Диссертация (1141267), страница 16
Текст из файла (страница 16)
Методики описаны в глава 2.2.5,На первом этапе были изучены оптимальные условия экстракции полученные результаты представлены в табл.20.100Таблица 20Зависимость извлечения суммы фруктозанов и фруктозидовиз свежих клубней топинамбура от условий экстракций (n=5)Наименование исследуемыхпоказателейСодержание фруктозанов и фруктозидов, %Партия 1Партия 2Партия 3Измельченность сырья, мм711,92±0,3510,94±0,3212,14±0,36518,32±0,5418,45±0,5518,49±0,55318,43±0,5518,47±0,5519,01±0,57Тип экстрагента70 % этанол7,14±0,226,29±0,187,11±0,2125 % этанол16,21±0,4815,41±0,4616,17±0,48Вода18,24±0,5418,27±0,5418,33±0,54Соотношение сырья и экстрагента1:5012,10±0,3611,14±0,3312,17±0,361:20018,25±0,5418,37±0,5517,98±0,531:25016,97±0,5016,79±0,5016,33±0,48Температурный режимБез нагревания10,40±0,3111,01±0,3310,54±0,310Водяная баня, 50 С14,16±0,4213,93±0,4114,17±0,42Водяная баня, 100 0С18,54±0,5518,92±0,5619,04±0,57Время экстракции, мин3015,11±0,4514,13±0,4216,07±0,486017,42±0,5216,93±0,5017,93±0,539018,27±0,5418,95±0,5619,07±0,57Кратность экстракцииОднократная реакция12,71±0,3811,93±0,3513,03±0,39Двукратная реакция15,42±0,4615,57±0,4615,71±0,47Трехкратная реакция18,37±0,5518,91±0,5619,84±0,59Четырехкратная реакция18,30±0,5418,90±0,5619,85±0,59Из табл.20 следует оптимальными условиями экстракции фруктозанов ифруктозидов являются: экстрагент – вода, соотношение сырья и экстрагента1:200, измельченность сырья 5 мм, на кипящей водяной бане, времянагревания 90 мин, при использовании режима трехкратной экстракции.Полученные результаты были использованы при создании методикиколичественного определения суммы фруктозанов и фруктозидов в сухихклубняхтопинамбура,описаннойвглава2.2.5,Метрологическаяхарактеристика разработанной методики представлена в табл.21.101Таблица 21Метрологическая характеристика методики количественногооределения суммы фруктозанов и фруктозидов в клубняхтопинамбура cвежегоFX¯, гSx¯P,%T(p,f)918,430,335952,26A %4,01¯0,757Как показывают результаты табл.21.
ошибка единичного определенияпри доверительной вероятности 0,95 не превышает 4,5%. Отсутствиесистематической ошибки доказано методом добавок (табл.22).Таблица 22Результаты количественного определения суммы фруктозанов ифруктозидов в клубнях топинамбура с использованием способадобавок инулина(n=5)Найдена суммафруктозанов ифруктозидов,г/100 г сырья18,4319,0420,12Введеноинулина г/100г сырья13,829,525,03Должна быть найденасумма фруктозанов ифруктозидов, г/100 гсырья32,2523,5625,15Найдена суммафруктозанов ифруктозидов,г/100 г сырья31,1527,6526,07Относительнаяошибка, %- 3,3- 3,2+ 3,6Из табллицы.22, видно, что систематическая ошибка отсутствует, т.к.относительная ошибка метода добавок меньше относительной ошибкиединичного определения.
На основании полученных данных установленонормативное содержание суммы фруктозанов и фруктозидов в свежихклубнях топинамбура на уровне – не менее 10%.Показатели и нормы качества для сырья «Свежие клубни топинамбура»представлены в таблице 23.102Таблица 23Показатели и нормы качества сырья «Свежие клубни топинамбура»ПоказателькачестваВнешниепризнакиМетоды испытанияРегламентируемый параметрОрганолептическийЦельные или разрезанные накуски клубни, преобладающиегрушевидной формы, могутбыть продолговато – овальные,веретеновидные, клубни снеровной поверхностью,обусловленной очень большимналичием деток (наростов)По всей поверхностипоперечного среза встречаютсясекреторные каналы и инулина.Должно наблюдаться красно–фиолетовое или оранжево–красноеокрашивание(полисахариды)1 зоны адсорбции красно –оранжевого цвета с Rf 0,62,соответствующий инулину и0,68,соответствующийфруктозеМикроскопияст.
