Диссертация (1144791), страница 22
Текст из файла (страница 22)
При этом средний баллневрологического дефицита в группе «Ишемия 2б» ко 2-м суткам наблюденийсоставил 4,5 (min 3 – max 9, Р<0,05); к 7-м суткам он повышался до 7,4 (min 6 –117max 10, Р<0,05) и был значимо выше, чем в группах «ЛО 2б» и «ЛО 7б» (табл.4.1). Применение ИПостК после глобальной ишемии головного мозга ко 2-м и 7-мсуткам реперфузионного периода (группы «ПостК 2б» и «ПостК 7б»)способствовало некоторому уменьшению индекса неврологического дефицита,однако достоверных различий с группами «Ишемия 2б» и «Ишемия 7б»обнаружено не было (Р>0,05).Таблица 4.1Индекс неврологического дефицита крыс в различные периоды реперфузии послеполной глобальной ишемии головного мозга с последующим применениемишемического посткондиционированияЛО 2б0,14(0 – 1)ЛО 7б0,42(0 – 1)Экспериментальная группаМе (min-max)Ишемия 2б Ишемия 7б4,5*7,4**(3 – 9)(6 – 10)ПостК 2б3,6(3 – 7)ПостК 7б6,8(5 – 8)Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «ЛО 2б» при Р<0,05; ** по сравнению с показателем вгруппе «ЛО 7б» при Р<0,05.Ко 2-м суткам реперфузионного периода летальность крыс в группе«Ишемия 2б» значимо не отличалась от таковой в группе «ЛО 2б» (P>0,05), к 7-мсуткамреперфузионногопериоданаблюдалосьдостоверноеувеличениелетальности в группе «Ишемия 7б» при сравнении с аналогичным показателем вгруппе «ЛО 7б» (Р<0,05).
Применение ИПостК после глобальной ишемии ко 2-мсуткам реперфузионного периода (группа «ПостК 2б») приводило к некоторомуснижению уровня летальности, однако значимых различий с группой «Ишемия2б» не наблюдалось (P>0,05); к 7-м суткам реперфузионного периода (группа«ПостК 7б») летальность также незначительно понижалась, но при этом значимоне отличалась от уровня летальности, регистрируемой в группе «Ишемия 7б»(табл. 4.2).118Таблица 4.2Летальность крыс в различные периоды реперфузиипосле полной глобальной ишемии головного мозгас последующим применением ишемического посткондиционированияЛО 2б12,5(1/8)ЛО 7б14,3(1/7)Экспериментальная группаИшемия 2б Ишемия 7б30,050,0*(3/10)(5/10)ПостК 2б20,0(2/10)ПостК 7б30,8(4/13)Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «ЛО 7б» при Р<0,05.В исследовании была использована разработанная экспериментальнаямодель, позволяющая моделировать ситуацию полной ишемии-реперфузииголовного мозга у крыс.
Однако следует принять во внимание, что последствияхирургического вмешательства в области грудной клетки крысы вносятопределенный вклад в течение патологического процесса в послеоперационномпериоде и в некоторой мере затрудняют проведение поведенческих тестов иинтерпретацию неврологических симптомов.В группах ложнооперированных песчанок – «ЛО 2а» и «ЛО 7а» ко 2-м и 7м суткам реперфузионного периода неврологических нарушений не наблюдалось(табл. 4.3). Ко 2-м суткам реперфузионного периода после 7-минтуной ишемии вгруппе «Ишемия 2а» наблюдались умеренные неврологические нарушения, восновном, в виде вялости или взъерошенности волосяного покрова.
