Диссертация (1141392), страница 18
Текст из файла (страница 18)
Salviafolia», что позволяет подтвердить его качество (подлинность).4.2.Качественный анализ водно-спиртового экстракта цветков ромашки4.2.1.ГХ анализКачественный ГХ анализ водно-спиртового экстракта цветков ромашки проводили последующей методике:Испытуемый раствор:10 мл спирта этилового 95% помещали в мерную колбу с притертой пробкойвместимостью 25 мл, отвешивали навеску с точностью до 1,0000 г водно-спиртового экстракта71цветков ромашки, полученного от компании-производителя SPLAT, помещали в УЗ-баню на 510 мин, довели объем раствора спиртом этиловым 95% до метки.Растворстандартногообразцафарнезенадляпроверкипригодностихроматографической системы:Около 0,1000 г (точная навеска) стандартного образца β-фарнезена помещали в мернуюколбу вместимостью 25 мл, растворяли в 15 мл спирта этилового 95%, довели объем раствораспиртом этиловым 95% до метки и перемешали.
Раствор использовали свежеприготовленным.Последовательно хроматографировали 1 мкл раствора стандартного образца ииспытуемого раствора. Получали не менее 5 хроматограмм каждого раствора.Проверка пригодности хроматографической системыХроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующиеусловия:эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику фарнезена, неменее 221 600 теоретических тарелок;фактор асимметрии пика 1,023;относительное стандартное отклонение площадей пиков не более 3,76%.Время удерживания: фарнезена – около 5,67 мин в соответствии с таблицей 6, рисунком 5.Таблица 6 – Данные хроматографического пика фарнезенаВремяКомпонентудерживания, мин5,67фарнезенВысота,Площадь,Высота,Площадь,Ширина,мвмв*мин%%сек2239,45212,58100,00100,00024,12Рисунок 5 – Хроматограмма раствора стандартного образца β-фарнезена72Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого растворасоответствует времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартногообразца фарнезена согласно данным таблицы 7, рисунка 6.
Идентификацию компонентов водноспиртового экстракта цветков ромашки проводили по временам удерживания СО. Дляподтверждения подлинности и стандартизации данного водно-спиртового экстракта фарнезенбыл выбран основным специфическим веществом-маркером цветков ромашки в силу болеевысокого содержания в экстракте по сравнению с бисаболол оксидом А.Таблица 7 – Химический состав водно-спиртового экстракта цветков ромашки по даннымГХ анализа№ВремяКомпонентудерживания,Высота,Площадь,Высота,мвмв*мин%Площадь, Ширина,%секмин15,67фарнезен2432,276 254,048591,402683,885721,80210,47бисаболол228,7828,597416,114316,8048,8024оксид А2661,058 302,8509Рисунок6–Хроматограммаводно-спиртового100,0000 100,0000экстрактацветковромашки,предназначенного для введения в состав зубной пасты и ополаскивателей «SPLAT(СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы» (метод ГХ анализа на ПИД)73На приведенной выше хроматограмме (рисунок 6) отображены наиболее важные иосновные репрезентативные компоненты хроматографического профиля водно-спиртовогоэкстракта цветков ромашки: фарнезен и бисаболол оксид А.
Наличие хроматографических пиковэтих веществ с характерными временами удерживания говорит о подлинности водно-спиртовогоэкстракта цветков ромашки, предназначенного для введения в состав зубной пасты иополаскивателя «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы».4.2.2.ГХ-МС анализКачественный ГХ-МС анализ водно-спиртового экстракта цветков ромашки проводили последующей методике:Испытуемый растворОколо 30 мл водно-спиртового экстракта цветков ромашки упаривали в роторномиспарителе примерно в 3 раза (около 10 мл) с целью удаления воды и концентрированияраствора.
