Диссертация (1140769), страница 11
Текст из файла (страница 11)
Однако, имеются определенные особенностибиодеградации гибридной матрицы. В частности, резорбция коллагена и PLGAпроисходит на всем протяжении матрицы, без четкого воспалительного вала, иболее того, резорбирующие природный и искусственный полимеры макрофаги74клетки определяются и в толще самой матрицы. Вдобавок к диффузномухарактеру резорбции определяется нежная грануляционная ткань с врастающимив матрицу новыми сосудами (т.е.
неоангиогенез происходит в толще самойматрицы).При оценке функциональных результатов уретропластики с применениемгибридной матрицы эффективность последней сопоставима с эффективностьюуретропластики с применением матрицы на основе децеллюризированнойартериальной стенки. У всех животных восстановилось мочеиспускание послеудаления катетера, последнее сохранялось на протяжении всего периоданаблюдения. При контрольных уретрограммах лишь у одного кролика на 90-есуткиопределяетсяформированиестриктурыуретры,видимаяпримакроскопическом исследовании удаленной уретры.При гистологической оценке проведенной уретропластики, определяютсясущественные различия, как и предполагалось в замещении трансплантата.
Вчастности,происходилозамещениесначалаколлагена,азатемиполилактогликолида собственной соединительной тканью. Стоит отметитьвыраженный ангиогенез в этой ткани и хорошо сформированную базальнуюмембрану регенерирующего эпителия, что свидетельствует о его зрелости к 90-мсуткам.Таким образом, гибридная матрица обладает свойствами необходимыми длясозданиятканеинженернойконструкции,вчастности,отсутствиемцитотоксичности, хорошей клеточной адгезией, удовлетворительными срокамибиорезорбции, хорошей биосовместимостью, и что самое главное хорошимиструктурно-функциональными свойствами, в особенности, характером замещенияматрицы, наличием пор для прорастания новых сосудов.Наличие пор для прорастания матрицы подлежащей грануляционнойтканью и сосудов выводит данную матрицу на одно из первых мест при созданиитканеинженерной конструкции с учетом ее высоких показателей безопасности иэффективности.75Дальнейшие шаги, направленные в сторону создания тканеинженернойконструкции, состоящей из данной матрицы и аутологичных клеток пациента,должны обеспечить успешную реализацию этой задачи и создать возможностьвыполнениятканеинженернойуретропластикипациенту присоблюденииэтических принципов.Выводы1.
Коллагеновая матрица на основе децеллюляризированной трупной артериичеловека обладает низкой биологической активностью и безопасна вкачестве материала для заместительной уретропластики.2. Коллагеновая матрица на основе децеллюляризированной трупной артериичеловека не проявляет цитотоксичных свойств. Линии клеток (3T3 и C3H)адгезируют к поверхности матрицы на основе децеллюляризированнойтрупной артерии человека3. В эксперименте на крысах при подкожной имплантации сосудистая матрица(ДМТАС) окружается соединительнотканной капсулой, ее резорбцияосуществляется макрофагами, биодеградация наступает в течение 60–90сут.4.
Использование сосудистой матрицы (ДМТАС) в качестве материала длязаместительной уретропластики в эксперименте на кроликах показалохороший структурный и функциональный результат. Выявлена медленнаядеструкцияматрицыипрогрессирующаяэпителизациясоединительнотканной капсулы.5.
Созданиегибриднойматрицыизсеткиполилактогликолидаиреконструированного коллагена формируют стабильную конструкцию гибридную матрицу.6. Гибридная матрица не проявляет цитотоксичных свойств. Линии клеток(3T3 и C3H) адгезируют к поверхности гибридной матрицы7. В эксперименте на крысах при подкожной имплантации коллагенбиодеградируется в срок до 10 дней, полилактогликолид в срок до 30 дней.768. Заместительнаяиспользованиемпрорастаетуретропластикагибриднойкровеноснымивэкспериментематрицы,показывает,сосудами,накроликах,чтооназамещаетсясхорошособственнойсоединительной тканью, которая выстилается изнутри уротелием.
К 3месяцам происходит регенерация стенки уретры кролика.9. Гибридная матрица представляется наиболее перспективной матрицей длясоздания тканеинженерных конструкций по сравнению с коллагеновойматрицей на основе децеллюляризированной трупной артерии человека.ПредложенияНеобходимо проведение клинических исследований для оценки возможностивыполнениятканеинженернойуретропластикипациенту присоблюденииэтических принципов.77Библиография1.
Авторское свидетельство № 1543599 от 15.10.198 //. ‒ 1980.2. Глыбочко П., Аляев Ю., Николенко В., Шехтер А., Винаров А., Истранов Л., Истранова Е.,Абоянц Р., Люндуп А., Данилевский М. Заместительная уретропластика с использованиемтканеинженерной конструкции на основе децеллюляризированной сосудистой матрицы иаутологичных клеток слизистой оболочки щеки: первый опыт // Урология ‒2014. № 3. ‒ C.
4-10.3. Глыбочко П., Аляев Ю., Николенко В., Шехтер А., Винаров А., Истранов Л., Истранова Е.,Абоянц Р., Люндуп А., Данилевский М. Экспериментальное обоснование создания матрицы наоснове децеллюляризированной сосудистой стенки с целью последующей заместительнойуретропластики // Урология. ‒ 2014. № 6. ‒ C. 41-46.4. Леменев В.Л. А.
