Диссертация (1140769), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Начинаяс 10-х суток после операции со стороны резидентных (нативных) тканей уретрынаблюдался постепенный рост эпителиального пласта, который по своимхарактеристикам соответствует уроэпителию(рис. 10, а). Рост уроэпителияпродолжался до полной эндотелизации к 60-90 суткам (рис. 10, б). Только к 60-мсуткам ДМТАС подвергалась деструкции и клеточной инфильтрации, а капсулапротеза приобретала некоторые морфологические черты слизистой оболочкиуретры (см. рис. 10, б).Рисунок 10.
Динамика резорбции матрицы ДМТАС (кролик). а — 7-е сутки после пластики уретры сиспользованием ДМТАС. Резорбция матрицы на торцах. Видна регенерация уроэпителия на поверхностисоединительнотканной капсулы (стрелки). Окраска гематоксилином и эозином. × 200; б — выстланная45эпителием (стрелки) соединительнотканная капсула (1), деструкция матрицы (2). Окраска гематоксилиноми эозином. × 400.Таким образом, как и при подкожной имплантации матрица биодеградирует всроки до 60 дней.
Рост уроэпителия происходит с концов стенки уретры путемпролиферациинативногоэпителия,находящегосянаторцахпроезаипродолжается под матрицей, а не по ее поверхности – в щель между матрицей икапсулой.3.5 Результаты оценки цитотоксичности и клеточной адгезии матрицы наоснове децеллюризированной артериальной стенкиМТТ-тестирование показало отсутствие токсичности исследуемых образцовматрицы при использовании культур линейных фибробластов 3Т3 и С3Н.Рис 11. На поверхности биоматериала видны кристаллы формазана (результат МТТреакции), подтверждающие наличие живых клеток.3.6 Описание гибридной матрицы на основе сетки из полилактогликолида иреконструированного коллагенаМакроскопически матрица выглядит плотной, хорошо держит форму,оставаясь при этом достаточно гибкой, не теряет пространственную структурупри длительном нахождении в воде (см.
рис. 2). Имеет трехслойную структуру.46Таким образом, данная матрица обладает хорошими механическими свойствами,а именно гибкая и плотная, она хорошо держит форму, меняя своюпространственную конфигурацию.3.7 Биодеградации и биосовместимости гибридной матрицы на основе сеткииз полилактогликолида и реконструированного коллагенаНарисунке12(а,б,в,г)мывидиммакроскопическуюкартинуимплантированной в межлопаточную область крыс матрицы соответственно на10, 30, 60 и 90 сутки: а) матрица хорошо визуализируется, фиксирована к мышценерассасывающимися лигатурами, наблюдается незначительная воспалительнаяреакция в зоне имплантации матрицы; б) в области имплантации матрицыотсутствуют явления острого и хронического воспаления, область имплантациибез признаков инфильтрации; в) матрица практически не определяется,отмечается миграция нитей, фиксировавших матрицу к центру условной областификсации матрицы; г) матрица не определяется, признаков наличия рубца нет,нерассасывающиеся лигатуры мигрировали к центру условной области фиксацииматрицы.47Рисунок 12.
Макроскопическая картина, матрица подшита в межлопаточную область крысы.а — 10-е сутки после имплантации. Видны: матрица и фиксирующие ее за четыре угла нити пролена. . б —30-е сутки после имплантации. Видны: частично резорбированная матрица и фиксирующие ее за четыреугла нити пролена.в — 60-е сутки после имплантации.
