Диссертация (1140612), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Таким образом, можно говорить о высокой эффективности комплекса терапевтических мероприятий с применением геля «Метрогил-Дента» для снижения общей бактериальной нагрузки и обсемененности пародонта бактериями рода Aggregatibacter, в частности A. actinomycetemcomitans, в то время как снижение долей остальных пародонтопатогенов в бактериальном консорциуме было незначительным. Негативным результатом традиционного консервативного лечения, которое проводили пациентам группы 2, следует считать снижение относительного содержания в микробном консорциуме ПК представителей условно патогенной микрофлоры полости рта V. parvula и S. sanguinis.
Количественная оценка состава микробиома пародонта у пациентов с ХГП до и после проведения ФДТ выполнялась по методике, полностью аналогичной той, которая была использована для исследования результатов ПЦР, полученных в группе 2. Статистические данные, характеризующие усреднённое по группам содержание основных пародонтопатогенов и потенциальных пародонтопротекторов, представлены в Таблице 11.
Полученные данные свидетельствуют о высокой эффективности комплекса консервативного лечения с применением фотодинамической терапии для снижения общей бактериальной нагрузки, которая через 30 дней после лечения у пациентов основной группы 3 уменьшилась в 5,3 раза по сравнению с исходным уровнем. Проведенные расчёты позволили также сделать следующие выводы относительно характера изменения относительной численности пародонтопатогенов и потенциальных пародонтопротекторов в микробном консорциуме пародонтальных карманов после лечения с применением ФДТ.
До лечения относительный уровень содержания A. actinomycetemcomitans в поддесневом содержимом, в отличие от других пародонтопатогенов, у пациентов с ХГП основной группы 3 соответствовал аналогичному показателю у лиц с интактным пародонтом (контрольная группа 1). Сравнение результатов обследования пациентов основной группы 3 в динамике позволило установить, что консервативное лечение с применением ФДТ увеличивало величину относительного Ct для этого патогена с 14,6 до 19,4. Таким образом, относительная обсеменённость поддесневого зубного налёта в результате лечения в к.о.е. снижалась и становилась в 28 раз ниже, чем в группе лиц с интактным пародонтом. Имеющиеся в литературе данные не позволяют однозначно оценить, насколько благоприятным для пациента является такой результат. Не исключено, что сложность с интерпретацией этих данных обусловлена недостаточной селективностью работы применяющей в нашем исследовании ПЦР–системы, которая наряду с A. actinomycetemcomitans может реагировать на находящихся в образцах других представителей рода Aggregatibacter, например, непатогенных для человека A. aphophilus или A. segnis.
Таблица 11. Содержание микроорганизмов в поддесневой микрофлоре у лиц с интактным пародонтом (группа 1) и пациентов с ХГП основной группы 3 до лечения и через 30 дней после лечения с применением ФДТ
Группа 1 | Группа 3 до лечения | Группа 3 через 30 дней после лечения | ||||
Знач. ± СКО | Знач. ± СКО | Знач. ± СКО | ||||
Мин | Макс | Мин | Макс | Мин | Макс | |
16s (абсолютный Сt) | 23,006±2,724 | 19,504±2,053 | 21,934±1,420 | |||
17,600 | 28,500 | 16,600 | 23,700 | 19,300 | 24,200 | |
A.actinomycetemcomitans (∆Ct ) | 14,500±4,981 | 14,608±3,049 | 19,412±3,308 | |||
3,800 | 22,100 | 7,600 | 19,300 | 12,700 | 25,000 | |
P. gingivalis (∆Ct ) | 15,935±4,117 | 10,450±7,617 | 13,377±5,531 | |||
9,400 | 23,300 | 1,400 | 22,900 | 4,900 | 23,000 | |
P. intermedia (∆Ct ) | 16,415±3,790 | 16,215±7,149 | 16,712±4,581 | |||
7,500 | 23,300 | 5,700 | 25,700 | 7,400 | 22,700 | |
T. forsythia (∆Ct ) | 15,573±4,629 | 7,527±4,641 | 10,911±4,295 | |||
7,600 | 23,300 | 2,300 | 20,500 | 5,100 | 23,000 | |
T. denticola (∆Ct ) | 17,473±4,843 | 11,731±7,005 | 13,654±4,859 | |||
7,200 | 24,100 | 3,500 | 25,000 | 4,200 | 21,200 | |
V. parvula (∆Ct ) | 11,669±5,171 | 14,554±4,304 | 13,346±4,869 | |||
4,700 | 20,000 | 6,700 | 20,000 | 4,400 | 19,600 | |
S. sanguinis (∆Ct ) | 12,873±5,215 | 16,046±3,887 | 12,526±4,183 | |||
5,300 | 22,000 | 7,800 | 22,000 | 7,600 | 22,000 |
Примечание: указаны средние значения порогового цикла ПЦР – Сt ± стандартное отклонение, минимальное и максимальное значения
При анализе содержания ключевого пародонтопатогена P. gingivalis можно сделать однозначный вывод о том, что его доля в микробном консорциуме в результате комплексного лечения с применением ФДТ в среднем снижалась в 8 раз, но по–прежнему оставалась на более высоком уровне, чем у лиц с интактным пародонтом в среднем на 2,5 цикла (в 6 раз).
Исследование содержания такого пародонтопатогена, как P. intermedia, показало, что его доля в консорциуме у пациентов основной группы 3 до лечения не отличалась от соответствующего показателя у лиц с интактным пародонтом и через 30 дней после лечения с применением ФДТ практически не изменялась.