В. С. Опыт клинического применения биопротеза кровеносного сосуда«Гомографт». Клинический опыт и проблемы коллагенопластики. // Материалы научнопрактической конференции ММА им. И.М. Сеченова. ‒ 1999. ‒ C. 143.5. Файзулин А.К. П. В. М., Федорова Е.В., Демин Н.В. . Использование методов тканевойинженерии в хирургическом лечении гипоспадии у детей // 3-я Всероссийская конференция«мужское здоровье». ‒ 2006. ‒ C.
8-9.6. Abouassaly R., Angermeier K. W. Augmented anastomotic urethroplasty // The Journal of urology.‒ 2007. ‒ T. 177, № 6. ‒ C. 2211-2216.7. Andrich D. E., Mundy A. R. What is the best technique for urethroplasty? // european urology. ‒2008. ‒ T. 54, № 5. ‒ C. 1031-1041.8. Atala A. Regenerative medicine strategies // Journal of pediatric surgery. ‒ 2012.
‒ T. 47, № 1. ‒ C.17-28.9. Atala A., Bauer S. B., Soker S., Yoo J. J., Retik A. B. Tissue-engineered autologous bladders forpatients needing cystoplasty // The lancet. ‒ 2006. ‒ T. 367, № 9518. ‒ C. 1241-1246.10. Badylak S. F., Freytes D. O., Gilbert T. W. Extracellular matrix as a biological scaffold material:structure and function // Acta biomaterialia. ‒ 2009. ‒ T. 5, № 1.
‒ C. 1-13.11. Barbagli G., De Angelis M., Romano G., Lazzeri M. Long-term followup of bulbar end-to-endanastomosis: a retrospective analysis of 153 patients in a single center experience // The Journal ofurology. ‒ 2007. ‒ T. 178, № 6. ‒ C. 2470-2473.12.
Bhargava S., Patterson J. M., Inman R. D., MacNeil S., Chapple C. R. Tissue-engineered buccalmucosa urethroplasty—clinical outcomes // European urology. ‒ 2008. ‒ T. 53, № 6. ‒ C. 1263-1271.13. Carson C. Urethroplasty: a model for international progress in urology // Contemporary Urology. ‒2006. ‒ T. 18, № 3. ‒ C. 11.14. Choi J. S., Lee S. J., Christ G. J., Atala A., Yoo J.
J. The influence of electrospun aligned poly(epsilon-caprolactone)/collagen nanofiber meshes on the formation of self-aligned skeletal musclemyotubes // Biomaterials. ‒ 2008. ‒ T. 29, № 19. ‒ C. 2899-2906.15. De Filippo R. E., Yoo J. J., Atala A. Urethral replacement using cell seeded tubularized collagenmatrices // The Journal of urology. ‒ 2002. ‒ T. 168, № 4. ‒ C. 1789-1793.16. El Kassaby A., AbouShwareb T., Atala A. Randomized comparative study between buccalmucosal and acellular bladder matrix grafts in complex anterior urethral strictures // The Journal ofurology. ‒ 2008. ‒ T. 179, № 4.
‒ C. 1432-1436.17. Eltahawy E. A., Virasoro R., Schlossberg S. M., McCammon K. A., Jordan G. H. Long-termfollowup for excision and primary anastomosis for anterior urethral strictures // The Journal ofurology. ‒ 2007. ‒ T. 177, № 5. ‒ C. 1803-1806.18. Engelhardt E.-M., Micol L. A., Houis S., Wurm F.
M., Hilborn J., Hubbell J. A., Frey P. Acollagen-poly (lactic acid-co-ɛ-caprolactone) hybrid scaffold for bladder tissue regeneration //Biomaterials. ‒ 2011. ‒ T. 32, № 16. ‒ C. 3969-3976.19. Feng C., Xu Y.-m., Fu Q., Zhu W.-d., Cui L. Reconstruction of three-dimensional neourethra usinglingual keratinocytes and corporal smooth muscle cells seeded acellular corporal spongiosum // TissueEngineering Part A. ‒ 2011. ‒ T.
17, № 23-24. ‒ C. 3011-3019.7820. Feng C., Xu Y. M., Fu Q., Zhu W. D., Cui L., Chen J. Evaluation of the biocompatibility andmechanical properties of naturally derived and synthetic scaffolds for urethral reconstruction // Journalof Biomedical Materials Research Part A. ‒ 2010. ‒ T. 94, № 1. ‒ C. 317-325.21.
Fiala R., Vidlar A., Vrtal R., Belej K., Student V. Porcine small intestinal submucosa graft forrepair of anterior urethral strictures // European urology. ‒ 2007. ‒ T. 51, № 6. ‒ C. 1702-1708.22. Fossum M., Skikuniene J., Orrego A., Nordenskjöld A. Prepubertal follow‐up after hypospadiasrepair with autologous in vitro cultured urothelial cells // Acta Paediatrica. ‒ 2012. ‒ T. 101, № 7. ‒ C.755-760.23. Fu Q., Deng C. L., Song X. F., Xu Y. M. Long‐term study of male rabbit urethral mucosareconstruction using epidermal cell // Asian journal of andrology.