Диссертация (1141371), страница 13

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 13)

Поэтомупринцип, изложенный в приложении 9 «Производство жидкостей, кремов имазей» к Руководству по надлежащей практике производства лекарственныхсредств для человека, принятому в Российской Федерации (2007), гласит: «Припроизводстве жидкостей, кремов, мазей и других мягких лекарственных формсуществует особенно большой риск микробной и другой контаминации.Следовательно,необходимыособыемерыпопредотвращениюлюбойконтаминации».Чтобы обеспечить микробиологическую чистоту назальных спреев, с однойстороны, соблюдают установленные правила надлежащей производственнойпрактики [19]; с другой стороны, в их составы вводят антимикробныеконсерванты [62].

При этом необходимо доказать, что выбранные консервантыдействительно способны эффективно предотвращать развитие микроорганизмов впрепаратах при их хранении. В частности, Европейская Фармакопея в общей81фармакопейной статье «Nasal Preparations» выдвигает требование, в соответствиис которым при разработке назальных лекарственных средств, в состав которыхвходят антимикробные консерванты, уполномоченному органу должны бытьпредставленыданные, которые подтверждаютэффективность выбранныхконсервантов [64].Испытания эффективности антимикробного консервирующего действиявсегданеобходимопроводитьприразработкенестерильныхжидкихлекарственных средств (особенно тех, в состав которых входит вода), посколькуэффективность антимикробного консерванта может ослабляться в результате еговзаимодействия с лекарственными и другими вспомогательными веществами, атакже с первичными упаковочными материалами [62].

Поэтому на стадииразработки жидкого лекарственного средства необходимо выбрать подходящиедля конкретного препарата концентрации и комбинации консервантов иубедиться, что антимикробная активность исследуемого препарата обеспечиваетнадлежащую защиту от нежелательных эффектов, которые могут бытьрезультатомизбыточногомикробногозагрязненияилиразмножениямикроорганизмов на этапах его хранения и использования.3.5.1Результатыисследованияэффективностиантимикробногодействия консервантов в составе назального спрея налоксонаМетод испытания эффективности антимикробных консервантов и критерииих пригодности изложены в общей статье 5.1.3 «Efficacy of antimicrobialpreservation» Европейской Фармакопеи 7.0 и в ОФС 1.2.4.0011.15 «Определениеэффективности антимикробных консервантов лекарственных средств» ГФ XIII.Критериемоценкиэффективностиантимикробногоконсервантаслужитуменьшение числа жизнеспособных клеток микроорганизмов в препарате заопределенный период времени после его инокуляции.

Критерии оценки зависятот требуемой степени защиты лекарственных средств и приведены в общей статье5.1.3 EPh 7.0 и в ОФС 1.2.4.0011.15.82По требованиям ГФ ХІIІ в нестерильных препаратах для введения в полостьноса логарифм снижения числа жизнеспособных клеток бактерий через 14 сутокдолжен составлять не менее 2, с 14 до 28 сутки число бактерий не должноувеличиваться.

Число жизнеспособных клеток грибов не должно увеличиватьсячерез 14 и 28 суток по сравнению с исходным уровнем (критерий 2).Эффективности антимикробного консервирующего действия изучали наобразцах лабораторной серии препарата налоксон спрей назальный, по методике,описанной в главе 2 «Материалы и методы».Дляисследованияэффективностиантимикробногоконсервирующегодействия по требованиям соответствующего руководства по качеству [62]приготовленалабораторнаясерияпрепарата,вкоторойконцентрацияпропиленгликоля была на нижнем пределе, установленном в спецификации втечение срока хранения, то есть 9,5 % (табл. 3.10).

