Диссертация (1141392), страница 21
Текст из файла (страница 21)
ГХ анализ эфирного масла герани на ПИД методом внешнего стандартаИспытуемый раствор: см. методику приготовления одноименного раствора в разделекачественного ГХ-анализа эфирного масла герани.Раствор стандартного образца гераниола: см. методику приготовления растворастандартного образца гераниола для проверки пригодности хроматографической системы вразделе качественного ГХ-анализа эфирного масла герани.Последовательно хроматографировали 1 мкл раствора стандартного образца гераниола ииспытуемого раствора.
Получали не менее 5 хроматограмм каждого раствора в соответствии срисунком 21.Содержание гераниола в ЭМ герани составило 15,75±0,5369г/100г (16%). Все расчетыприведены таблицах 16, 17.93Таблица 16– Результаты определения площади пика растворов стандартного образцагераниолаПробы СОПлощадь пикаВысота пикаВремяКонцентрациягераниолагераниола, мв*мингераниола, мвудерживания,гераниола, %№мин1252,08373142,7816,0091002309,84883525,4726,0261003295,73483280,6566,0191004232,97052996,4926,0011005273,90813403,0646,004100Примечание: n=5; Sст(∑Sст/5) = 272,9092Таблица 17 – Результаты определения площади пика эфирного масла гераниПробыПлощадь пика гераниола,Высота пикаВремяКонцентрацияэфирногомв*мингераниола, мвудерживания,гераниола,минмг/100гмасла №144,1352905,415,9315,84245,03521150,2266,0116,16343,1352660,5946,0015,48442,2352767,5355,9515,15544,93521051,6996,0316,12статистическая обработка концентраций гераниолаХ(∑Х/5)S2S±∆Х+∆Х-∆EE%15,750,18650,43190,536916,2915,210,03413,41Примечание: n=5; C(∑C/5) =15,75 мг/100г94Рисунок 21 – Хроматограмма эфирного масла герани, предназначенного для введения всостав зубной пасты и ополаскивателя «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы»методом ГХ-анализа5.3.2.
ГХ анализ ополаскивателя для полости рта «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs /Лечебные травы»Методика количественного определения гераниола в ополаскивателе «SPLAT (СПЛАТ)Medical Herbs / Лечебные травы» методом газовой хроматографии приведена в разделе 5.1.Качественный анализ ополаскивателя «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы».Содержание гераниола в извлечении из ополаскивателя при проведении ГХ-анализа на ПИДсоставило 7,08±0,0453мг/100г (0,007%). Все расчеты приведены в таблице 18.Концентрациягераниоласоответствуетзначениямминимальноподавляющейконцентрации ЭМ герани для оказания сильного антибактериального действия на биопленкиполости рта, а также диапазону нормируемых значений синтетического гераниола [0,001%;0,01%].Содержание гераниола в ополаскивателе «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебныетравы» в 1,5 раза больше, чем в одноименной зубной пасте, что объяснятся их разным способомприменения, а, следовательно, разным воздействием на развития биопленок в полости рта.95Таблица 18 – Результаты определения площади пика гераниола в извлечении изополаскивателя «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы»ПробыПлощадь пика гераниола,Высота пикаВремяКонцентрацияпастымв*мингераниола, мвудерживания,гераниола, мг/100г№мин10,28877,4575,917,1120,28777,4565,917,0830,28677,4555,907,0640,28597,4545,907,0450,29007,4585,927,13статистическая обработка концентраций гераниолаХ(∑Х/5)S2S±∆Х+∆Х-∆EE%7,0840,001330,03650,04537,1297,0390,00640,645.3.3.
Зубная паста «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы»5.3.3.1.ГХ анализ на ПИД методом внешнего стандартаИспытуемый раствор: см. методику приготовления одноименного раствора в разделекачественного ГХ-анализа зубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы».Раствор стандартного образца гераниола: см. методику приготовления растворастандартного образца гераниола для проверки пригодности хроматографической системы вразделе качественного ГХ-анализа зубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебныетравы».Последовательно хроматографировали 1 мкл раствора стандартного образца ииспытуемого раствора. Получали не менее 5 хроматограмм каждого раствора в соответствии срисунком 22.Содержание гераниола в извлечении из зубной пасты SPLAT «Лечебные травы» припроведении ГХ-анализа на ПИД составило 2,07±0,0142мг/100г (0,0207 мг/г).
