Диссертация (1140160), страница 15
Текст из файла (страница 15)
3.6).115Рисунок 3.6.Скриншот фрагмента расчета вероятности прогрессированияпатологического процесса ШМЧувствительность модели составила 82,7%, специфичность — 84,0%,точностьмодели—83,2%.Положительноепрогностическоезначение(вероятность обнаружения болезни у лиц с положительным результатом теста) —88,3%. Отрицательное прогностическое значение — вероятность отсутствияболезни у лиц с отрицательным результатом теста — 76,8%.Таким образом, полученные результаты клинико-анамнестических идиагностических особенностей в исследуемых группах больных позволиливыявить статистически значимые факторы риска развития злокачественнойпатологииШМ.Однаковыявленнаянедостаточнаячувствительностьиспецифичность предложенной модели прогнозирования обусловливают поискдополнительных критериев.
В связи с этим мы провели исследование повыявлению патогенетических факторов риска развития РШМ путем детального116анализа молекулярно-биологических особенностей с вышеуказанными факторамириска при патологических процессах ШМ, ассоциированных с ПВИ.3.2. Молекулярно-биологические особенности процессовацетилирования, метилирования и пролиферации при заболеваниях шейкиматки, ассоциированных с папилломавирусной инфекциейДля выявления особенностей процесса ацетилирования при заболеванияхШМ провели оценку уровней экспрессий гистондеацетилазы HDAC 1 игистондеацетилазы HDAC 2 в ткани ШМ у больных в исследуемых группах(диаграмма 3.2.1, табл.
3.2.1, рис. 3.2.2).Максимальные уровни экспрессий HDAC 1 и HDAC 2 отмечались в 4 и 5группах (по сравнению с первыми тремя группами), составляя соответственно: в 4группе HDAC 1 — 3,53, а HDAC 2 — 3,83; в 5 группе HDAC 1 — 1,7, а HDAC 2—1,8.С целью изучения молекулярно-биологических особенностей процессаметилирования при патологических процессах ШМ были оценены уровниэкспрессии ДНК-метилтрансферазы 1(DNMT1) и ДНК-метилтрансферазы 2(DNMT2) в ткани ШМ у исследуемых групп больных (диаграмма 3.2.2, табл.3.2.1. рис. 3.2.3.).Наибольшие показатели экспрессий DNMT1 и DNMT2 отмечались в 4 и 5группах (по сравнению с первыми тремя группами), составляя соответственно: в 4группе DNMT1 — 5,51, а DNMT2 — 5,50; в 5 группе DNMT1 — 3,63, а DNMT2— 3,61.Для оценки уровней пролиферативной активности при заболеваниях ШМбыли определены показатели экспрессии Ki-67 и р-53 в ткани ШМ больных 5групп (диаграмма 3.2.3, диаграмма 3.2.4, табл.
3.2.1, рис. 3.2.1). Уровниэкспрессий Ki-67 и р-53 отмечались в 4 и 5 группах (по сравнению с первымитремя группами), составляя соответственно: в 4 группе Ki-67 — 86,1, а р-53 —8,2; в 5 группе Ki-67 — 77,2, а р-53 — 3,61.117Таблица 3.2.1Молекулярно-биологические показатели экспрессий геновацетилирования, метилирования и пролиферации (M±SD)1-ягруппа2-ягруппа3-ягруппаHDAC 14-ягруппа3,53±0,110,21±0,081,20±0,10* 1,54±0,09*Р1-4<0,001Р2-4<0,001Р3-4<0,001HDAC 20,30±0,071,29±0,06* 1,42±007*3,83±0,145-ягруппа1,7±0,09Р1-5<0,001Р4-5=0,0081,8±0,12Р1-4<0,001 Р1-5<0,001Р2-4<0,001 Р2-5<0,001Р3-4<0,001 Р4-5=0,023DNMT 10,53±0,061,51±0,07* 3,20±0,06*/** 5,52±0,083,63±0,09Р1-4<0,001 Р1-5<0,001Р2-4<0,001Р3-4<0,001DNMT 20,51±0,091,52±0,08* 3,21±0,06*/** 5,50±0,05Р2-5<0,001Р3-5<0,0013,61±0,07Р1-4<0,001 Р1-5<0,001Р2-4<0,001 Р2-5<0,001Р3-4<0,001 Р4-5=0,011Ki-6720,4±1,628,9±1,7*31,0±2,3*86,1±2,977,2±2,8Р1-4<0,001 Р1-5<0,001Р2-4<0,001 Р2-5<0,001Р3-4<0,001 Р3-5<0,0011181-яр-532-я3-я4-я5-ягруппагруппагруппагруппагруппа1,1±0,43,0±0,2*6,0±0,4*/**8,2±0,56,5±0,3Р1-4<0,001 Р1-5<0,001Р2-4<0,001 Р2-5=0,017Р3-4<0,001*p<0,05 статистически значимые различия по сравнению с 1 группой** p<0,05 статистически значимые различия по сравнению с 2 группой***p<0,05 статистически значимые различия по сравнению с 3 группой****p<0,05 статистически значимые различия по сравнению с 4 группой(критерий Манна-Уитни)3,53,532,521,51,51,210,50,20HDAC 11,71193,843,532,51,821,41,31,510,30,50HDAC 2Диаграмма 3.2.1.