Такой подход к изучениюэффективности антимикробных консервантов соответствует нормам, принятым вЕвропейском Союзе [62].Таблица 3.10 Исследуемый состав назального спрея налоксонаКомпонентыКоличество (г) на 100,0 граствораНалоксона гидрохлорид1,2*Пропиленгликоль9,5Макрогол (ПЭГ) 40010,0Полоксамер 4071,0Кислота лимонная0,03Воды очищеннойдо 100,0* - в пересчете на чистое вещество83Таблица 3.11 Эффективность антимикробного действия препарата налоксон спрейназальный при концентрации пропиленгликоля 9,5%ЭкспозицияТребования ГФ XIII(категория 2)ЧислоЧислобактерийгрибовКОЕ/г,КОЕ/г,loglogснижения снижения1105 –1106ИсходнаянагрузкаИсходныйвысев─2 сут─Число микроорганизмов, КОЕ/г (log снижения)S. aureusATCC6538-PE. coliATCC25922P.aeruginosaATCC9027C.

albicansNCTC885-6531105 –11061,171059,051058,501051,05108,35105(0,03)9,15104(0,97)7,4010─9,65105(0,08)─НОНО54(0,15)НОA. nigerАТСС164045,451055,40105(0,004)НО4,35105(0,10)3,75105(0,16)7 сут──НОНОНОНО14 сут2НУНОНОНОНО28 сутНУНУНОНОНОНО2,90105(0,27)2,10105(0,41)НО – жизнеспособные клетки тест-микроорганизмов не обнаружены (менее5 КОЕ/г для S. aureus, P.

aeruginosa, E. coli, C. аlbicans и менее 10 КОЕ/г для A. niger);НУ – число жизнеспособных клеток тест-микроорганизмов не увеличивается.Результаты изучения эффективности антимикробного действия консервантав разработанном препарате, приведенные в табл. 3.11, показали, что в образцахпрепаратапослеинокуляциинаблюдаетсябыстраягибельбактерийидрожжеподобных грибов, т.е.

консервант в составе препарата налоксон спрейназальный обладает высокой эффективностью антимикробного консервирующегодействиявотношениибактерийидрожжеподобныхгрибов,котораясоответствует требованиям ГФ РФ ХІIІ изд.; через 14 суток после инокуляции ипри последующем высеве жизнеспособные клетки этих тест-микроорганизмов небыли обнаружены.В отношении плесневых грибов эффективность антимикробного действия84консерванта в составе препарата налоксон спрей назальный также соответствуеттребованиям ГФ РФ ХІІI изд., так как через 14 суток и 28 суток после инокуляции ненаблюдалось увеличения числа жизнеспособных клеток A.

niger по сравнению сисходнойнагрузкой.Однакоантимикробноеконсервирующеедействиевотношении A. niger оказывается менее эффективным, поскольку логарифм снижениячисла жизнеспособных клеток A. niger через 14 и 28 суток составил всего 0,27 и 0,41соответственно.Количество клеток дрожжевых и плесневых грибов не увеличивалось напротяжении всего срока исследования.Эффективностьантимикробногодействия(присодержаниипропиленгликоля на нижнем пределе 9,5 % в препарате налоксон спрейназальный) соответствует требованиям ГФ XIII изд. (категория 2). Надлежащаяэффективность антимикробного консервирующего действия позволяет сохранятьпрепарату налоксон спрей назальный требуемую микробиологическую чистотукак после изготовления, так и при хранении в течение всего срока годности.3.5.2 Оценка микробиологической чистоты назального спрея налоксонаПрепаратналоксонспрейназальныйотноситсякпрепаратам,предназначенным для введения в полость носа.

Поэтому в соответствии стребованиями ГФ XIII этот препарат относится к категории 2 и в отношениимикробиологической чистоты к нему предъявляют следующие требования [4]:– общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) – не более 102 в 1 г;– не более 101 энтеробактерий и других грамотрицательных бактерий в 1 г;– отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 1 г:– отсутствие Staphylococcus aureus в 1 г.Методикаопределениямикробиологическойчистоты,покоторойпроводили определение, представлена в главе 2 «Материалы и методы».Перед испытанием на микробиологическую чистоту, во избежаниенеправильной оценки полученных результатов, предварительно необходимоопределить возможность проявления лекарственным средством антимикробного85действия.Дляэтогомысравнивалиинтенсивностьростатест-штамовмикроорганизмов на средах в присутствии и без испытуемого препарата.Исследования последовательных разведений не проводили, так как первоеразведение препарата 1:10 показало рост тест-микроорганизмов, аналогичногоконтрольным образцам, т.е данное разведение устранило антимикробное действиеисследуемого препарата.Проверку пригодности разработанной методики проводили по ОФС1.2.4.0002.15«Микробиологическаячистота».Результатыпроверкипредставленные в таблице 3.8, показали, что разработанная методика испытанияпозволяет нейтрализовать антимикробное действие консерванта назального спреяналокcона в условиях испытания на микробиологическую чистоту.Таблица3.8Результатыпроверкипригодностиметодикииспытаниямикробиологической чистоты препарата налоксон спрей назальныйC.