Видны: нити пролена, которыми былыфиксирована матрицы, отмечается деформация зоны операции.г — 90-е сутки после имплантации.Визуализируются лишь нити пролена, матрица не определяется, признаков воспаления нет.На рисунке 13 отражены результаты биодеградации матрицы на основеполилактогликолида и реконструированного коллагена: а) 10 суток послеимплантации, замещение коллагеновой губки грануляционной тканью ипрорастание ее через поры викриловой сетки, окраска гематоксилин-эозином,увеличение ×100; б) 30 суток после имплантации, прорастание соединительнойткани между филаментами нитей полилактогликолида, начинающаяся резорбция48последних, окраска гематоксилин-эозином, увеличение ×400; в) 60 суток послеимплантации,фиброзированиегрануляционнойткани,частичныйлизисвикриловых нитей, много гигантских клеток, окраска гематоксилин-эозином,увеличение ×400; г) 90 суток после имплантации, инволюция фиброзной ткани,пустыеячейкипосле лизиса полилактогликолида, лимфу-макрофагальнаяинфильтрация, окраска гематоксилин-эозином, увеличение ×400.Рисунок 13.
Микроскопическая картина, матрица подшита в межлопаточную область крысы.а — 10-е сутки после имплантации. Резорбция коллагена и замещение последнего колланегом. Окраскагематоксилином и эозином. × 400.б — 30-е сутки после имплантации. Стягивание нитей прифиброзировании соединительной ткани, частичная резорбция макрофагами, многочисленные гигантскиеклетки инородных тел. Окраска гематоксилином и эозином. × 400. в — 60-е сутки после имплантации.Более выраженное стягивание нитей, частичная резорбция последних. Окраска гематоксилином и эозином.× 400.
г — 90-е сутки после имплантации. Полная резорбция нитей полилактогликолида.Таким образом, по макроморфлогическим и микроморфлогическим даннымматрицанаосновесеткиизполилактогликолидаобладаетвысокойбиосовместимостью, в частности, не вызывает выраженного воспаления ирубцевания. Данная матрица полностью биодеградирует в сроки до 90 дней.493.8 Результаты оценки структурно-функциональных свойств гибриднойматрицы на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагенаРетрограднуюуретроцистографиюпоописаннойвышеметодикевыполняли после удаления уретрального катетера на 10-е, 30-е, 60-е, 90-е суткипосле операции. Полученные уретрограммы сравнивали с предоперационными.На уретрограммах через 10, 30 и 60 дней после операции зона имплантацииматрицы не определяется, затеков контрастного вещества не обнаружено (чтосвидетельствует о хорошем функциональном результате), просвет уретрыполностью сохранен.
Лишь у одного кролика из двенадцати, на 90-е суткивыявлена стриктура уретры, как по данным уретроцистографии, так и по даннымаутопсии.Ниже приведены фотографии уретрограмм кроликов до операции (Рис. 14,а, б) и после операции в соответвии со сроками выведения из эксперимента (Рис.15, а,б,в,г). Признаков сужения просвета уретры нет, область имлпнатацииматрицы рентгенологически не определяется, дивертикулов и свещей отмечено небыло.Рисунок 14. Уретрограммы кроликов до уретропластики. а, б – уретроцистограмма кроликов до операции.50Рисунок 15. Уретрограммы кроликов после операции в соответствии со сроками выведения изэксперимента. а – через 10 дней после уретропластики. б – через 30 дней после уретрограммы.
в - через 60дней после уретропластики. г – через 90 дней после уретропластики. на всех уретрограммах отсутствуютпризнаки сужения или облитерации уретры.Ниже приведена уретроцистограмма кролика с образовавшейся стриктуройуретры, последняя указана стрелкой (рисунок 16 – стрелкой указана областьстриктуры), также приведен макроскопический вид уретры с образовавшейся вней стриктуре (рисунок 17 – стрелкой указана область стриктуры).51Рисунок 16. Уретроцистограмма кролика 90-е сутки (стриктура помечена стрелкой).Рисунок 17. Макроскопическая картина стриктуры уретры, образовавшейся после имплантации матрицы(стриктура помечена стрелкой).Самостоятельное мочеиспускание восстановилось у всех животных послеудаления катетера и сохранялось до конца наблюдения. Облитерации уретры,образования мочевых свищей не наблюдалось.Таким образом, матрица на основе сетки из полилактогликолида иреконструированногоколлагенасвойствами,кроликовувсехобладаетхорошимивосстановилосьфункциональнымимочеиспускание,которое52сохранялось до окончания срока наблюдения.