Прибавляли примерно втрое (около 30 мл) спирта этилового 95% с цельюпереэкстракции. Проводили хроматографирование аликвоты 1мкл полученного раствора.Раствор сравнения (настойка цветков ромашки аптечной на спирте этиловом 95% (1:10))Около 5г (точная навеска) цветков ромашки аптечной, предварительно измельченных доразмера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстия 2мм, помещали в плоскодоннуюколбу вместимостью 50мл и прибавляли 50 мл спирта этилового 95%.
Проводили экстракциюметодом мацерации в течение 2 суток.Хроматографировали испытуемый раствор и раствор сравнения.Результаты хроматографического анализа раствора сравнения и испытуемого раствора (всоответствии с рисунками 7, 8 и таблицей 8) свидетельствуют о наличие 7 из 11 веществмаркеров, характерных для исходного эфирномасличного ЛРС (цветков ромашки аптечной), ванализируемом водно-спиртовом экстракте цветков ромашки, предназначенного для введения всостав ополаскивателя и зубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы», чтоподтверждает его подлинность.
Согласно результатам анализа, самые интенсивные пикиприходятся на á-фарнезен, оксид бисаболола В, оксид кариофиллена, так как доли этихкомпонентов составляют 5,07 %, 22,55 %, 20,88 % соответственно.74Рисунок 7 – Хроматограмма настойки цветков ромашки аптечной на спирте этиловом 95%(1:10) (метод ГХ-МС)Рисунок8–Хроматограммаводно-спиртовогоэкстрактацветковромашки,предназначенного для введения в состав зубной пасты и ополаскивателя «SPLAT (СПЛАТ)Medical Herbs / Лечебные травы» (метод ГХ-МС)Таблица 8 – Сравнительная таблица химического состава летучей фракции цветковромашки аптечной по данным ГХ-МС-анализа№Вещества-маркерыРаствор сравненияИспытуемый раствор(настойка цветков ромашки(водно-спиртовой экстрактаптечной на спирте этиловомромашки, предназначенный для95% (1:10))введения в состав зубной пасты«SPLAT (СПЛАТ) MedicalHerbs / Лечебные травы»)№ пика навремя№ пика навремяхроматограммеудерживания,хроматограммеудерживания,сек1Лимонен73361.9сек54361.5752Борнеол124438.2--3Карвон150469.7114469.64Эвгенол177515.7--5α-фарнезен201553.7147553.66Спатуленол244608.9179608.87Кадинен260630.3--8α-Бисаболол276642.9201642.89Оксид бисаболола291662.997215668.2297668.7216668.3А10ОксидкариофилленаТаким образом, водно-спиртовой экстракт цветков ромашки, предназначенный длявведения в состав ополаскивателя и зубной пасты «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебныетравы» соответствует по своему химическому составу, в частности по специфичнымкомпонентам, фармакопейному ЛРС «Ромашки цветки.
Chamomillae flores».4.3.Качественный анализ эфирного масла герани4.3.1.ГХ анализКачественный ГХ анализ эфирного масла герани проводили с по следующей методике:Испытуемый раствор:10 мл спирта этилового 95% помещали в мерную колбу с притертой пробкойвместимостью 25мл, отвешивали навеску с точностью до 1,0000 г эфирного масла герани,полученного от компании-производителя SPLAT, помещали в УЗ-баню на 5-10 мин, доводилиобъем раствора спиртом этиловым 95% до метки.Растворстандартногообразцагераниоладляпроверкипригодностихроматографической системы:Около 0,1745г (точная навеска) стандартного образца гераниола (Sigma-Aldrichкат.№48798) помещали в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяли в 5 мл спирта этилового95%, доводили объем раствора спиртом этиловым 95% до метки и перемешивали.Раствор использовали свежеприготовленным.Последовательно хроматографировали 1 мкл раствора стандартного образца ииспытуемого раствора.
