Диссертация (1141107), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Прибавка массы тела золотистыххомяков была при монотерапии доксициклином 4 раза выше, чем примонотерапии МА. Комбинированная терапия увеличивала прибавку массы телакак при использовании МА, так и доксициклина. При комбинированнойтерапии МА + ИФ показатель прибавки массы тела был в 16,5 раза выше, чемпри монотерапии МА. А при комбинированной терапии доксициклином + ИФ –в 5,5 раза выше, чем при монотерапии доксициклином. Это свидетельствует оменьшей токсичности последнего.82ЗАКЛЮЧЕНИЕАктуальность проблемы ЗКЛ для практикующих врачей РФ явиласьпредпосылкой для изучения новых походов в выборе методов лечениязаболевания. Постоянная миграция населения РФ в эндемичные полейшманиозу регионы (туристические поездки, служебные командировки,работа по контракту и др.) способствует заносу инфекции в страну.
Крометого, прибытие в Россию инфицированных людей из стран БлижнегоВостока, Азии, Африки и Латинской Америки, стран СНГ, где ЗКЛрегистрируют достаточно часто, увеличивает число обращений данногоконтингента в лечебные учреждения для оказания медицинской помощи.Выявление завозных случаев как кожного [70; 67; 8; 66; 72; 69; 71; 68; 64] ивисцерального лейшманиоза [62; 82; 79; 63; 80] зарегистрировано врачами вразличных регионах нашей страны.Поэтомууврачейпрактическогоздравоохранениявозникаютсерьезные проблемы как в плане диагностики, так и выбора метода лечения.Учитывая, что ЗКЛ спорадически завозят в Россию из стран СевернойАфрики (Египет, Тунис), Ближнего Востока (Турция, Израиль, Иордания),СНГ (Азербайджан, Армения, Узбекистан, Таджикистан), Грузии, гдеосновным возбудителем является Leishmania major (L.
major), мы выбралиданный инфекционный агент для доклинических исследований из криобанкаИнститута медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивныхзаболеваний им. Е. И. Марциновского Первого МГМУ им. И. М. Сеченова.По журналу отбирали наиболее вирулентные штаммы L. major.83В качестве лабораторной модели использовали золотистых хомяков –Golden Syrian hamster (GSH), т.к. они являютсяклассической модельювисцерального лейшманиоза и восприимчивы к заболеванию. Их выбор былобусловлен и тем, что нами использована лабораторная культура L. major,хранившаяся долгое время в криобанке института.
Животные закупались впитомникелабораторных животных «Пущино»,имели ветеринарныйпаспорт, содержание и питание соответствовали нормативным документам.Анализ литературы позволил нам установить, что стандарты леченияЗКЛ в нашей стране отсутствуют. В национальном руководстве подерматовенерологии (2013) для его лечения предлагается использовать 12препаратов, зарегистрированных в Государственном реестре лекарственныхсредств (ГРЛС) МЗ России. Хорошо зарекомендовавший себя антибиотик изгруппы аминогликозидов (мономицин) в настоящее время в России непроизводится.Препарат5-валентнойсурьмы(солюсурьмин),поставлявшийся из Туркмении, в ГЛРС РФ не зарегистрирован.
Врекомендациях ВОЗ (2010), в Руководстве по ведению случаев и эпиднадзоруза лейшманиозами в Европейском регионе ВОЗ (2018) и в методическихрекомендациях «LeishMan» для лечения ЗКЛ предлагают меглуминаантимонат (глюкантим), стибоглюконат натрия (пентастам), милтефозин(импавидо), липосомальный амфотерицин В (амбисом), паромомицин,аминохинол, пентамидин. Из перечисленных препаратов в ГРЛС имеетсятолько амфотерицин В без указания, что он липосомальный, а в инструкциифирмы производителя нет показаний для лечения КЛ.Наоснованиипубликацииавторов,лечившихбольныхЗКЛантибиотиками различных фармакологических групп мы для настоящегоисследованиявыбралидоксициклин[31],цефотаксим(клафоран–цефалоспорин 3 поколения) [37].
Учитывая, что цефотаксим – импортныйпрепарат (Франция), для импортозамещения актуальным является изучениеin vitro и in vivo отечественного антибиотика из той же группы –84цефтриаксона. Универсальным препаратом для лечения лейшманиозовявляются препараты 5-валентной сурьмы. Поэтому меглумина антимонатиспользован нами в качестве контроля при оценке эффективности другихпрепаратов.Учитываялейшманиоза,новыеданныезарубежныхсвидетельствующие,чтоавторовопатогенезеэтиологическимфакторомзаболевания могут быть не лейшмании, а вирус, находящийся в них (LRV –лейшманиальный РНК-вирус), в нашем в доклиническом исследованиисделан акцент на изучение эффективности комбинированной терапии.Напервом этапе изучены специфическая активность in vitroи in vivo трехантибиотиков (доксициклин, цефтриаксон и цефотаксим)в сравнении смеглумина антимонатом, а затем эффективность моно и комбинированнойтерапии доксициклином, глюкантимом и их сочетания с интерферономальфа-2b человеческим рекомбинантным.ТакойподходкпроведениюНИРпозволилinvitroпровестисравнительную оценку трех антибиотиков (доксициклина, цефотаксима,цефтриаксона) на промастиготы лейшманий с учетом их минимальных доз,количества протистов в поле зрения и показателя инактивации их подвижности.Доказано лидирование доксициклина и цефтриаксона.