К 7-м суткамреперфузии (группа «Ишемия 7а») неврологические нарушения проявлялись ввиде вялости, тремора и взъерошенности волосяного покрова. Ко 2-м стукамреперфузионного периода после применения ИПостК (группа «ПостК 2а») индексневрологического дефицита не отличался от такового в группе «Ишемия 2а»(P>0,05). В отдаленный реперфузионный период после применения ИПостК(группа «ПостК 7а») различий в показателе индекса неврологического дефицита сгруппой «Ишемия 7а» не наблюдалось (P>0,05).119Таблица 4.3.Индекс неврологического дефицита монгольских песчанок в различные периодыреперфузии после глобальной ишемии переднего мозга с последующимприменением ишемического посткондиционированияЛО 2аЛО 7а00Экспериментальная группаМе (min-max)Ишемия 2а Ишемия 7а ПостК 2а0,140,280,14(0 – 1)(0 – 1)(0 – 1)ПостК 7а0Ко 2-м суткам реперфузионного периода в группе «Ишемия 2а»летальность составляла 10,0% и значимо не отличалась от таковой в группе «ЛО2а» (P>0,05, табл.
4.4). В отдаленный реперфузионный период после 7-минутнойишемии (группа «Ишемия 7а») летальность составила 20,0%, однако она значимоне отличалась от таковой в группе «ЛО 7а» (P>0,05). Непродолжительнаяобратимая ишемия переднего мозга у монгольских песчанок длительность до 10минутнесопровождаетсясущественнойлетальностью,поэтомуэтаэкспериментальная модель в виду простоты ее выполнения и низкой летальностиявляется экономически выгодной и широко используется для фундаментальныхфизиологическихисследований,атакжедляскринингановыхфармакологических препаратов и нейропротективных воздействий (O’Neill M.J.,Clemens J.A., 2001).Таблица 4.4Летальность монгольских песчанок в различные периоды реперфузии послеглобальной ишемии переднего мозга с последующим применениемишемического посткондиционированияЛО 2аЛО 7а00Экспериментальная группаИшемия 2а Ишемия 7а ПостК 2а10,020,00(1/10)(2/10)ПостК 7а10,0(1/10)120Ко 2-м суткам реперфузионного периода после 7-минутной ишемии ипоследующего применения ИПостК (группа «ПостК 2а») наблюдалось некотороеснижение уровня летальности, однако значимых различий с группой «Ишемия2а» обнаружено не было (P>0,05).
В отдаленный реперфузионный периодприменение ИПостК (группа «ПостК 7а») также не влияло на уровеньлетальности при сравнении с группой «Ишемия 7а» (P>0,05, табл. 4.4).4.1.3 Морфофункциональные изменения структур головного мозга приприменении ишемического посткондиционирования4.1.3.1 Морфологические изменения структур головного мозга при примененииишемического посткондиционированияВглавепредставленырезультаты,полученныеприизученииморфологических и морфометрических изменений нейронов различных слоевкоры головного мозга и полей гиппокампа при ишемии-реперфузии и приприменении ишемического посткондиционирования у песчанок монгольских икрыс.4.1.3.1.1 Влияние ишемического посткондиционированияна изменения нейронов коры головного мозга и гиппокампапри глобальной ишемии-реперфузии переднего мозга у монгольских песчанокВ данном фрагменте исследования были изучены морфологическиеизменения нейронов слоев II, III и V коры головного мозга и нейронов полейСА1, СА2, СА3 и СА4 гиппокампа при моделировании 7-минутной глобальнойишемии переднего мозга у песчанок монгольских в различные периодыреперфузии и при применении ИПостК непосредственно после ишемии.Цитоархитектоническоестроениекорыголовногомозгапесчанокмонгольских характеризовалось наличием всех 6 слоев клеток, которые присущивсем млекопитающим.
Слой II - наружный зернистый характеризовался наличием121большого количества мелких и средних нейронов, слой III - наружныхпирамидных нейронов, состоял в основном из пирамидных нейронов среднихразмеров, слой V – внутренний пирамидный был представлен, в основном,крупными и гигантскими нейронами. Для изучаемой области коры головногомозга было характерно преимущественное развитие слоев I–III и V–VI, ипрактически отсутствие слоя IV.
