Диссертация (1141365), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Результаты испытания воспроизводимости и статистическиеданные представлены в таблице 2.7.Таблица 2.7.Результаты испытания воспроизводимости методикиЯМР-спектрометрJeol JNM-ECA 600Jeol JNM-ECS 400СодеражаниеИДН в %,0,500,49Среднее содержание ИДН в %0,495Стандартное отклонение ИДН, S, %Относительное стандартноеотклонение ИДН, Sr, %Приемлемость результатов дляИДН, уд/неуд0,0071,4Удовлетворяет требованиямРезультаты проведённых всех вышеуказанных тестов позволяют подтвердитьдостоверность данной методики.2.3. Определение физико-химических и структурно-механических свойствмягких лекарственных форм с ИДНИзучение растворимости ИДНИзучение растворимости активной фармацевтической субстанции проводилипо методике ГФ XIII, ОФС 1.2.1.0005.15.
В качестве растворителей использовалиразные полярные и не полярные растворители с учетом каждой лекарственнойформы. Для получения геля, изучение растворимости ИДН проводили в воде51очищенной,спиртеполиэтиленгликоле-400этиловомразных(ПЭГ-400),концентраций,глицерине,диметилсульфоксиде(ДМСО),пропиленгликоле (ПГ) и так же в смеси некоторых из этих растворителей.Результаты изучения растворимости ИДН в полярных растворителях приведены вглаве 3 .Для получения крема, использовали следующие неполярные растворители:вазелиновое масло, касторовое масло и оливковое масло. Результаты изученияИДН в неполярных растворителях приведены в главе 4.Изучение реологических свойств упруго-вязкопластичных системОпределение реологических и структурно-механических свойств мягкихлекарственных форм при их разработке является значимым этапом, так как, этисвойства существенно влияют на технологичность в процессе получения,фасовки, применения и высвобождение действующего вещества [9, 87, 91].Изучениеструктурно-механическихсвойствразработанныхмягкихлекарственных форм проводили на вискозиметре Брукфильда RVDV (SSA№ 21),на базе института пластмасс имени Г.С.
Петрова.Испытания проводили при последовательном повышении скорости сдвига, споследующим последовательным понижением скорости сдвига до исходнойвязкости. Результаты этого изучения приведены в главах 3 и 4.Изучение высвобождения ИДН из лекарственных формДля изучения высвобождения ИДН из основ геля и крема в опытах in vitroбыл использован метод Крувчинского (метод равновесного диализа черезполупроницаемую мембрану) [55, 57]. Для этой цели использовали прибор,который состоял из наружного сосуда, внутри которого была диализная среда, иполого цилиндра.
Дном данного цилиндра служила полупроницаемая мембрана сразмером пор 12-14 кДа и площадью 6 см2. Навеску (1,0 г) исследуемых образцовравномернымслоемнаносилинавнутреннююповерхностьмембраны.Исследование проводили при температуре диализной среды равной 37 0С. Объемсреды составил 50 мл.
Пробы отбирали через определённые промежутки времени.52В качестве диализной среды использовали воду очищенную. Результаты данногоисследования представлены в главах 3 и 4.Микроскопическое изучение субстанции и лекарственных формМикроскопическое исследование проводилось с целью подтверждениярастворения субстанции в основах геля и крема и для подтверждениягомогенности лекарственных форм.Изучение проводили с помощью микроскопа «Ломо, МИКМЕД – 1» собъективами 9; 10; 40; окуляром 10х и бинокулярной насадкой 2,5х.МикропрепаратсубстанцииготовилисогласноОФС.1.2.1.0009.15«Оптическая микроскопия».
Порошок с помощью шпателя помещали напредметное стекло в каплю раствора глицерин-вода (1:1), накрывали покровнымстеклом.Для приготовления микропрепаратов геля, образец наносили на предметноестекло и накрывали покровным. Микропрепараты крема готовили двумяспособами: первый способ аналогичен приготовлению препаратов геля, второйспособ заключался в разбавлении образцов. Для этого на предметное стеклонаносили каплю дистиллированной воды, в нее помещали каплю образца ипрепаровальной иглой смешивали крем с водой, затем накрывали покровнымстеклом.
Такая пробоподготовка позволила рассмотреть микроструктуру крема.Микрофотосъемку выполняли с помощью цифрового фотоаппарата Pentax OptioA30 на микроскопе с различными объективами. Фотографии обрабатывали впрограмме Photoshop CS3. Результаты исследования представлены в главе 3 и 4.Определение рН 10 % водной дисперсии геля и кремаЗначение рН 10% водных извлечений из геля и крема с ИДН определялипотенциометрически на pH-метре «Mettler Toledo» S 80-К в соответствии с53требованиямиГФХIII,ОФС.1.2.1.0004.15«Ионометрия,пункт3-Потенциометрическое определение рН».2.4. Микробиологическое исследование лекарственных формОдним из основных критериев, которые определяют стабильность икачестволекарственных препаратов является микробиологическая чистота.Исследование микробиологической чистоты проводили по ГФ XIII, ОФС1.2.4.0002.15 «Микробиологическая чистота.Для геля и крема использовали требования категории 2: в 1 г препаратадопускается не более 100 аэробных бактерий, дрожжевых и плесневых грибовсуммарно, при отсутствии Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus.Результаты данного изучения представлены в главах 3и 4.2.5.
