Диссертация (1144791), страница 26
Текст из файла (страница 26)
4.5). При анализе установлено, что активность ЛДГ, регистрируемая вцитоплазме нейронов слоев II, III и V коры головного мозга не различается в двухгруппах ложнооперированных животных – «ЛО 2а» и «ЛО 7а» (рис. 4.5).Максимальная активность ЛДГ в группах «ЛО 2а» и «ЛО 7а» была обнаружена вцитоплазме нейронов слоя III при сравнении с таковой в слоях II и V (P<0,01).Активность ЛДГ в цитоплазме нейронов животных ложнооперированных группзависелаотпринадлежностинейронакопределенномуслоюкорыраспределялась в следующем порядке: III слой > II слой и Vслой (P<0,01).и139Рис. 4.5. Активность лактатдегидрогеназы в морфологически неизмененных нейронах слоев II,III и V коры мозга монгольских песчанок в различные периоды реперфузии после глобальнойишемиипереднегомозгаспоследующимприменениемишемическогопосткондиционирования.По горизонтальной оси – группы животных; по оси ординат – оптическая плотность (отн.
ед.). Различия значимы: #по сравнению с показателями в слоях внутри группы при Р<0,01; ## при Р<0,05; * по сравнению с показателем вгруппе «ЛО 2а» при Р<0,001; + по сравнению с показателем в группе «ЛО 7а» при Р<0,01; α по сравнению споказателем в группе «Ишемия 2а» при Р<0,01; β по сравнению с показателем в группе «Ишемия 7а» при Р<0,01.Ко 2-м суткам реперфузионного периода после перенесенной 7–минутнойишемии (группа «Ишемия 2а») в цитоплазме неизмененных нейронов слоя IIкоры головного мозга монгольских песчанок наблюдалось значимое понижениеактивности ЛДГ на 20,8% (до 0,19±0,084 отн. ед.) при сравнении с активностью,регистрируемой в группе «ЛО 2а» (P<0,001). К 7-м суткам наблюденияферментативная активность оставалась без значимых изменений при сравнении стаковой в группе «Ишемия 2а» (P>0,05) и была значимо ниже, чем в группе «ЛО7а» (Р<0,01).
В цитоплазме нейронов слоя III – наружных пирамидных нейронов,ко2-мсуткамферментативнойреперфузииактивностинаблюдалосьЛДГ,котороезначимое(P<0,001)сохранилосьдоснижение7-хсуток140реперфузионного периода. Изменение ферментативной активности в нейронах Vслоя коры головного мозга – внутреннем пирамидном слое, ко 2-м суткамреперфузии характеризовалось резким падением активности ЛДГ на 30% до0,16±0,041 отн.
ед. при сравнении с активностью, регистрируемой в группе «ЛО2а» (P<0,001), тогда как к 7-м суткам реперфузии отмечалось повышениеактивности ЛДГ до уровня, регистрируемого в группе «ЛО 7а» (P>0,05).Активность ЛДГ в морфологически неизмененных нейронах в ответ наобратимую ишемию переднего мозга ко 2-м суткам реперфузионного периодараспределялась в следующем порядке: III слой > II слой > Vслой (P<0,01); к 7-мсуткам реперфузионного периода - V слой > III слой > II слой (P>0,05) (рис. 4.5).На 2-е сутки реперфузионного периода применение ИПостК приводило кувеличению активности ЛДГ в цитоплазме неизмененных нейронов во всеханализируемых слоях коры головного мозга, при сравнении с таковым в группе«Ишемия 2а» (рис.
4.5). При сравнении этого показателя в нейронах слоев II, III иV коры головного мозга в группах «Ишемия 2а» и «ПостК 2а» в последнейнаблюдалось его увеличение на 36,8 (P<0,01), 43,5 (P<0,01) и 37,5% (P<0,01),соответственно. При анализе активности ЛДГ в отдаленном реперфузионномпериоде после применения ИПостК (группа «ПостК 7а») для всех анализируемыхслоев II, III и V коры головного мозга было установлено достоверное увеличениеактивности на 15,0, 28,5 и 13,6%, соответственно, при сравнении с активностью,регистрируемой в группе «Ишемия 7а» (P<0,01). Применение ИПостК в ранний иотдаленный реперфузионный период приводило к изменению активности ЛДГ взависимости от принадлежности нейрона к слою коры головного мозга. Так, ко 2м суткам реперфузионного периода активность ЛДГ распределялась в следующемпорядке: III слой > II слой > V слой (P<0,01); к 7-м суткам реперфузионногопериода: III слой > V слой и II слой (P<0,05).СреднийуровеньактивностиЛДГ,регистрируемыйвцитоплазмепирамидных нейронов всех четырех полей СА1, СА2, СА3 и СА4 гиппокампа неразличался в двух группах ложнооперированных песчанок – «ЛО 2а» и «ЛО 7а».В полях гиппокампа у песчанок наблюдались свои особенности распределения141нейронов с различным уровнем активность ЛДГ (рис.
