Диссертация (1141299), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Однако данный способ имеет нескольконедостатков:увеличениевременипроведенияанализаинеобходимостьиспользования едкого и опасного реагента, при этом в процессе кипячения сырьянаблюдается деформация диагностически значимых элементов.108Учитывая способность антоцианов растворяться в воде, на следующем этапеисследований изучалась возможность использования данного растворителя дляпросветления плодов аронии. Полученные данные представлены на рис.
27:АБВРис.27. Высушенные плоды Рябины черноплодной. Поперечный срез плодапосле многократной экстракции водой. А - простой одноклеточный волосок(х400); Б - каменистые клетки (х400); В – мякоть (х400)Представленные фотоснимки говорят о том, что часть антоцианов все жеостается в сырье после многократной экстракции водой.По данным литературных источников лучшим просветляющим реагентом ванализе подобных окрашенных объектов считается хлоралгидрат.109В связи с этим на заключительном этапе исследования плоды аронии,предварительно обработанные водой, помещали на сутки в раствор хлоралгидратаи затем анализировали.
Полученные результаты представлены на рис. 28:АБРис. 28. Высушенные плоды Рябины черноплодной. Поперечный срез плодапосле обработки хлоралгидратом. А - простой одноклеточный волосок (х100); Б каменистые клетки в мякоти плода (х100)Анализируяполученныеданные,можносделатьвыводотом,чтопредварительная экстракция водой обеспечивает наиболее полное удалениеантоциановыхсоединенийизанализируемогообъекта,апоследующеезамачивание в растворе хлоралгидрата дает более четкое представление оанатомо-диагностических признаках без их повреждения [104].На следующем этапе представилось интересным изучение изменчивостимикродиагностических особенностей плодов рябины черноплодной в зависимостиот сорта и места ее произрастания.Объектами исследования служили образцы высушенных плодов рябинычерноплодной, заготовленных на территории Воронежской области, Алтайскогокрая, республики Адыгея и Калининградской области в период сентябрь - октябрь2014г.Начальным этапом определения подлинности любого вида растительного сырьяявляется изучение его внешних характеристик.110Плоды сорта «Мичуринская» диаметром до 7 мм, бесформенные, сильносморщенные, шаровидные, сплюснутые на верхушке.
Плодолистики внутри плодаобразуют 5 гнезд, в которых расположены семена. Мякоть образована сильноразросшимся гипантием, на верхушке имеются малозаметные чашелистики, подними, внутри плода, заметно скопление большого числа волосков, похожее напаутину. Семена в очертании удлиненно обратнояйцевидные, красноватокоричневые, до 3 мм длиной. Плоды черного цвета. Запах слабый. Вкус водногоизвлечения кисловато-сладкий, вяжущий.Отличительной чертой сорта «Алтайская крупноплодная» являлась матовостьплодов и более темная, фиолетового оттенка мякоть.Плоды сорта «Вениса» отличались более крупными размерами, а также болеевыраженным опушением.Сорт «Викинг» представлен плодами плоскоокруглыми, сплюснутыми с боков,мякоть красноватая.Внастоящеевремяотсутствуетанатомических признаков плодов арониисвязисэтим,представилосьинформация,касающаясяизученияразной сортовой принадлежности, винтереснымпроведениесравнительногомикроскопического анализа данных объектов.
Для проведения экспериментасырье подвергали сверхтонкому измельчению.В результате проведенной нами ранее работы по поиску оптимального способаподготовки плодов аронии к микроскопическому анализу, было показано, чтонаиболее оптимальным является многократная экстракция плодов водой споследующим выдерживанием в хлоралгидрате. При использовании данногоспособа пробоподготовки обеспечивается максимальное обесцвечивание сырья.На основании проведенного микроскопического анализа было установлено, чтовсе исследуемые объекты имеют сходное анатомическое строение, но для нихможно отметить и ряд отличительных признаков (рис.29 – 32, табл.26).Клетки эпидермиса аронии сорта «Мичуринская» крупные, многоугольные,почти правильной формы, в поле зрения микроскопа имеются длинные111тонкостенныеодноклеточныеволоски.Мякотьпослепроведенияпробоподготовки желтовато – бурого цвета, в клетках имеется большоеколичество друз оксалата кальция и редкие призматические кристаллы.Каменистые клетки встречаются группами и одиночно, имеют вытянутую илиокруглую формы.