Доля T. forsythia в поддесневом микробиоме у пациентов с ХГП до лечения было значительно выше, чем у лиц с интактным пародонтом (различия между группами составляли 8,1 цикла или ~274 раза). Через 30 дней после лечения с применением ФДТ содержание T. forsythia в микробиоме ПК резко снижалось, что сокращало разницу средних показателей между группами 1 и 3 до 4,9 циклов (30 раз). Тем не менее, полной нормализации содержания T. forsythia в составе микробиома ПК не произошло, а тем более, эрадикации данного патогена достигнуто не было.
Для такого патогена, как T. denticola, первоначальная разница между группами 1 и 3 составляла 5,8 цикла, то есть у пациентов с ХГП относительное содержание этого микроорганизма в поддесневом микробиоме было в 55 раз выше, чем у лиц с интактным пародонтом. Через 30 дней после комплексного лечения с применением ФДТ у пациентов с ХГП группы 3 доля T. denticola в микробном консорциуме снизилась на 2 цикла (или в 4 раза), а разница по этому показателю между группами 1 и 3 уменьшилась до 3,8 цикла (14 раз).
При исследовании содержания потенциальных пародонтопротекторов установлено, что у пациентов группы 3 до начала лечения доля V. parvula в поддесневом микробиоме была достоверно ниже, чем у лиц с интактным пародонтом в группе 1 (различия между группами составляли в среднем 2,9 цикла или 7,5 раза). Через 30 дней после лечения с применением ФДТ относительное содержание V. parvula у пациентов группы 3 возросло на 1,2 цикла (в 2,3 раза), а разница по этому показателю с контрольной группой сократилась до 3 раз. Таким образом, V. parvula оказалась несколько менее чувствительной к действию ФДТ, чем большинство исследованных нами патогенов, что привело к некоторому увеличению её доли в консорциуме через 30 дней после лечения.
По содержанию второго потенциального пародонтопротектора – S. sanguinis – до начала лечения имелись существенные различия между контрольной группой 1 и основной группой 3 на 3,2 цикла (9,1 раза). Через 30 дней после лечения с применение ФДТ содержание S. sanguinis возросло в 11,3 раза (на 3,5 цикла), и практически сравнялось с нормальным уровнем (разница между контрольной группой и основной группой 3 после лечения составляла 0,25 цикла, что можно считать несущественным).
Отдельный интерес представляет анализ данных по величине среднеквадратичного отклонения показателя «относительного Ct» в пределах группы (Таблица 12). Как и в случае средней величины «относительного Ct» по этому показателю не удалось выявить общих закономерностей для всех патогенов или потенциальных пародонтопротекторов, поэтому существует необходимость описать характер изменения этого параметра для каждого вида бактерий.
Таблица 12. Сравнение среднеквадратичных отклонений «относительного Ct» у лиц контрольной группы 1 и пациентов с ХГП основной группы 3 до лечения и через 30 дней после лечения с применением ФДТ
Вид бактерий | Группа 1 | Группа 3 до лечения | Группа 3 через 30 дней после лечения |
A.actinomycetemcomitans | 4,9 | 3,0 | 3,3 |
P. gingivalis | 4,1 | 7,6 | 5,5 |
P. intermedia | 3,8 | 7,2 | 4,6 |
T. forsythia | 4,6 | 4,6 | 4,3 |
T. denticola | 4,8 | 7,0 | 4,9 |
V. parvula | 5,2 | 4,3 | 4,9 |
S. sanguinis | 5,2 | 3,9 | 4,2 |
Примечание: указаны среднеквадратичные отклонения «относительного Ct»
Для A. actinomycetemcomitans, в отличие от других пародонтопатогенов, величина СКО «относительного Ct» в группе контроля была на ~2 цикла выше, чем в основной группе 3. Проведенное лечение практически не оказало влияния на величину этого показателя в основной группе 3, хотя и приводило к существенному снижению обсемененности пародонта A. actinomycetemcomitans. Таким образом, можно сделать вывод о хорошей предсказуемости эффекта от применения ФДТ: исследование не выявило заметной доли пациентов, у которых A. actinomycetemcomitans проявляла бы устойчивость к лечению методом ФДТ.
При анализе усредненных показателей содержания такого ключевого пародонтопатогена, как P. gingivalis, показатель разброса «относительного Ct» в группе контроля был на ~3,5 цикла ниже, чем в основной группе 3 до лечения. Через 30 дней после лечения с применением ФДТ величина СКО в основной группе 3 уменьшилась на 2 цикла, что говорит о высокой эффективности и предсказуемости этого метода лечения в отношении P. gingivalis.
В случае пародонтопатогена P. intermedia характер изменения СКО под действием ФДТ сходен с P. gingivalis: в контрольной группе величина показателя СКО на 3,6 цикла ниже, чем в основной группе 3 до начала лечения. Через 30 дней после лечения с ФДТ, как и в случае с P. gingivalis, происходило существенное уменьшение СКО содержания P. intermedia в основной группе 3 (на 2,6 цикла). Этот результат особенно показателен в связи с тем, что доля P. intermedia в составе микробиома под действием ФДТ практически не изменилась, что позволяет предположить, что ФДТ более эффективно поражает P. intermedia у лиц с высокой долей этого вида в микробном консорциуме, но существенно слабее – при его низком содержании. Поскольку у пациентов с ХГП основной группы 3 доля P. intermedia не превышала аналогичный показатель у лиц с интактным пародонтом, можно предположить, что для пациентов с более тяжелой формой ХГП (большей длительностью заболевания), имеющих более высокий уровень P. intermedia, ФДТ могла бы показать более заметный эффект.