4.6). Активность ЛДГ,регистрируемая в цитоплазме пирамидных нейронов полей СА1, СА2, СА3 и СА4гиппокампа, не различался в двух группах ложнооперированных животных - «ЛО2а» и «ЛО 7а». Однако наблюдались различия этого показателя в отдельныхполях гиппокампа (рис. 4.6).
Минимальная активность фермента ЛДГ в группах«ЛО 2а» и «ЛО 7а» регистрировалась в нейронах поля СА4 и составляла0,21±0,064 и 0,21±0,076 отн. ед. соответственно. В нейронах полей СА1, СА2 иСА3 гиппокампа активность ЛДГ была достоверно выше при сравнении с таковойв поле СА4 (P<0,05), наибольшее ее значение отмечалось в поле СА1 у животныхв группах «ЛО 2а» и «ЛО 7а» - 0,26±0,091 и 0,26±0,085 отн.
ед., соответственно.АктивностьЛДГложнооперированныхвцитоплазмегруппнейроновзависелаотгиппокампапринадлежностипесчанокнейронакопределенному полю гиппокампа и распределялась в следующем порядке: СА1,СА2, СА3 > СА4 (P<0,05) (рис. 4.6).В зависимости от длительности реперфузионного периода активность ЛДГв цитоплазме нейронов полей гиппокампа изменялась по-разному (рис. 4.6).Активность ЛДГ в цитоплазме пирамидных нейронов поля СА1 ко 2-м суткамреперфузионного периода понижалась по сравнению с показателем в группе «ЛО2а» на 26,9%, до 0,19±0,006 отн.
ед. (P<0,01). К 7-м суткам реперфузииактивность ЛДГ дополнительно понижалась и составляла 0,17±0,005 отн. ед., чтозначимо отличалось от активности, регистрируемой в группе «ЛО 7а» (P<0,001).Активность ЛДГ в нейронах поля СА2 ко 2-м суткам реперфузионного периодаповышалась, однако достоверных различий по сравнению с показателем в группе«ЛО 2а» обнаружить не удалось (P>0,05). К 7-м суткам реперфузионного периодаактивность ЛДГ в нейронах поля СА2 понижалась на 20% (P<0,001) присравнении с аналогичным показателем в группе «ЛО 7а» и на 23% (P<0,01) присравнении с таковым в группе «Ишемия 2а».142Рис. 4.6. Активность лактатдегидрогеназы в морфологически неизмененных нейронах полейСА1, СА2, СА3 и СА4 гиппокампа монгольских песчанок в различные периоды реперфузиипосле глобальной ишемии переднего мозга с последующим применением ишемическогопосткондиционирования.По горизонтальной оси – группы животных; по оси ординат – оптическая плотность (отн.
ед.). Различия значимы:** по сравнению с показателями в полях гиппокампа внутри группы при Р<0,05; * при Р<0,01; ++по сравнению споказателем в группе «ЛО 2а» при Р<0,01; + при Р<0,05; α по сравнению с показателем в группе «ЛО 7а» приР<0,001; αα при Р<0,01; # по сравнению с показателем в группе «Ишемия 2а» при Р<0,01; ## при Р<0,001; ### приР<0,05; ββ по сравнению с показателем в группе «Ишемия 7а» при Р<0,001; β при Р<0,01.Ко 2-м суткам реперфузионного периода морфологически неизмененныенейроны поля СА3 гиппокампа в ответ на 7-минутную ишемию отреагировализначимым понижением активности ЛДГ при сравнении с аналогичным показатемв группе «ЛО 2а» (на 14,3%, P<0,05).