Все расчетыприведены в таблице 19.96Таблица 19 – Результаты определения площади пика гераниола в извлечении из зубнойпасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы» 1 год храненияПробыПлощадь пика гераниола,Высота пикаВремяКонцентрацияпастымв*мингераниола, мвудерживания,гераниола, мг/100г№мин10,408410,1456,052,0720,411410,1486,032,0930,408110,14476,052,0740,406410,1436,042,0650,409410,1466,002,08статистическая обработка концентраций гераниолаХ(∑Х/5)S2S±∆Х+∆Х-∆EE%2,0740,00010,01140,01422,08822,05980,00680,68Примечание: n=5; С(∑С/5) = 2,07мг/100гРисунок 22 – Хроматограмма извлечения из зубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs/ Лечебные травы» (метод ГХ анализа на ПИД)Согласно литературным источникам [82, 83] значения МПК ЭМ герани, при которыхпеларгонияоказываетсильныйантибактериальныйэффектпоотношениюкпародонтопатогенным микроорганизмам, составляют 1000 мкг/мл (1,12 мг/г с учетом ρ(ЭМгерани) = 0,89г/мл) к Streptococcus mutans, 0.72 мг/мл (0,81мг/г) к S.
aureus, 0.36 мг/мл (0,4мг/г) к97Bacillus cereus и 0.72 мг/мл (0,81мг/г) к B. Subtilis, 1000 мкг/мл (1,12 мг/г) к S. sobrinus, 2000мкг/мл (2,25 мг/г) к S. sanguinis, 2000 мкг/мл (2,25 мг/г) к S. salivarius, 1000 мкг/мл (1,12 мг/г) кL. casei. Несмотря на то, что полученная концентрация гераниола в извлечении из зубной пасты«SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы» составляет 0,02 мг/г, что меньше МПК ЭМгерани, однако рассчитанная концентрация относится исключительно к одному ему основномудействующему веществу, а не всему маслу, следовательно, можно предполагать, чтоконцентрацияЭМбудетсоответствоватьзначениямМПКиобеспечиватьсильноеантибактериальное действие зубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы»на биопленки полости рта.
Внедрение такого показателя качества как «массовая доля гераниола»в НД на профилактические зубные пасты, содержащие в качестве лечебно-профилактическойдобавки ЭМ герани, будет подтверждать эффективность и качество готовой продукции. С учетомотнесения гераниола к частично смываемым веществам из-за малой растворимости в воде, атакже ограничений для синтетического гераниола под номером 78 в перечне веществприложения 2 ТР ТС -009-2011, полученные концентрации гераниола в исследуемых СГПРсоответствуют диапазону нормируемых значений [0,001%;001%].5.3.3.2.ГХ-МС-анализ методом внутреннего стандартаИспытуемый раствор: см.
методику приготовления одноименного раствора в разделекачественного ГХ-МС-анализа зубной пасты SPLAT «Лечебные травы».Основной градуировочный раствор стандартного образца гераниолаОколо 50мг (точная навеска) стандартного образца гераниола (Sigma-Aldrich кат.№48798)помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяли в 50 мл дихлорметана, доводилиобъем раствора дихлорметаном до метки и перемешивали (концентрация основногоградуировочного раствора гераниола 1 мг/мл).Рабочие градуировочные растворы стандартного образца гераниола с внутреннимстандартомРаствор №1.