Получали не менее 5 хроматограмм каждого раствора.Проверка пригодности хроматографической системыХроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующиеусловия:76эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику гераниола, неменее 50 261,09 теоретических тарелок;фактор асимметрии пика 0,662;относительное стандартное отклонение площадей пиков не более 2,64%.Время удерживания: гераниола – около 6,00 мин в соответствии с таблицей 9, рисунком 9.Таблица 9 – Данные хроматографического пика гераниолаВремяКомпонентудерживания,Высота,Площадь,Высота,Площадь,Ширина,мвмв*мин%%сек2795,959253,5934100,0000100,000010,32мин6,00ГераниолРисунок 9 – Хроматограмма раствора стандартного образца гераниолаНа приведенных ниже таблице 10 и рисунке 10 отображены наиболее важные и основныерепрезентативные компоненты хроматографического профиля эфирного масла герани:гераниол и цитронеллол.
Наличие хроматографических пиков этих веществ с характернымивременами удерживания говорит о подлинности эфирного масла герани, предназначенного длявведения в состав зубной пасты и ополаскивателя для полости рта «SPLAT (СПЛАТ) MedicalHerbs / Лечебные травы». Согласно методу внутренней нормализации, самые интенсивные пикиприходятся на два основных репрезентативных вещества: цитронеллол и гераниол, массовыедоли которых составляют 35,12 % и 18,70 % соответственно, а также на линалоол, нераль игераниаль – 10,36 %, 11,05 %, 5,73 % соответственно.77Таблица 10 – Химический состав эфирного масла герани по данным ГХ анализа№ВремяКомпонентудерживВысота,Площадь,Высота,ПлощадШирина,мвмв*мин%ь, %секания,мин12,37Альфа-230,8154,65182,10260,83591,60Пинен22,65Бета-Пинен15,6630,42370,14270,07611,2833,03Лимонен31,6850,90690,28860,16301,9643,12Цимол5,7140,11550,05210,02081,3253,17Цинеол6,5570,17580,05970,03161,5663,43Терпинен26,2490,80200,23910,14412,8073,6013,1560,31310,11980,05632,0483,681893,94957,631917,252710,35553,3293,83357,6549,79903,25801,76072,48104,06120,2173,72401,09510,66912,64114,48Камфора270,5829,50942,46481,70873,16124,65Борнеол791,12426,46707,20664,75573,60135,56Цитронелло2788,094195,467825,397835,12239,04Линалоолл146,02Гераниол1651,828104,098115,047118,70476,96156,34Нераль1300,69061,520911,848511,05436,68166,85Гераниаль662,30131,91536,03315,734711,56177,8241,8102,81470,38090,50584,80188,7462,5222,83960,56950,51024,04199,5195,7385,39920,87210,97026,04209,7753,9522,13810,49150,38429,56219,97371,71020,11523,38603,61444,402210,2743,9533,51900,40040,63235,802310,5052,9854,21940,48270,75826,722410,7611,9581,06040,10890,19056,042510,9524,3421,69630,22170,30486,882611,3352,4675,21020,47790,93626,442,3710977,714556,5343100,0000 100,000078Рисунок 10 – Хроматограмма эфирного масла герани, предназначенного для введения всостав зубной пасты и ополаскивателя «SPLAT (СПЛАТ) Medical Herbs / Лечебные травы»(метод ГХ анализа на ПИД)4.3.2.
ГХ-МС анализКачественный ГХ-МС анализ эфирного масла герани проводили с по следующейметодике:Испытуемый раствор1 каплю эфирного масла герани, полученного от компании SPLAT, отмеряли при помощистеклянного капилляра и растворяли в 1 мл дихлорметана. Проводили хроматографированиеаликвоты (1 мкл) полученного раствора.Раствор стандартного образца гераниола1 каплю стандартного образца гераниола (Sigma-Aldrich кат.№48798) отмеряли припомощистеклянногокапилляраирастворялив2млдихлорметана.Проводилихроматографирование аликвоты (1 мкл) полученного раствора.Масс-спектрпредставляетсобойфундаментальнуюхарактеристику конкретноговещества, поэтому идентификацию гераниола в эфирном масле герани проводили по двум егохарактеристическим ионам (m/z 41 и 69) масс-спектра (в соответствии с рисунками 11, 12, 13 итаблицей 11).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