Полученные данные представлены на рис.29:Рис.29. Анатомические признаки плодов аронии сорта «Мичуринская»Отличительной особенностью сорта «Алтайская крупноплодная» являетсяналичие меньшего количества волосков, мякоть темно – бурого цвета,монокристаллы отсутствуют. Полученные данные представлены на рис.30:112Рис.30.Анатомическиепризнакиплодоварониисорта«Алтайскаякрупноплодная»Сорт «Вениса» имеет своей особенностью присутствие большого количестваволосков, которые намного длиннее, чем у остальных сортов, мякоть фиолетовокрасная, друзы крупные, многочисленные, отчетливо видны монокристаллы.Полученные данные представлены на рис.31:113Рис.31.
Анатомические признаки плодов аронии сорта «Вениса»Плоды аронии сорта «Викинг» имеют довольно крупные клетки эпидермиса,мякоть фиолетовая, имеется большое количество мелких друз оксалата кальция,редкие монокристаллы, каменистые клетки крупные, вытянутые. Полученныеданные представлены на рис.32:Рис.32. Анатомические признаки плодов аронии сорта «Викинг»Полученные результаты приведены в таблице 26:Таблица 26.
Сравнительная характеристика микродиагностическихособенностей плодов аронии различных сортов114Сорта аронии черноплоднойИсследуемый«Алтайскаяпризнак«Мичуринская»Клетки4.6х1.75мкм4.9х1.96мкм8.82х8.82 мкм117.6х2.94 мкмДрузы11.76 мкм11.76 мкм12.74мкмМонокристаллы4.3х8.7 мкм-4.9х9.8 мкмКаменистые13.72х4.9,13.72х8.82 мкмклетки14.54х11.78 мкм«Вениса»крупноплодная»«Викинг»8.82х8.822.94х2.98мкммкмэпидермисаОдноклеточные176.4х3.92107.8х1.96мкммкмволоски0.98-8.82мкм3.7х8.5мкм13.72х8.8215.68х5.88мкммкмТаким образом, наблюдается вариабельность практически всех исследуемыхмикродиагностических признаков в зависимости от сорта и места произрастаниярастения.6.3.
Определение некоторых числовых показателей сырья РябинычерноплоднойОпределение влажности, общей золы проводили по ГФ XI (ГФ XIII) издания,вып.1.Определениесодержанияэкстрактивныхвеществвплодахрябинычерноплодной проводили по методике ГФ XI, вып. 1 (ГФ XIII) [60,19]. В качестверастворителейиспользоваливода,водно-спиртовыесмесисразличнойконцентрацией (40%, 60%, 70%, 95%), а также водно-спиртовые смеси тех жеконцентраций с добавкой кислоты хлороводородной до содержания 1%.Полученные результаты представлены в таблице 27:115Таблица 27. Содержание экстрактивных веществ в высушенных плодах рябинычерноплодной различных сортов.Содержание экстрактивных веществ, %СортЭкстрагентСорт«Мичуринская» «Викинг»,СортСорт«Алтайская«Вениса»крупноплодна»Калинин-АлтайскийградскаякрайобластьВоронежскаяРеспубликаобластьАдыгея,Этанол 40 %49,20±0,06221,10±0,0128,71±0,01230,53±0,073Этанол 60 %46,69±0,01720,90±0,01429,28±0,01131,84±0,013Этанол 70 %38,27±0,04320,55±0,01626,99±0,02332,48±0,062Этанол 95 %33,3±0,01118,11±0,08616,82±0,02128,31±0,013H2 O35,69±0,05018,62±0,03923,73±0,05330,00±0,004Этанол 40 % (к)36,2±0,02821,12±0,02466,9±0,03136,83±0,011Этанол 60 % (к)32,91±0,01129,59±0,02429,45±0,01235,04±0,069Этанол 70 % (к)31,55±0,04029,24±0,01126,93±0,02033,77±0,012Этанол 95 % (к)22,95±0,06225,03±0,05523,13±0,05134,22±0,051Н2О(к)29,31±0,01227,81±0,01016,14±0,09136,07±0,013Примечание: (к) обозначает, что для извлечения использовали экстрагент,подкисленный кислотой хлороводородной до концентрации 1%.Анализ данных таблицы 27 показывает, что все исследуемые экстрагентыизвлекают достаточно большое количество экстрактивных веществ из плодоваронии всех сортов.
Максимальной извлекающей способностью при работе ссортом «Мичуринская» обладают водно-спиртовые смеси с концентрацией спиртаэтилового 40%, нейтральные и подкисленные. Для остальных сортов подобнаязакономерность не просматривается. Анализируя весь массив данных, можноотметить, что наибольшее количество экстрактивных веществ извлекаетсяэтанолом в концентрации 40 -70 %. Подкисление этанола позволяет вбольшинстве случаев несколько повысить его извлекающую способность.116Минимальное количество экстрактивных веществ извлекается менее полярнымэкстрагентом – этанолом 95 %, хотя отличия не слишком велики. Использование вкачестве экстрагента воды так же возможно, т.к.