Уровень экспрессии HDАС при заболеваниях ШМ висследованных группах больных65,5543,23211,50,50DNMT 13,612065,5543,63,23211,50,50DNMT 2Диаграмма 3.2.2. Уровень экспрессии DNMT при заболеваниях ШМ висследованных группах больных.86907780706050403020293120100Ki-67121Диаграмма 3.2.3. Уровень экспрессии Кi-67 при заболеваниях ШМ висследованных группах больных88766654332110P-53Диаграмма 3.2.4. Уровень экспрессии p-53 при заболеваниях ШМ висследованных группах больных122Рисунок 3.2.1.
ИГХ-экспрессия Ki-67 (CIN III)сРисунок 3.2.2. ИГХ-экспрессия HDAC 1 и HDAC 2 (CIN III)123Рисунок 3.2.3. ИГХ-экспрессия DNMT1 и DNMT2 (CIN III)С помощью корреляционного анализа Пирсона нами были определенызависимости между молекулярно-биологическими показателями и степеньювыраженности патологического процесса ШМ (табл. 3.2.2).Таблица 3.2.2Корреляция показателей экспрессий генов со степенью выраженностипатологии ШМПоказатель КоэффициентЗначимостькорреляциикоэффициентаПирсона (r)корреляции (p)Степень зависимостиHDAC10,7024<0,0001сильнаяHDAC20,7123<0,0001сильнаяDNMT10,736<0,0001сильнаяDNMT20,749<0,0001сильнаяKi-670,864<0,0001сильная124Показатель КоэффициентЗначимостькорреляциикоэффициентаПирсона (r)корреляции (p)р-53Степень зависимостисильная<0,00010,805С помощью корреляционного анализа Пирсона нами была выявлена прямаясильная зависимость между HDAC1 (r=0,7024 р<0,0001), HDAC2 (r=0,7123р<0,0001), DNMT1 (r=0,7360 р<0,0001), DNMT2 (r=0,7494 р<0,0001), Ki-67(r=0,8643 р<0,0001), p-53 (r=0,864р<0,0001) и степенью прогрессированияпатологии ШМ (рис.
3.2.4-3.2.9).Correlation: r = 0,70243,53,02,5HDAC I2,01,51,00,50,0-0,51234группаРисунок3.2.4.Корреляционныйанализпрогрессирования патологии ШМ (r=0,7024 р<0,0001)50,95 Conf.Int.междуHDAC1истепенью125Correlation: r =0,71234,03,53,0HDAC II2,52,01,51,00,50,0-0,51234группаРисунок3.2.5.Корреляционныйанализ50,95 Conf.Int.междуHDAC2истепеньюпрогрессирования патологии ШМ (r=0,7123 р<0,0001)Correlation: r = 0,73601101009080DNMT1706050403020101234группаРисунок3.2.6.Корреляционныйанализпрогрессирования патологии ШМ (r=0,7360 р<0,0001)50,95 Conf.Int.междуDNMT1истепенью126Correlation: r = 0.7494765DNMT243210-112345группаРисунок3.2.7.Корреляционныйанализ0,95 Conf.Int.междуDNMT2истепеньюпрогрессирования патологии ШМ (r=0,7494 р<0,0001)Correlation: r = 0,86431101009080Ki-6770605040302010123группа450,95 Conf.Int.Рисунок 3.2.8.