Однако, у одного из наблюдаемыхкроликов на 90-е сутки отмечено формирование стриктуры уретры.3.9Морфологическоегибриднойматрицыизучениеуретропластикинасеткиосновеизсиспользованиемполилактогликолидаиреконструированного коллагена.При гистологическом изучении на 10 сутки после операции стенкаинтактной уретры (вне протеза) имеет обычную структуру, состоит изпереходного эпителия (уротелия), собственной пластинки слизистой оболочки,подслизистой основы, относительно толстого слоя плотной соединительнойткани, мышечного слоя и кавернозного тела. В области протезирования настороне, обращенной к просвету уретры, обнаруживаются нити сетки изполилактогликолида, причем каждая нить состоит из тонких филаментов (рис.18).Рисунок 18.10-е сутки после уретропластики.Стенка имплантата, состоящая изполилактогликолида (стрелки) кнутри от которой видны отложения фибрина и остаткиколлагеновой губки (двойная стрелка). Окраска пикрофуксин по Ван-Гизон. х 200.Внутри сетки из полилактогликолида видны отложения фибрина,скопления нейтрофилов, большей частью разрушенных, и макрофагов.
Средифибрина местами видны остатки коллагеновой губки в виде фуксинофильных(при окраске пикрофуксином по Ван-Гизону) волокнистых структур. К этому53сроку губка (реконструированный коллаген) почти полностью резорбирована,кроме отдельных элементов на внутренней стороне протеза.Следует отметить, что нити полилактогликолида также инфильтрированыфибрином и нейтрофилами с проникновением их между филаментами. Средиэтого инфильтрата в нити обнаруживаются макрофаги и единичные гигантскиеклетки инородных тел (рис. 19).Рисунок 19.
10-е сутки после уретропластики.Между филаментами нити из полилактогликолидапроникают фибрин и нейтрофильные лейкоциты, а также немногочисленные макрофаги; видны такжегигантские клетки инородных тел. Окраска пикрофуксин по Ван-Гизон. х 400.Резорбции филаментовна этот срокне обнаруживается. Местамиотмечается образование грануляционной ткани снаружи от слоя фибрина. Этагрануляционная ткань состоит из многочисленных кровеносных сосудовкапиллярного типа, тяжей фибробластов (рис.
19) и фуксинофильных по ВанГизону коллагеновых волокон (Рис. 20).54Рисунок 20. 10-е сутки после уретропластики. Грануляционная ткань кнаружи от имплантата. Окраскагематоксилин-эозином. х400.Рисунок 21. 10-е сутки после уретропластики. Ноовобразованные коллагеновые волокна. Окраскапикрофуксином по Ван-Гизон. х 400.55На 30 сутки имплантированный материал не обнаружен. Большая частьвнутренней поверхности (за исключением середины) бывшего протеза к этомусроку выстлана переходным недифференцированным уроэпителием. Эпителийрасполагается на рыхлой соединительной ткани, богатой сосудами, с очагамиинфильтрации лимфоцитами и макрофагами. Новообразованная соединительнаяткань близка к структуре собственной пластинки слизистой оболочки в интактнойуретре (рис.
22).Рисунок 22.30 сутки после уретропластики. Определяется эпителий, расположенный на рыхлойсоединительной ткани, богатой сосудами, с очагами инфильтрации лимфоцитами и макрофагами и близкийпо структуре к слизистой оболочке уретры. Окраска гематоксилин-эозином. х400.56Уодногоизживотныхэпителийболеезрелый,аподлежащаясоединительная ткань также имеет зрелый характер: больше количествоколлагеновых волокон, окрашивающихся в красный цвет по Ван-Гизону и всиний цвет по Маллори (рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