Минимальные дозыобоих препаратов приводятк абсолютному подавлению подвижностивозбудителя. Повышение терапевтической дозы препаратов не обосновано.Сравнениеэтихпрепаратовсмеглуминаантимонатомпоказалоихпревосходство по всем показателям.В эксперименте in vivo на золотистых хомяках доказано отсутствиетоксического действия антибиотика доксициклина и иммуномодулятораинтерферонаальфа-2bчеловеческогорекомбинантногоиустановленвыраженный токсический эффект препаратов из группы цефалоспоринов IIIпоколения – цефотаксима и цефтриаксона.85Доказанаinвысокаяvivoпротиволейшманиальнаяактивностьантибиотика тетрациклинового ряда (доксициклина) при экспериментальномЗКЛузолотистыххомяков.Напримерецефтриаксонапоказанонесоответствие результатов in vitro и in vivo.
В первом случае егоэффективность была высокой, во втором – животные погибали.Установлен in vivo факт повышения эффективности доксициклина имеглумина антимоната при комплексной терапии с интерфероном альфа-2bчеловеческим рекомбинантным. Использование интерферона в комплекснойтерапиисвидетельствуетосинергизмеданныхпрепаратов.Этопатогенетически проявляется в более раннем заживлении язвенного дефектаи элиминации лейшманий из очага поражения при значительном увеличениимассы тела у животных.Золотистыехомяки,являющиеся«золотымстандартом»длявоспроизведения экспериментальной модели ВЛ, с успехом могут бытьиспользованы для воспроизведения экспериментальной модели ЗКЛ.Оценка специфической активности доксициклина в эксперименте in vitroи in vivo обосновывает целесообразность расширения показаний для данногопрепарата, в частности, для использования при кожном лейшманиозе.Комбинированная терапия, включающая доксициклина и интерферональфа-2b человеческий рекомбинантный, а также меглумина антимонат иинтерферональфа-2bчеловеческийрекомбинантныйобладаетболеевыраженным терапевтическим эффектом.
Такая тактика в дальнейшем (послеклинических испытаний) может быть рекомендована для лечения зоонозногокожного лейшманиоза.86ВЫВОДЫ1. ИнкубационныйпериодэкспериментальногоЗКЛухомяковколеблется от 1 до 8 мес., составляя в среднем 76,8±21,8 дня.
У 58,1%животных клинические проявления ЗКЛ возникают в течение 2 мес., у 41,9%– спустя 2 мес., в том числе у 30,8% – через 3 мес. Размер язв до 1 см вдиаметре зарегистрирован в 61,3% случаев, до 1,5 см – в 38,7%. Лимфостаз вобласти половых органов (7,6%) наблюдается редко. При локализации язв наушных раковинах наблюдается частичное или полное расплавлениехрящевой ткани.2. Сравнительная оценка воздействияin vitro трех антибиотиков(доксициклина, цефотаксима, цефтриаксона) на промастиготы лейшманий сучетом их минимальных доз, количества протистов в поле зрения ипоказателя инактивации их подвижности свидетельствует о лидированиидоксициклина и цефтриаксона. Минимальные дозы обоих препаратовприводят к абсолютному подавлению подвижности возбудителя. Хотяспецифическая активность доксициклина при количественном измерениичисла промастигот в 2,6 раза ниже, чем у цефтриаксона (2,250 и 5,083,соответственно), но минимальная терапевтическая доза доксициклина в 15раз меньше, чем у цефтриаксона (0,0006 г против 0,009 г, соответственно).Повышение терапевтической дозы препаратов не обосновано.
Сравнениеэтих препаратов с меглумина антимонатом (глюкантимом) показало ихпревосходство по всем показателям.3. Доксициклин, меглумина антимоната (глюкантима) и интерферональфа-2b человеческий рекомбинантный (реаферон) при экспериментальномизучении их токсичности in vivo на ЗХ не обладают таковой при увеличении87терапевтической дозы препарата в несколько раз. Выраженной токсичностьюобладают оба препарата из группы цефалоспоринов III поколения –цефотаксим (клафоран) и цефтриаксон4.
In vivo цефтриаксон и цефотаксим (клафоран) в терапевтической дозевызываютгибельантимонатом,лабораторныхдоксициклиномиживотных.Монотерапияинтерферономальфа-2bмеглуминачеловеческимрекомбинантным (реафероном) достаточно эффективна и не различается к 30дню их применения по таким показателям как средняя степень местногопоражения (1,20±0,70; 1,07±0,70 и 1,07±0,74, соответственно) и среднему числулейшманийвочагепоражения(1,50±0,50;1,27±0,45и1,27±0,45,соответственно). Отличия зарегистрированы в показателях средней прибавкимассы тела (максимальная при лечении интерфероном – 15,3%), средних срокахклинического выздоровления (минимальный при лечении доксициклином –20,1±2,3 дня). Лейшмании в очаге поражения на 60 день полностьюотсутствовали при лечении доксициклином.5.
Комплексная терапия экспериментального ЗКЛ у золотистых хомяковпо данным in vivo позволила повысить эффективность меглумина антимоната идоксициклина за счет интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантногопо всем показателем в сравнении с монотерапией.40,7403527.2302522.120.119.220151050МАДЦИФМА +ИФДЦ + ИФРисунок 14 – Средние сроки клинического выздоровления золотистыххомяков в эксперименте in vivo (дни)88Сравнение средних сроков клинического выздоровления золотистыххомяков свидетельствует, что максимальный срок зарегистрирован прииспользовании монотерапии меглумина антимонатом (40,7±3,2 дня). Придругих видах терапии он был значительно меньше.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