Корреляционный анализ между Ki-67 и степенью прогрессированияпатологии ШМ (r=0,8643 р<0,0001)127Correlation: r = 0,80506108р-536420123группа450,95 Conf.Int.Рисунок 3.2.9. Корреляционный анализ между p-53 и степенью прогрессированияпатологии ШМ (r=0,80506 р<0,0001)Нами был проведен многофакторный анализ (бинарная логистическаярегрессия) с учетом полученных клинико-молекулярных показателей для оценкириска прогрессирования (прогнозирования) и злокачественной трансформации(переход в CIN 3 и инвазивный плоскоклеточный рак), в связи с чем былапостроена значимая модель (Хи-квадрат=92,620 p<0,00001) для оценки факторовриска.Коэффициентыуравнениянаиболеезначимыхклиническихпрогностических факторов прогрессии, высчитанных на основании расчетаформулы бинарной логистической регрессии, представлены в табл.
3.2.3.Таблица 3.2.3Коэффициенты уравнения регрессионной модели128ЗначимостьПоказательКоэффициентыкоэффициента вуравнениярегрессионноймоделиКонстанта-42,1070,00912,401<0,0012,314<0,0012,195<0,0011,3860,0061,3710,0121,3420,02931,3280,00211,3040,00431,2980,00581,2750,02771,2380,00351,1680,0125Диагноз, соответствующийдоброкачественным процессам (0), CIN I -1,CIN II – 2 CIN I III – 3Вирусная нагрузка (ВПЧ-ВР) более510 геномных эквивалентовПерсистенция ВПЧ-ВРМорфологически верифицированныйCIN в анамнезеИППП микст-инфекции (3 и более)Рецидивирующий бактериальныйвагинозТравматические повреждения ШМ(послеродовые, постабортные и др.)Возраст более 40 летРаннее начало регулярной половойжизни (до 18 лет) без применениябарьерных методов контрацепцииБолее 7 половых партнеров (смомента сексуального дебюта)Одновременное сочетание двух иболее типов ВПЧ-ВРХронический цервицит129Рак органов репродуктивной системы:1,0290,00270,4850,04300,8370,0220,820,0088HDAC11,435<0,001HDAC21,504<0,001DNMT11,406<0,001DNMT21,437<0,001Ki-671,2040,006р-531,1370,012наследственностьДругие онкологические заболеваниянаследственностьСочетание миомы матки саденомиозом и/или гиперпластическимпроцессом эндометрияТабакокурение (в течение более чем 7лет и не менее 5 сигарет в день).Для оценки риска прогрессирования и злокачественной трансформации мыполучили формулу 8:Z= -42,107 + 2,401 * Х1 + 2,314*Х2 + 2,195*Х3 + 1,386*Х4 + 1,371*Х5 +1,342*Х6 + 1,328*Х7+ 1,304*Х8 + 1,298*Х9 + 1,275*Х10 + 1,238*Х11 +1,168*Х12 + 1,029*Х13 + 0,485*Х14 + 0,837*Х15 + 0,82*Х16 + 1,435*Х17 +1,504*Х18 + 1,406*Х19 + 1,437*Х20 + 1,204*Х21 + 1,137*Х22,где * — умножение3,714 — натуральный логарифмХ 1 — Диагноз, соответствующий доброкачественным процессам (0), CIN I-1, CIN II – 2 CIN I III – 3130Х 2 — Вирусная нагрузка (ВПЧ-ВР) более 105 геномных эквивалентов —вышеХ 3 — Персистенция ВПЧ-ВРХ 4 — Морфологически верифицированный CIN в анамнезеХ 5 — ИППП микст-инфекции (3 и более)Х 6 — Рецидивирующий бактериальный вагинозХ 7 — Травматические повреждения ШМ (послеродовые, постабортные идр.)Х 8 — Возраст от 40 летХ 9 — Раннее начало регулярной половой жизни (до 18 лет) без применениябарьерных методов контрацепцииХ 10 — Более 7 половых партнеров (с момента сексуального дебюта)Х 11 — Одновременное сочетание двух и более типов ВПЧ-ВРХ 12 — Хронический цервицитХ 13 — Рак органов репродуктивный системы: наследственностьХ 14 — Другие онкологические заболевания наследственностьХ 15 — Сочетание миомы матки с аденомиозом и/или гиперпластическимпроцессом эндометрияХ 16 — Табакокурение (в течение более чем 7 лет и не менее 5 шт.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