ГФ XI, вып. 1Качественные На поперечный срез 2 – 3 капель 20 %Реакцииспиртового раствора α–нафтола илитимола и 1 каплю разведенной сернойкислотыПодлинность Качественные реакции-методом ТСХ система растворителей: изопропанол –вода(4:1).Проявитель:20%спиртовый раствор тимола и кислотысерной разведеннойКоличественноеопределениеЧисловыепоказателиТяжелыеметаллыРадионуклидыМикробиологическаячистотаУпаковкаМаркировкаХранениеСрокгодностиСумма фруктозанов и фруктозидов вСодержание фруктозанов исвежим сырье в пересчете на инулин. – фруктозидов, не менее 10%.метод спектрофотометрФруктозанов и фруктозидов не менее 10%, влажность не менее 70 %,золы общей не более 15%, золы нерастворимой в 10% растворе кислотыхлористоводородной не более 6,0%, органические примеси не более1,0%, минеральные примеси не более 1,0%ОФС 42-0059-07Не более 0,01%Должны выдерживать требования ОФС 42-0011-03 «Определениесодержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье илекарственных растительных препаратов»ОФС 42-0067-07Категория 3АВ соответствии с ГОСТ 17768-90.
В ящики с отверстиями в боковыхстенках и крышках по 0,5 кг неттоМаркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192-96.Продукция прошла радиологический контроль Сан ПиН 2.3.2560 -96Cырье подлежит переработке в течение 24 часов с момента сбора24 часа с момента сбора.Результаты по хранению свежего сырья топинамбура представлены в табл.24.103Таблица 24Показатели качества свежих клубней топинамбура в процессе хранения (n=5)№1234Наименованиепоказателейкачества и нормыпо проекту ФССодержаниефруктозанов ифруктозидов, неменее 10,0%Влажность, неменее 70,0%Зола общая, неболее 15,0%Зола нерастворимаяв 10% раствореHCl не более 6,0%№образцаВ моментзаготовки,%Хранение часы612182412313,23±0,5515,04±0,5713,23±0,55 13,23±0,56 13,23±0,50 13,20±0,4915,01±0,52 15,00±0,57 15,00±0,47 15,05±0,4920,12±0,5920,10±0,61 20,11±0,59 20,12±0,59 20,10±0,4812312312378,35±1,5671,52±1,4579,27±1,589,20±0,1813,19±0,2614,30±0,280,89±0,175,75±0,303,45±0,1478,37±1,5671,53±1,3579,30±1,489,14±0,5813,10±0,3814,30±0,280,85±0,185,71±0,313,36±0,1178,35±1,4671,51±1,4179,29±1,519,07±0,5313,11±0,2214,25±0,580,85±0,195,70±0,303,38±0,1578,30±1,6671,53±1,4579,31±1,589,06±0,4813,09±0,2514,23±0,680,87±0,175,73±0,293,41±0,1478,33±1,4571,50±1,3979,22±1,569,12±0,5713,10±0,5814,27±0,530,89±0,105,71±0,303,37±0,12Примечание.
1.Сырье хранилось в условиях и упаковкепредусмотренных проектом ФС.2.Показатели«Внешниепризнаки»,«Органические»и«Минеральные»признаки в процессе хранения неизменились.На основании полученных данных рекомендуем срок годности 24 часа.4.2. Получение гомеопатической матричной настойкиВ зарубежной нормативной документации настойка из свежих клубнейтопинамбура представлена в Германской гомеопатической фармакопее.Клубни топинамбура входят в перечень гомеопатических лекарственныхсредств, разрешенных к применению в России в соответствии с приложениемк приказу МЗ РФ № 335 от 29.11.95 г.В зарубежных странах разработаны лекарственные средства из клубнейтопинамбура, которые широко используются в аллопатии и гомеопатии дляснижения сахара в крови [11,48,60,155].Проект фармакопейной статья (Настойка гомеопатическая матричная)подготовлен в соответствии с требованиями ОФС 42-0027-05 «Настойки104гомеопатические матричные».