Изучение стабильности лекарственных формПроцессы, которые происходят в процессе хранения лекарственныхпрепаратов, могут сопровождаться изменением физических свойств, химическогосостава и частичной или полной потерей их фармакологического действия.Исходя из этого, изучение стабильности лекарственных препаратов при храненииявляется обязательным требованием при их разработке 46, 55].Исследования стабильности геля ИДН 0,5% и крема ИДН 0,5% в процессехранения проводились по следующим показателям:•внешний вид;• подлинность;• рН водного извлечения;• вязкость;• количественное содержание;• масса содержимого упаковки;54• микробиологическая чистота.Результаты данных исследований представлены в главах 3 и 4, соответственно.2.6. Изучение биологических свойств геля и крема ИДНБиологические исследования по оценке безопасности при местномиспользовании и заживляющего действия готовых препаратов «гель ИДН 0,5%»и «крем ИДН 0,5%»исследованийЦКПпроведены в Центре доклинических и клинических(НОЦ)РУДН.БлагодаримДиректораЦентрадиагностических исследований ЦКП(НОЦ) РУДН, канд.
ветер.наук, доцентаКарамян А.С. за помощь и содействие.Исследования выполнялись согласно Правилам лабораторной практики вРоссийской Федерации (Приказ Министерства здравоохранения и социальногоразвития Российской Федерации № 708н от 23.08.2010, Национальный стандартРоссийскойФедерацииГОСТР-53434-2009«Принципынадлежащейлабораторной практики» (GLP) и «Руководству по проведению доклиническихисследований лекарственных средств. Часть 1,2012 г.».Эксперименты выполнялись на животных (крысы с массой180-200 г.)поступивших из питомника «Кролинфо».2.6.1. Исследование биологической безвредности на отсутствие местнораздражающего действияДляисследованияместно-раздражающегодействияразработанныхлекарственных форм, животные были разделены на 4 группы, каждая группасостояла из 10 животных (самки и самцы). Животные распределялись по группамслучайным образом методом рандомизации.
В качестве критериев приемлемостирандомизациисчиталиотсутствиевнешнихгомогенность групп по весу тела (± 20%).признаковзаболеванийи55С целью данного изучения, разработанные препараты и препараты сравнения(плацебо-основа) наносили на слизистую прямой кишки животных. Для первойгруппы был использован препарат «ИДН гель 0,5%», для второй группы «ИДНкрем 0,5%», для третей группы «Плацебо-гель» и для четвертой «Плацебо-крем».Составы препаратов сравнения (плацебо) представлены в таблице 2.8.Таблица 2.8.Составы препаратов сравнения (плацебо)КомпонентыАресполТЭАПЭГ-400СЭ 95%Касторовое маслоТвин-80НипагинНипазолВОСодержание,%Основа геляОснова крема1,01,01,0 (до pH 6,5-7,5)1(до pH 6,5 – 7,5)50,010,0201,00,150,05до 100,0до 100,0Животных перед экспериментом и перед каждым нанесением обследовали длявыявления раздражений, гиперемий, возможных повреждений тела: наличияопухолей, инфильтрации, кожных инфекций и т.д.Результаты данного изучения представлены в главе 4.2.6.2.
Изучение специфической активности заживляющего действиялекарственных формИзучениезаживляющего действия разработанных лекарственныхформпроводилось на патологической модели повреждений слизистой прямой кишкисо сформированной анальной трещиной у лабораторных животных. Созданиетравматической модели анальной трещины осуществляется следующим образом:по задней стенке анального канала в области перехода кожи в анодерму вподслизистую оболочку анального канала вводится 0,7 мл раствора, состоящий изсмеси: 2 частей скипидара и 1 части 2% раствора новокаина. Образованный вдоль56анального канала инфильтрат прошивают шелком стежком длиной 10 мм иглубиной 2-3 мм до внутреннего сфинктера. Концы нитей плотно завязывают дляпрорезывания тканей.
Дополнительно под шов на глубину 0,5- 0,7 мм вводится0,3-0,4 мл смеси раствора скипидара с новокаином. Лигатура в течение двухнедель прорезывается и формируется продольная язва анального канала; дно икрая которого представлены фиброзной тканью.Для изучения специфической активности геля и крема, животные былиразделены на несколько групп (таблица 2.9.).Таблица 2.9.Изучение специфической активности геля и крема ИДН на животных(n=10)№группыЖивотные1Крысы(самцысамки),группаконтроляКрысы(самцы-самки)Крысы(самцы-самки)Крысы(самцысамки)Крысы(самцысамки)2345Доза «ИДНгель 0,5%»0,01гДозаДоза «ИДН Доза«Плацебо крем 0,5%» «Плацебо-гель»-крем»---0,01г-------0,01г-0,01гГель и крем ИДН наносились на повреждённую слизистую прямой кишки висходном состоянии, дополнительная подготовка препаратов для применения(разведения, смешивания или разбавления физиологическим раствором)неиспользовалась.Заживление анальных трещин у крыс из разных групп оценивалипатоморфологически.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