Отмеривали микрошприцом для хроматографии 10 мкл основногоградуировочного раствора стандартного образца гераниола в мерную колбу вместимостью 5мл,добавляли 10 мкл внутреннего стандарта (раствора фенантрена и пердейтеронафталина вдихлорметане с концентрацией фенантрена 1мг/мл, пердейтеронафталина 1мг/мл) и 1млдихлорметана, после чего проводили хроматографирование аликвоты (0,1мкл) полученногораствора.Раствор №2. Отмеривали микрошприцом для хроматографии 10 мкл раствора №1 вмерную колбу вместимостью 5мл, добавляют 1мл дихлорметана, после чего проводилихроматографирование аликвоты (0,1мкл) полученного раствора.98Раствор №3. Отмеривали микрошприцом для хроматографии 10 мкл раствора №2 вмерную колбу вместимостью 5мл, добавляют 1мл дихлорметана, после чего проводилихроматографирование аликвоты (0,1мкл) полученного раствора. Растворы использовалисвежеприготовленными.
Рабочий градуировочный раствор и испытуемый раствор вводили по 3раза каждый.Содержание гераниола в извлечении из зубной пасты SPLAT «Лечебные травы» припроведении ГХ-МС анализа составила 1,08±0,0162мг/100г. Все результаты приведены в таблицах20, 21, 22, рисунках 23, 24, 25, 26, 27.Таблица 20 – Результаты ГХ-МС анализа рабочих градуировочных растворовстандартного образца гераниола с внутренним стандартом пердейтеронафталином№КомпонентыраствораВремяХарактеристиПлощадь подФакторудерживанческие ионы спиком, мв*сотклика поия, сm/zвнутреннему стандарту(пердейтеро-нафталину)Растворпердейтеронафталин402,613647870562№1гераниол431,56961960859Растворпердейтеронафталин402,413625577889№2гераниол431,26929760151Растворпердейтеронафталин402,413621866915№3гераниол431,169236631010,80,90,9Таблица 21 – Результаты ГХ-МС анализа рабочих градуировочных растворовстандартного образца гераниола с внутренним стандартом фенантреном№КомпонентыраствораВремяХарактеристическиеПлощадьФакторудерживания,ионы с m/zпод пиком,отклика помв*свнутреннемусстандарту(фенантрену)Растворфенантрен636,418817210483№1гераниол431,56961960859Растворфенантрен636,11888661087№2гераниол431,269297601510,30,399Растворфенантрен635,91886704987№3гераниол431,169236631010,3Таблица 22 – Результаты ГХ-МС анализа извлечения из зубной пасты «SPLAT (СПЛАТ)Medical Herbs / Лечебные травы» с внутренним стандартом фенантреномПробыКомпонентВремяХарактеристическиеПлощадьКонцентрацияпастыиспытуемогоудерживания,ионы с m/zпод пиком,гераниола,№раствора ссмв*смг/100гвнутреннимстандартом12345гераниол433,96996490843фенантрен638,118818628220гераниол433,469106420216фенантрен637,318821171752гераниол43469101455530фенантрен63818819899986гераниол433,569103937873фенантрен637,518820535869гераниол433,76998973186фенантрен637,6188192641031,101,071,081,071,09статистическая обработка концентраций гераниолаХ(∑Х/5)S2S±∆Х+∆Х-∆EE%1,0820,000170,013040,01621,09821,06580,01501,50Примечание: n=5; С(∑С/5) = 1,08мг/100гРисунок 23 – Хроматограмма рабочего градуировочного раствора стандартного образцагераниола с внутренним стандартом пердейтеронафталином100Рисунок 24 – Хроматограмма внутреннего стандарта фенантренаРисунок 25 – Хроматограмма по полному ионному току дихлорметанового извлечения иззубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы» с внутренним стандартомфенантреномРисунок 26 – Увеличенный фрагмент хроматографического пика гераниола из извлечениязубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы» с внутренним стандартомфенантреном101Рисунок27–Масс-спектрынавершинехроматографическогопика433,9с:а) библиотечный масс-спектр гераниола; б) индивидуальный масс-спектр гераниола (безучета фона); в) индивидуальный масс-спектр гераниола (с учетом фона).ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 51.Качественный анализ зубной пасты и ополаскивателя для полости рта «SPLAT(СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы» показал, что наиболее эффективно и целесообразновключать эфирномасличные растения в состав или прописи зубных паст в виде эфирных масел,а не водно-спиртовых экстрактов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
