактов между клетками (Farquhar,Palade, 1963; Pinto da Silva, Kachar 1982).При обсуждении функций плотных контактов широкое распространениеполучилопредложилпредположение,выделятьсформулированное«заградительную»,Diamond«воротную»(1977),которыйфункцииплотныхконтактов.
Разработка этого представления привела к представлению оследующих функциях этих межклеточных структур:1.Формированиеэпителиальноготранспортногофенотипа(«заградительная» функция, («fence»)), которое основано на способности плотныхконтактовпрекращатьФормированиелатеральнуювнутримембранногодиффузиютрансмембранныхдиффузионногобарьеранебелков.допускаетперемещения интегральных белков (насосов, транспортеров и т.д.) междуапикальной и базолатеральной областями плазматической мембраны клетки.Благодаря этому, возникает функциональная полярность эпителиоцитов, чтоявляетсянеобходимымтранспорта через эпителий.условиемдлянаправленноготрансцеллюлярного112. Обеспечение парацеллюлярного транспорта («воротная» функция,(«gate»)), которое заключается в селективной диффузии по межклеточномупространству органических макромолекул, ионов, воды.
При необходимостиподчеркнуть вклад плотных контактов в ограничениие диффузии от апикальнойстороны к базо-латеральной стороне клеток, а также в обратном направлении,используют термин «барьерная» функция эпителия. С другой стороны, чтобыуказатьнаспособность плотныхконтактов обеспечиватьизбирательноеперераспределение ионов и макромолекул для созданияградиентов,используютпонятие«селективнаямежклеточнаямежтканевыхдиффузия».Собственно говоря, эти два термина отражают различные стороны одногопроцесса – величины парацеллюлярной диффузии для ионов, органическихмолекул и воды.3. Соединение рядом расположенных эпителиоцитов (функция «моста»,(«bridge»)), которое обеспечивает механическое соединение клеток, целостность,сформированной эпителием, структуры. Эта функция плотных контактов вэпителиальных клетках остается наименее изученной.
Участие белков плотныхконтактов в молекулярном обеспечении объединения клеток в единую структурупродолжает оставаться дискуссионным. Отчасти это связано с тем, что наразличных тканях животных, которые служат моделями для изучения вкладамежклеточных соединений в сохранение целостности структуры, сохраняютсяадгезионные контакты и десмосомы. Поэтому вклад различных белков, в первуюочередь клаудинов, в реализацию этих свойств плотных контактов остаетсянеизвестным.Молочная железа как модель для изучения роли плотных контактов вцелостности клеточных структур. Молочные железы млекопитающих являетсяорганом, который обеспечивает синтез и доступность специализированногосекрета для получения питания детенышами при сосании. Альвеолы молочнойжелезы представляют собой адекватную модель для изучения формированиятканевых барьеров и поддержания их целостности. Физиологические механизмыобразования молока (Грачев и др.1976), а также выведения этого секрета из12альвеолы молочной железы достаточно подробно исследованы (Толкунов,Марков, 2005.).
В ходе выполнения функции накопления секрета в полостиальвеолы и выведением секрета из полости альвеолы при сокращениимиоэпителиальных клеток, секреторные клетки альвеолы испытывают сильное имногократное механическое воздействие (Марков, 2001). Кроме того, к началулактации между эпителиоцитами исчезают десмосомы и адгезионные контакты,при сохранении плотных контактов (Pietelka et al., 1973), которые в этом случаестановятся основной межклеточной структурой, обеспечивающей целостностьальвеолы молочной железы при механических воздействиях. Сочетание этихфакторов является важной предпосылкой для решения поставленной задачи поизучению роли плотных контактов в поддержании целостности эпителиальныхструктур.Физиология молочной железы. В ходе онтогенеза клетки молочной железыпод влиянием гормональных, ауто- и паракринных факторов неоднократноформируют разветвленную сеть альвеол и выводных протоков (Sternlicht, 2006;Sternlicht et al, 2006).
Во время лактации молочная железа вырабатывает секрет вответ на стимулы сосания в период лактации и подвергается инволюции донеразветвленных протоков после прекращения кормления (Watson, 2006).Физиологическиемеханизмырегуляциимеханизмылактациирегуляциилактации.изученыдостаточнойисследователей считала, что определяющий вклад вмолочнойжелезывносятгормональныефакторыФизиологическиеполно.Частьрегуляцию функций(Cross1961;Cross,Wakerley,1977; Тверской 1972.). Другие авторы показали участие нервнойсистемы в регуляции деятельности молочной железы (Грачев, 1954.) Синтез этихдвух направлений привел к созданию рефлекторной регуляции лактации,характерной особенностью которой является осуществление эффекторноговлияния на клетки-мишени молочной железы через нервную и эндокриннуюсистему (Грачев, 1964).
Часть исследователей, придавая решающее значениедействиюокситоцинанаклеткиальвеолмолочнойжелезы,выделяютнейроэндокринный рефлекс выведения молока. В его развитии выделяют13несколько этапов. 1. Раздражение механорецепторов и других рецепторов соска иареолы молочной железы, которые обеспечивают поступление сенсорнойинформации через спинной мозг к крупноклеточным нейронам гипоталамуса.
2.Выброс окситоцина в кровь и его транспорт по сосудистой системе к молочнойжелезе. 3.Сокращениемиоэпителиальныхклеток, закоторымследуетпровышенгие давления в молочной железе и выведение секрета наружу (Cross,Harris, 1952; Cross, 1961; Higuchi et al., 1985; Moos et al., 1989.).Важнейшим моментом для запуска механизмов регуляции секреции ирефлекса выведения молока является стимуляция периферических рецепторов, и вчастности, механорецепторов соска и ареолы (Грачев, Алексеев, 1980; Alekseev etal., 1998).Механическая стимуляция рецепторов соска и ареолы является основой длявозникновения афферентной импульсации, поступающей от молочной железы вцентральную нервную систему. Во время сосания наркотизированной самки крысрегистрируется возникновение нерегулярных пачек импульcов в нейронах заднихрогов торако-люмбарной области спинного мозга, коррелирующее с активнымсосанием крысят (Fenelon, Poulain, 1993).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
