Диссертация (1141127), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Срезы толщиной 4-6 мкмокрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по методу ванГизон. Светооптическое исследование и фотографирование микропрепаратовосуществляли на микроскопе «Axiostar» (Германия) при увеличении (х200 их400). Морфометрическое исследование полученных срезов проводили припомощи программы «ImageTool»: сфотографированные в цифровом формате43срезы (при увеличении х200 и х400) вводили в компьютер (операционнаясистема Windows XP) в формате BMP и посредством копирования из буфераобмена анализировали данной программой. В отношении каждого случаяпроизводилиизмерениеопределенногокритерияв 10 полях зрения.Всего было изучено 175 гистологических препаратов.2.2.3. Методы статистического анализа данныхДлястатистическогоанализаиспользовалиоценкупараметровраспределения количественных показателей по критерию Шапиро-Уилкса.Считали приемлемым уровень значимости более 95 %, т.е.
числослучаевгенеральнойотклоненияотсовокупности,закономерностей,вкоторыхустановленныхмогутнаблюдатьсяпривыборочномисследовании, не будет превышать 5 %.Для отображения количественных показателей использовали среднеезначение (M), стандартное отклонение (δ) или стандартную ошибку среднего(m). Для отображения качественных параметров использовали удельный весживотных с данным признаком в процентах от общего их числа и среднююошибку коэффициента. Для вычисления ошибки коэффициента про p = 0 %или p =100 % использовали метод Ван-дер-Вардена.Для оценки достоверности различий применяли непараметрическиеметоды статистического анализа.
Это связано с величиной выборки,характером данных и их распределением по рангам. Для выявления44характера распределения использовали критерий Колмогорова-Смирнова иШапиро-Уилкса.Для сравнения учетных признаков, соответствовавших нормальнойфункции распределения и равенству дисперсий, применяли однофакторныйдисперсионный анализ с последующим межгрупповым сравнением покритерию Шеффе.Для непараметрических учетных признаков общегрупповые различияоценивали с помощью критерия Краскела-Уоллиса, и попарно по UкритериюМанна-Уитни(Mann-Whitney)Внутригрупповыеразличиязависимых переменных (для парных сравнений в группах) оценивали спомощью критерия Уилкоксона (Wilcoxon-test).Качественные показатели межгрупповых различий оценивали спомощью критерия χ² и точного критерия Фишера.Внутригрупповые различия качественных признаков оценивали спомощи критерия знаков (знаковый тест) и критерия Мак Немара.Различия между выборками считали статистически значимыми при р<0,05.Обработку статистических данных проводили с помощью пакетастатических программ SPSS 22.0 for Windows.45ГЛАВА 3.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.3.1.Использованиеволокнистогоигранулированногопористо-проницаемого никелид титана для заполнения остаточныхкостных полостей.Имплантат для замещения остаточных костных полостей в челюстнолицевой хирургии, усовершенствованный нами, выполненный из никелидтитана. Получен патент на полезную модель: «Имплантат для замещенияостаточных костных полостей и дефектов в челюстно-лицевой хирургии» №2015117277 от 07.05.2015 г.Его особенность в том, что он состоит из трех групп витков,ориентированных по взаимно- перпендикулярным осям имплантата.
Виткипервой группы имеют больший размер, ориентированы вдоль большей осиимплантата. Имеют размер по этой оси, который на 1-2 мм превышаетнаибольший линейный размер сотаточной костной полости. Витки второйгруппы меньшего размера охватывают витки первой группы, ориентированывдоль меньшей оси имплантата и имеют по этой оси размер на 1-2 ммпревышающий наибольший линейный размер остаточной костной полости,измеренный в направлении, перпендикулярном наибольшему линейномуразмеру остаточной костной полости.
Витки третей группы охватываютвитки второй группы, расположены внутри витков первой группы иориентированы вдоль оси, перпендикулярной большей и меньшей осямимплантата. При этом все витки выполнены из одного цельного кускапроволоки никелид титана, диаметр которой составляет 0,2 – 0,4 мм, путемпоследовательной намотки с использованием микроскопа. Концы проволокисвязаны узлом и заправлены внутрь витков.46Рисунок 4 – Схема формирования узла из волокнистого NiTi.1 – Витки первой группы имеют больший размер, ориентированы вдольбольшей оси имплантата2 – Витки второй группы меньшего размера охватывают витки первойгруппы, ориентированы вдоль меньшей оси имплантата3 – Витки третей группы охватывают витки второй группы, расположенывнутри витков первой группы4 - Концы проволоки связаны узлом и заправлены внутрь витковВгруппахуэкспериментальныхживотныхбылсозданискусственный дефект, размерами 5 мм.
С целью остеоинтеграции,повышения остеоиндукции и, как следствие, ускорение заживления костногодефекта, воспроизведенные полости заполнялись гранулированным иволокнистым никелид титана.В протоколе исследования фиксированы физическая активностьживотных после операции, летальность, состояние тканей.47Операции кроликам выполнялись под внутривенным наркозом, сиспользованием препарата Рометар 2 % , Золетил 100 в объеме 2 мл. Послепроведения гидропрепаровки с помощью ультракаина DS 1,8 (1: 200 000),выполнялся разрез по краю нижней челюсти.
Рассекалась кожа, подкожножировая клетчатка, фасция. Фасция раздвигалась тупым путем дляуменьшения операционной травмы. Затем проводилось скелетированиеальвеолярного отростка тела нижней челюсти, отслаивание надкостницы.После чего с помощью фиссурного бора формировался искусственныйдефект, соответствующий размерам 5 мм. С целью остеоинтеграции иповышенияостеоиндукциивоспроизведенныедефектызаполнялисьгранулированным или волокнистым никелид титана. Материал в виде гранулвносился в полость с помощью кюретажной ложки, затем уплотнялся спомощью штопфера.