albicans NТСС 885-653(агар Сабуро с глюкозой иантибиотиком, среда № 2)A. niger АТСС 16404(агар Сабуро с глюкозой иантибиотиком, среда № 2)P.aeruginosa ATCC 9027(бульон Мосселя, среда № 3,среда № 8, соево-казеиновый бульон)S. aureus ATCC 6538-P(соево-казеиновый бульон, среда № 8)E. coli ATCC 25922(бульон Мосселя, среда № 3)Salmonella tуphimurium 55(бульон Мосселя, среда № 3)Образецпрепарата (вразбавлении1:10,инокулированный м/о)Контроль(разбавительинокулированный м/о)B. cereus ATCC 10702(среда № 1, соево-казеиновый агар)Наличие роста тест-микроорганизмов на питательных средах++++++++++++++++++++++++++++86В соответствии с разработанными методиками контроля, проведеноиспытание микробиологической чистоты препарата налоксон спрей назальный(табл. 3.9).Таблица 3.9 Текущие результаты испытаний микробиологической чистотыпрепарата налоксон спрей назальныйНомерсерииАэробных бактерий игрибов (суммарно)бактегрибоврийКоличество в 1 г препарата (КОЕ/мл):Энтеробактерий идругихS.

aureusграмотрицательныхбактерийНормыНе более 102Не более 101НД010212менее 10менее 10НО020212менее 10менее 10НО030212менее 10менее 10НОПримечание: НО – не обнаружено.P. aeruginosaНе допускаетсяНОНОНОНОНОНОКак видно из данных, представленных в таблице 3.9, препарат послеприготовления по микробиологической чистоте соответствует требованиямпроекта НД и ОФС.1.2.4.0002.15 ГФ РФ XIII издания.3.5.3 Определение плотности раствора налоксонаТочное значение плотности раствора налоксона играет важную роль прифасовке готового раствора в баллоны, так как дозирование происходит по объему,который меняется в зависимости от температуры. Методика определенияплотности модельного раствора налоксона, с разработанным составом, описана вглаве 2.

Была изучена зависимость плотности раствора от температуры.Результаты исследований представлены в таблице 3.10 и на рисунке 3.9.Таблица 3.10 Зависимость плотности (ρ) раствора налоксона гидрохлорида оттемпературыТемпература,оС10ρ1, г/см3ρ2, г/см3ρ3, г/см3ρср, г/см3ρ*, %1,031621,031581,031571,03159+0,33187Плотность, г/см 3151,029861,029881,029911,02988+0,164201,028171,028181,028211,028190251,026251,026281,026291,02627–0,187301,024711,024741,024751,02473–0,337Примечание. ρ – изменение плотности (в %) по отношению к плотности при температуре 20оСс увеличением или уменьшением температуры1,0321,0311,031,0291,0281,0271,0261,0251,0241012141618202224262830Температура, оСРисунок 3.9 Зависимость плотности раствора налоксона гидрохлорида оттемпературыКак видно из данных, представленных в таблице 3.12 и на рисунке 3.9, сувеличением температуры от 10оС до 30оС плотность линейно уменьшается.Плотность раствора налоксона гидрохлорида при температуре 20оС составляетоколо 1,028 г/см3.Если в ходе технологического процесса дозирование препарата в баллоныпредусмотрено осуществлять при температуре 20оС, то дозирующий цилиндр длядозирования 10,0 г препарата должен быть выставлен на объем 9,7258 мл.

Характеристики

Список файлов диссертации