Диссертация (1141107), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Она уменьшалась от препарата к препарату в 2,3 и 1,8 раза. В то жевремяинактивацияподвижностипромастиготнаступалапридозедоксициклина в 15 раз меньшей, чем цефтриаксона (0,0006 г против 0,009 г,53соответственно). Существенно, что в этих группах все визуализируемые особибыли неподвижными при минимальных дозах. При минимальной дозецефотаксима(8,917)ингибирующейактивностибыласлабой,т.к.присутствовали малоподвижные лейшмании с небольшим колебанием жгутика.Сравнение двух контрольных групп свидетельствует, что в 1-ойконтрольной группе с использованием меглумина антимоната минимальнаяингибирующая активность препарата составляла 7,92 жгутиковых в полезрения, что в только в 2,2 раза меньше, чем во 2-ой контрольной группе (среда199 – 19,16).
При этом имели место активные лейшмании, передвигающиесясвободно по всему полю зрения. Не исключено, что это связано с несколькозаниженной концентрацией меглумина антимоната в связи с использованиемего жидкой лекарственной формы. Эксперимент in vivo даст возможностьполучить более достоверные данные.Увеличение терапевтической концентрации препаратов в 4 (меглуминаантимонат) и в 10 раз (антибиотики) свидетельствует о незначительномповышении специфической активности: только в 1,5 раза для меглуминаантимоната (5,42 против 7,92); 1,6 раза для доксициклина (3,167 против 5,083);в 1,5 раза для цефтриаксона (1,42 против 2,25) и в 1,9 раза для цефотаксима(4,672 против 8,917). С другой стороны, увеличение терапевтическойконцентрации в клинической практике не рекомендуется и не оправдано, т.к.минимальная концентрация уже обладает ингибирующей активностью.543.2.Проверка на лабораторной модели токсичности препаратов спротиволейшманиальным эффектом, доказанным in vitroДля изучения токсичности указанных препаратов использовали методику,принятую в клинической фармакологии для доклинических исследований наживотных [30].
Для этой цели отобраны по 5 золотистых хомяков для каждогоизучаемогопрепарата:доксициклина,цефотаксима(клафорана)ицефтриаксона, а также меглумина антимоната – препарата 5-валентной сурьмы(глюкантима)иинтерферонаальфа-2bчеловеческогорекомбинантного(реаферона).Доза препаратов рассчитывалась исходя из максимальной рекомендуемойдозы в соответствии с инструкцией фирмы производителя для человека сосреднестатистическим весом 60 кг.
Для золотистого хомяка эта дозаопределялась на 100 г массы тела. Максимальный период наблюдения заживотными при изучении токсичности препаратов составил 3 недели.Максимальная терапевтическая доза доксициклина составила 0,00033 г на100 г массы животного.
Препарат вводили внутримышечно однократно вдозировках, превышающих максимальную в 5 раз (1 и 2 животные), а также – в10 раз (3-5 животные) (табл. 4).Таблица 4 – Оценка токсичности доксициклина in vivo на золотистых хомяках№ GSH иразведениедоксициклина№ 1 в 5 раз№ 2 в 5 раз№ 3 в 10 раз№ 4 в 10 раз№ 5 в 10 разКоличествопрепарата на 100г модели (г)*0,00160,00160,00320,00320,0033Количествовещества,введенного в/м(г)0,00140,00160,00330,00360,004Масса модели (г)1 день9010310211112216 день93 (+3,3%)106 (+3%)102 (0%)116 (+4,5%)125 (+2,5%)21 день94 (+4,4%)108 (+5%)105 (+3%)120 (+8,1%)123 (+1%)* рекомендованное инструкцией количество препарата в пересчете на 100 г веса лабораторной модели,увеличенное в 5 и 10 раз.Вес животных до начала эксперимента колебался от 90 до 122 г.