Волокнистый никелид титатна сворачивался заранее,вносился в рану в виде специального узла. Интраоперационно имплантатысмешивались с кровяным сгустком.Затем рана укрывалась сеткой изтканевого никелид титана соответствующего размера, который выполнялроль мембраны. Раны над дефектом ушивались узловыми швами.Затемранаукрываласьсеткойизтканевогоникелидтитанасоответствующего размера, который выполнял роль мембраны. Раны наддефектом ушивались узловыми швами.Животные выводились соответственно через 30, 90 и 180 суток послеэкспериментального заполнения дефектов. Кость нижней челюсти вместе симплантатом разрезали медицинской фрезой с водяным охлаждением.Забор биологического материала осуществлялся таким образом, чтобызахватить область дефекта, восполненного имплантационным материалом иокружающие неизмененные ткани.
Оценка результатов проводилась наосновании сравнения контрольной и рабочей серий экспериментов по всемпроведенным исследованиям (Рис. 5).481.2.3.4.5.6.Рисунок 5 – Схема оперативного вмешательства.491. Операции кроликам выполнялись под внутривенным наркозом, сиспользованием препарата Рометар 2 % , Золетил 100 в объеме 2 мл.2. проведение гидропрепаровкис помощью ультракаина DS 1,7 (1:200 000).3.
Рассечение кожи, подкожно-жировой клетчатки, фасции.4. формирование дефекта с помощью фиссурного бора .5. Заполнение дефекта гранулированным или волокнистым никелидтитана6. Рана ушита внутрикожным швом.В послеоперационном периоде животным выполнялись ежедневныеперевязкисмазьюЛевомеколь.Проводиласьантибактериальная,противовоспалительная терапия (байтрил 2,5% раствор - 0,5 мл 1 раз всутки), в течение 5 дней. При необходимости кролики получалиобезболивающие, противовоспалительные препараты (димедрол 0,8 мг/кг ).Анализрезультатовоперативноговмешательствапоказал,чтоколичество и тяжесть местных осложнений в основных и контрольнойгруппе отличались незначительно.
Ближайший послеоперационный период вконтрольной и опытных группах протекал практически одинаково. Местныеизменения послеоперационных ран отражали слабую воспалительнуюреакцию – гиперемию, коллатеральный отек, незначительное серозноеотделяемое. Коллатеральный отек полностью исчезал через 5 сут. Боли,выражаясь в беспокойном поведении животных, держались в течение 3-5суток. Наблюдался частичный отказ от пищи.Было установлено, что лишь у 8 % кроликов были отмечены местныевоспалительные реакции в области оперативного вмешательства (гиперемия,отек) более 5 сут.
Дополнительные методы лечения не требовались. Даннаяреакция в обеих группах исследования носила обычно кратковременныйхарактер и значительно снижалась на 3-5 сут после оперативноговмешательства (Табл. 2).50Таблица 2 – Оценка динамики тканевой реакции в экспериментальныхгруппах.ОсновнаяхарактеристикаВ-1(1группа)Гр-2(2 группа)КонтрольСтимуляцияостеогенеза---Стимуляцияангиогенеза---Выполнение дефекта+++Воспалительнаяреакция+++++++++Выполнение дефекта+++Воспалительнаяреакция---СтимуляцияостеогенезаСтимуляцияангиогенезаСтимуляцияостеогенезаСтимуляцияангиогенезаВыполнение дефектаВоспалительнаяреакция513.2 Использование гранулированного никелид титана.Гистологическое исследование зоны имплантации у животных этойгруппы на 30 - е сутки эксперимента выявило наличие гомогеннойэозинофильной бесклеточной зоны, за которой визуализировалась рыхловолокнистая соединительная ткань, с явлениями выраженного отёка, и далееследовалазонаремоделированияостеобластокластическойрезорбциикостнойотдельныхтканибалок,ввиденаравнесформированием остеоидных и костно-остеоидных балок.
Определялисьединичные участки хрящевой ткани.На 90-е сутки эксперимента наблюдения в области имплантацииопределялась узкаягомогенная эозинофильная бесклеточная зона сперифокальным формированием грубоволокнистой соединительной ткани,которая чередовалась с участками гиалиновой хрящевой ткани. В некоторыхзонах определялись фрагменты губчатой костной ткани с признакамиминимального ремоделирования. Определялись бесклеточная зона, хорошосформированные единичные костные балки, среди зрелой фиброзной ткани иучастками гиалинового хряща.На 180-е сутки объем дефекта резко уменьшен за счет костнойрегенерации. Оставшаяся часть дефекта заполнена плотной фибрознойсоединительной тканью. Фиброзная соединительная ткань прилегает ккомпактизированной костной ткани, которая сформировалась, по-видимому,напластованием новообразованных костных трабекул на возникшие раньше.На краях и в глубине бывшего дефекта в фиброзной ткани видны участкирегенерации кости.
В некоторых полях зрения определяютсяостеобласты на поверхности трабекул (Рис. 6).активные52Рисунок 6 – на 180-е сутки эксперимента. 1 группа. Окраскагематоксилином и эозином. Ув. х 400.Наблюдаетсяобразование костномозговой полости, заполненнойкостным мозгом. В проекции дефекта и по перифериивыявлялисьсинусоидные капилляры и артерии с тонкой мышечной стенкой.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