К 7-м реперфузионным суткам активностьЛДГ существенно возрастала до 0,31±0,008 отн. ед. и была на 29,2% выше, чем вгруппе «ЛО 7а» (P<0,001) и на 47,6% выше, чем в группе «Ишемия 2а» (P<0,001).143Изменение ферментативной активности ЛДГ в пирамидных нейронах поля СА4соответствовало колебаниям активности, наблюдаемым в нейронах поля СА3гиппокампа. Так, ко 2-м суткам реперфузии в группе «Ишемия 2а» наблюдалосьпонижение активности ЛДГ до 0,20±0,005 отн.
ед. при сравнении с таковым вгруппе «ЛО 2а» (P<0,05) и значимое ее возрастание на 7-е сутки реперфузии на19,1% при сравнении с аналогичным показателем в группе «ЛО 7а» (P<0,01) и на25% при сравнении с таковым в группе «Ишемия 2а» (P<0,01). Таким образом,характеризмененияактивностиЛДГвцитоплазмеморфологическинеизмененных нейронов гиппокампа в ответ на обратимую ишемию ко 2-мсуткам реперфузионного периода распределялся в следующем порядке: СА2 >СА3, СА4, СА1 (P<0,01); к 7-м суткам реперфузионного периода - СА3 > СА4 >СА2 > СА1 (P<0,01).Применение ИПостК ко 2-м суткам реперфузионного периода приводило кувеличению активности ЛДГ в цитоплазме неизмененных нейронов всех полейгиппокампа при сравнении с группой «Ишемия 2а» (рис. 4.6).
В цитоплазменейронов полей СА1, СА2, СА3 и СА4 гиппокампа увеличение было на 26,3, 11,5,23,8 и 20% соответственно, при сравнении с аналогичными показателями вгруппе «Ишемия 2а» (P<0,05). При этом активность ЛДГ в цитоплазмеморфологически неизмененных нейронов полей СА2 и СА4 гиппокампа быладостоверно выше активности, регистрируемой в аналогичных полях группы «ЛО2а» (P<0,05). Ко 2-м суткам реперфузионного периода после применения ИПостКактивность ЛДГ в цитоплазме морфологически неизмененных нейроновраспределялась в следующем порядке: СА2 > СА3 > СА1, СА4 (P<0,05).При анализе изменения активности ЛДГ в отдаленном реперфузионномпериоде после применения ишемических посткондиционирующих стимулов былоустановлено увеличение среднего уровня активности ЛДГ в цитоплазмеморфологически неизмененных нейронов всех четырех полей СА1, СА2, СА3 иСА4 гиппокампа на 17,4% при сравнении аналогичным показателем в группе«Ишемия 7а» (P<0,01).
При этом в цитоплазме неизмененных нейронов поля СА1активность повышалась до 0,27±0,008 отн. ед. и была на 58,8% выше, чем в144группе «Ишемия 7а» (P<0,001) и значимо не отличалось от активности в группе«ЛО 7а» (P>0,05). В цитоплазме морфологически неизмененных нейронов поляСА2 активность ЛДГ к 7-м суткам реперфузии была на 20% выше, чем в группе«Ишемия 7а» (P<0,01) и достоверно не отличалась от активности в группе «ЛО7а» (P>0,05). К 7-м суткам реперфузии после применения ИПостК активностьЛДГ в цитоплазме нейронов поля СА3 значимо не отличалась от таковой в группе«Ишемия 7а» (P>0,05). В цитоплазме неизмененных нейронов поля СА4активность ЛДГ в отдаленном реперфузионном периоде после примененияИПостК была значимо выше при сравнении с аналогичным показателем в группе«Ишемия 7а» (P<0,01).
К 7-м суткам реперфузионного периода после примененияИПостК активность ЛДГ в цитоплазме морфологически неизменённых нейроновраспределялась в следующем порядке: СА3 > СА1, СА4 > СА2 (P<0,01),соотношение активности ЛДГ в разных полях гиппокампа нарушалось присравнении с активностью, наблюдаемой к 7-м суткам реперфузионного периодабез применения ишемических стимулов, в группе «Ишемия 2а».В проведенном исследовании обнаружено, что различные слои корыголовногомозгахарактеризуютсяложнооперированныхразличнойактивностьюкрысиЛДГвпесчанокмонгольскихцитоплазменейронов.Установлено, что для нейронов слоя V коры головного мозга крыс и песчанокхарактерна самая низкая активность ЛДГ.