Послевведения дозы доксициклина, превышающей терапевтическую в 5 раз, масса55первого животного увеличилась через 16 дней на 3,3 %, а на 21 день – на 4,4%,а у второго животного – на 3% и 5%, соответственно. Практическианалогичные данные получены при увеличении дозы доксициклина в 10 раз.Спустя 16 дней масса золотистых хомяков, у двух животных увеличилась на2,5% (№5) и на 4,5% (№4), а у одного (№3) – не изменилась. Через 3 неделиприрост массы тела зарегистрирован у всех животных на 1% (№5) – 8,1% (№4).Погибших животных не было. Отмечено лишь небольшое снижение активностиповедения.Полученныеданныенаглядносвидетельствуютоботсутствиитоксичности у доксициклина in vivo при повышении терапевтической дозыпрепараты в 5 и даже 10 раз.В соответствии с инструкцией максимальная дозировка клафоранасоставляла 0,0133 г на 100 г животного.
Его вводили трем животным вдозировке в 5 раз, превышающей максимальную, а двум – в 10 раз. Препаратвводился внутримышечно однократно.В таблице 5 приведены результаты экспериментальнойтоксичности цефотаксима (клафорана) in vivo на золотистых хомяках.оценкиТаблица 5 – Оценка токсичности цефотаксима (клафорана) in vivo назолотистых хомяках№ GSH иразведениецефотаксимаКоличествопрепарата на100г модели (г)*Количествовещества,введенногов/м (г)№ 1 в 5 раз№ 2 в 5 раз0,0630,0640,0650,130,1320,0820,0670,060,1720,15№ 3 в 5 раз№ 4 в 10 раз№ 5 в 10 разМасса модели (г)1 день1311049313211416 день82 (-37,4%)79 (-24,0%)71 (-23,7%)75 (-43,2%) **74 (-35,1%) **21 день85 (-35,1%)**76 (-26,9%)**67 (-28,0%)**-* рекомендованное инструкцией количество препарата в пересчете на 100 г веса лабораторной модели.** животные, погибшие в ходе эксперимента, масса их определена посмертно.Вес животных колебался от 93 до 132 г.
Экспериментально установленатоксичность цефотаксима (клафорана). При увеличении дозы препарата в 10раз оба животных (№4 и №5) погибли уже на 16 день. Их посмертная масса56тела была на 43,2% (№4) и 35,1% (№5) меньше исходной. Спустя 3 неделипосле введения препарата погибли остальные три хомяка, доза введенногопрепарата у которых, превышала в терапевтическую дозу в 5 раз. Посмертнаямасса животных была ниже исходной на 26,9% (№2) – 35,1% (№1).
Во всехслучаях потеря массы тела сопровождалось диареей, снижением аппетита иактивности животных.Полученныеданныесвидетельствуютовысокойтоксичностицефотаксима (клафорана).В соответствии с инструкцией максимальная дозировка цефтриаксонасоставляла 0,0067 г на 100 г животного. Его вводили трем животным вдозировке в 5 раз, превышающей максимальную, а двум – в 10 раз. Препаратвводился внутримышечно однократно.В таблице 6 приведены результаты экспериментальнойтоксичности цефтриаксона in vivo на золотистых хомяках.оценкиТаблица 6 – Оценка токсичности цефтриаксона in vivo на золотистых хомяках№ GSH иразведениецефотаксима№ 1 в 5 раз№ 2 в 5 раз№ 3 в 5 раз№ 4 в 10 раз№ 5 в 10 разКоличествопрепарата на100г модели (г)*0,0330,0340,0340,0670,067Количествовещества,введенногов/м (г)0,0340,0350,030,0760,072Масса модели (г)1 день1021038911310716 день87 (-14,7%)82 (-20,4%)76 (-14,6%)91 (-19,5%)85 (-20,6%)21 день47.5 (-53,3%) **55 (-46,6%) **53 (-40,5%) **61 (-46,0%) **51 (-52,4%) *** рекомендованное инструкцией количество препарата в пересчете на 100г веса лабораторной модели.** животные, погибшие в ходе эксперимента, масса их определена посмертноЭкспериментально на золотистых хомяках установлена токсичностьцефтриаксона.