При подготовке проекта учтены требованияГерманской Фармакопеи Фармакопейного комитета к гомеопатическимлекарственным средствам. В проект фармакопейная статья включеныследующие разделы: «Получение», «Описание», «Подлинность», «Сухойостаток»,«Плотность»,«Тяжелыеметаллы»,«Микробиологическаячистота», «Количественное определение», «Хранение», «Срок годности».Данные представлены в таблице 28.Настойку гомеопатическую матричную готовили из свежих клубнейтопинамбура по методу 2 ОФС 42-0027-05 «Настойки гомеопатическиематричные» способом мацерации с 86% (по массе) спирт этиловый.Лекарственноерастительноесырьетщательноизмельчали,измельченную массу взвешивали и немедленно заливали не менее чемполовины от массы сырья количеством 86% спирт этиловый (по массе)тщательно перемешивали и оставляли в темном закрытом сосуде притемпературе не выше 20 0С.По формуле рассчитывали необходимое для растительной массыколичество 86% спирт этиловым (по массе) в килограммах (Е2).E2 m W; где100m – масса растительного сырья;W – влажность сырья, процентах.От рассчитанного количества 86% спирт этиловым (Е2) вычитали ранеедобавленного спирт этилового и добавляли остаточное количество 86% спиртэтиловым.
Массу оставляли не менее чем на 10 суток при температуре невыше 200С при периодическом встряхивании. Затем фильтровали, отжималии фильтровали.Разведение. Первое десятичное разведение готовили следующимобразом: к одной части настойки матричной добавляли 10 частейрастворителя, перемешивали и встряхивали для равномерного распределениядействующего вещества в растворе. Получали первое разведение настойки.Оно обозначается как D. 1D.105Потом одну часть этого раствора соединяли с 9 частями того жерастворителя, перемешивали и встряхивали – это второе десятичноеразведение. Обозначается как 2D. Полученная настойка имеет прозрачнаяжидкость желто–коричневого цвета со специфическим запахом.СогласнофармакопейнаястатьиОФС42-0027-05«Настойкигомеопатические матричные» качественное определение действующихвеществ в гомеопатических настойках и еѐ разведения 1D, 2D проводилиметодом ТСХ.
Методики описан в главе 3.7.1.На хроматограмме ТСХ, настойки и первое десятичное разведение 1Dобнаруживаются зоны красно – оранжевого цвета с Rf -0,62 (инулин) и с Rf 0,68(фруктоза)соответственно.Нахраматограмеразведения2Dобнаруживается слабо выражение зона адсорбции инулина и фруктоза.Качественная реакция: 0,5 мл настойки помещали в выпарительнуючашку, прибавляли 5 капель 20 % спиртового раствора тимола и 3 каплиразведенной серной кислоты.
Должно наблюдаться красно–фиолетовоеокрашивание (инулин).Для количественного определения фруктозанов и фруктозидов внастойке гомеопатическое матричное использовали спектрофотометрическийметод, основанный на реакции взаимодействия инулина с резорцином в средекислоты хлористоводородной. Методики представлен главе 2.2.5,Для установления точности и воспроизводимости методики определенияфруктозанов и фруктозидов в настойке топинамбура были проанализированынастойки и проведена статистическая обработка результатов. Результатыпредставлены в табл.25.Таблица 25Метрологическая характеристика методики количественного определениясуммы фруктозанов и фруктозидов в настойке топинамбурагомеопатического.FX¯, гSx¯P,%T(p,f)93,270,057952,26Изтабл.25.следует,ошибкаединичногодоверительной вероятности 0,95 не превышает¯0,129A %3,97определенияпри3,97%.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