При этом отмечалось отсутствие четких границмежду слоями.Слои II, III и V существенно варьировали по плотности нейронов, при этомразличий в двух группах ложнооперированных песчанок - «ЛО 2а» и «ЛО 7а»обнаружено не было (табл. 4.5).Ко 2-м суткам реперфузионного периода после 7-минутной ишемиипереднего мозга у песчанок монгольских, в группе «Ишемия 2а» в затылочнойобласти коры головного мозга развивалось преимущественно диффузное иместами очаговое повреждение. Отмечался периваскулярный и перицеллюлярныйотек, набухание нейронов, хроматолиз, гиперхроматоз, кариолизис, наличиегиперхромныхсморщенныхклеток.Приморфометрическоманализенаблюдалось уменьшение числа неизмененных нейронов в слоях II и III на 45,2(Р<0,01) и 22,6% (Р<0,05), соответственно, тогда как в слое V это уменьшениебыло незначительно (на 9,1%, Р>0,05) при сравнении с таковым в группе «ЛО2а».
К 7-м суткам реперфузионного периода обратимая 7-минутная ишемияприводила к существенному нарастанию редукции числа морфологическинеизмененных нейронов в слоях II, III и V на 60,8 (Р<0,001), 63,1 (Р<0,001) и 27,9% (Р<0,05), соответственно, при сравнении с аналогичными показателями вгруппе «ЛО 7а» (табл. 4.5).122Таблица 4.5Количество морфологически неизмененных нейронов в слоях коры головногомозга монгольских песчанок в различные периоды реперфузиипосле глобальной ишемии переднего мозгас последующим применением ишемического посткондиционирования(на 1 мм2 на срезе)ЭкспериментальнаягруппаЛО 2аЛО 7аИшемия 2аИшемия 7аПостК 2аПостК 7аСлои коры головного мозгаII407±15418±12223±8*164±10β293±12#263±9+III365±15343±14205±9**126±11β296±19#265±8+V218±14221±14198±15159±10ββ206±16191±12++Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «ЛО 2а» при Р<0,01; ** при Р<0,05; β по сравнению споказателем в группе «ЛО 7а» при Р<0,001; ββ при Р<0,05; # по сравнению с показателем в группе «Ишемия 2а»при Р<0,01; + по сравнению с показателем в группе «Ишемия 7а» при Р<0,001; ++ при Р<0,05.Ко 2-м суткам реперфузионного периода применение ишемическихстимулирующих воздействий после 7-минутной ишемии (группа «ПостК 2а»)приводило к значимому увеличению числа морфологически неизмененныхнейронов только в слоях II и III на 31,3 (Р<0,01) и 44,23% (Р<0,01)соответственно, при сравнении с таковым в группе «Ишемия 2а».
К 7-м суткамреперфузиипосле7-минутнойишемииспоследующимприменениемпосткондиционирующих стимулов (группа «ПостК 7а») редукция нейронов быламенее выражена при сравнении с группой песчанок, перенесших ишемию, но безприменения ИПостК (группа «Ишемия 7а»). Так, в группе «ПостК 7а»установлено значимое увеличение количества морфологически неизмененныхнейронов в слоях II, III и V на 60,4 (Р<0,001), 109,8 (Р<0,001) и 19,9 % (Р<0,05),соответственно, при сравнении с таковым в группе «Ишемия 7а» (табл.
4.5).При морфометрическом анализе гиппокампа у ложнооперированныхпесчанок в группах «ЛО 2а» и «ЛО 7а» мелкие клетки пирамидного слоя поляСА1 гиппокампа располагались плотно в 4-5 слоев со средней плотностьюнейронов 352±10/мм и 347±9/мм, соответственно (рис. 4.3, табл. 4.6). Для поляСА2 гиппокампа было характерно более рыхлое расположение клеток в 3-4 слоя,123тела пирамидных нейронов были несколько крупнее при сравнении с нейронамиполя СА1. Пирамидный слой поля СА3 гиппокампа характеризовался наличиемкрупных нейронов, рыхло расположенных в 4-5 слоев. В поле СА4 пирамидныйслойпредставленнейронамискрупнымиразмерамиклеточныхтел,расположенными очень рыхло в 5-6 слоев клеток (рис.