В отличие от клафорана в этой группе, независимо отувеличения дозы в 5 и 10 раз, все хомяки погибли несколько позже – к концу 21дня. Была зарегистрирована значительная потеря массы тела у всех животных57уже на 16 день (от 14,6% до 20,6%). Их посмертная масса тела к 21уменьшилась вдвое (40,5%-53,3%). Во всех случаях потеря массы теласопровождалось диареей, снижением аппетита и активности животных.В соответствии с инструкцией максимальная дозировка меглуминаантимоната (глюкантима) составила 0,01 г на 100 г массы животного. Препаратвводиливнутримышечнооднократновдозировках,превышающихмаксимальную в 3 раза (животные №1 и №2), а также – в 5 раз (№№3-5) (табл.8).
Увеличение дозы в 10 раз не проводилось, что связано с особенностямилекарственной формы выпуска препарата (раствор). Если дозу увеличить в 10раз, то животному следовало вводить 3,3 мл меглумина антимоната, чтонесоизмеримо с размером животного. С дугой стороны, меглумина антимонатаприменяется для лечения КЛ много десятилетий и считается «золотымстандартом» терапии.В таблице 7 приведены результаты экспериментальной оценкитоксичности меглумина антимоната (МА) in vivo на золотистых хомяках.Таблица 7 – Оценка токсичности МА in vivo на золотистых хомяках№ GSH иразведениецефотаксима №Количествопрепарата на100г модели(г)*Количествовещества,введенногов/м (г)№ 1 в 3 раз№ 2 в 3 раз№ 3 в 5 раз№ 4 в 5 раз№ 5 в 5 раз0,0340,0310,0480,0480,0470,0420,0350,0510,0470,040Масса модели (г)1 день122111107988516 день122 (0%)113 (+1,8%)103 (-3,7%)99 (+1%)90 (+5,9%)21 день121 (-0,8%)119 (+7,2%)97,7 (–8,7%)104 (+6,1%)88 (+3,5%)* рекомендованное инструкцией количество препарата в пересчете на 100г веса лабораторной модели,увеличенные в 3 и 5 раз.При увеличении терапевтической дозы меглумина антимоната в 3 разачерез 16 дней масса тела животных №1 и №2 практически не изменилась.
Через21 день у хомяка №1 она была стабильной, а у №2 – возросла на 7,2%. Приувеличении терапевтической дозы в 5 раз через 16 дней у двух хомяков масса58тела увеличилась на 1% (№4) и на 5,9% (№5). У хомяка №3 несколькоснизилась – на 3,7%. Спустя 21 день масса животных №4 и №5 нарастала на6,1% и 3,5%, соответственно. У животного №3 она снизилась на 8,7%, что посравнению с исходной массой статистически недостоверно (р<0,05).Таким образом, очередной раз доказано отсутствие токсическогодействия меглумина антимоната на экспериментальных животных.В соответствии с инструкцией максимальная дозировка интерферонаальфа-2b человеческого рекомбинантного (реаферона) составляла 10000 МЕ на100 г животного. Животным №1 и №2 вводили максимальную дозу в 10 разпревышающую максимальную терапевтическую дозу для человека, а тремживотным – в 20 раз.
Такой подход был связан с желанием экспериментальнооценить наличие антилейшманиальной активности у препарата из группыиммуномодуляторов. Интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантныйвводили однократно внутримышечно.Втаблице8приведенырезультатыэкспериментальнойоценкитоксичности интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного (ИФ) invivo на золотистых хомяках.Таблица 8 – Оценка токсичности интерферона альфа-2b человеческогорекомбинантного (ИФ) in vivo на золотистых хомяках№ GSH иразведениеИФ№1 в 10 раз№2 в 10 раз№3 в 20 раз№4 в 20 раз№5 в 20 разКоличествопрепарата на100 г модели(МЕ)*Количествовещества,введенногов/м (МЕ)101000Массамодели (г)Масса модели (г)Масса модели(г)1день16 день9100090101 (+12,2%)107 (+18,9%)1010009300092101 (+9,8%)120 (+30,4%)188000194000103114 (+10,7%)129 (+25,2%)195000219000112112 (0%)114 (+1,8%)197000221000112115 (+2,7%)118 (+5,4%)21 день* рекомендованное инструкцией количество препарата в пересчете на 100г веса лабораторной модели,увеличенные в 10 и 20 раз.59Интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный не оказываеттоксического действия на организм экспериментальных животных.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
