Диссертация (1140008), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Повторное центрифугирование для окончательной сепарации клеточныхэлементов проводили спустя 10 мин. при тех же характеристиках. Полученную сыворотку набирали в шприц и вводили подслизисто по 1 мл в области переходной68складки в области 4 квадрантов обеих челюстей.
Процедуру повторяли с интервалом в 7 – 10 суток.Рисунок 2.6 – Стерильныевакуумные пробирки для заборавенозной кровиРисунок 2.7 – Лабораторная центрифуга«ЕВА-200»(«Hettich-Zentrifugen», Германия)Полученная таким образом аутологичная сыворотка полностью лишена клеточных элементов и содержит только низкомолекулярные факторы репрограммирования макрофагов из фенотипов М0 и М1 в фенотип М2: IL-4, IL-10 и IL-12, IL13, CSF-1, TGF-β.Пациентам подгрупп «ОХК» и «ОYК» проводили комплексные профилактические и лечебные мероприятия, которые включали в себя: ротовые ванночки с препаратом «НанАргол» (как в подгруппах «ОХН» и «ОYН») и курсы аутосеротерапии (как в подгруппах «ОХМ» и «ОYМ»).2.6 Методы статистического планирования и обработки результатов исследованийОбъем выборки в каждой подгруппе больных был обоснован методом статистического планирования исследований с учетом точности методов клинического,лабораторного и функционального исследований, аналитической вариабельностиполучаемых показателей для порогового уровня статистической значимости 5%при мощности 80% 100.69При этом была проведена проверка нормальности распределения оцениваемых показателей и нулевой гипотезы с определение ошибок 1 и 2 рода.
Расчет выборки проводили по формуле 2.1(2.2)где: Sxo и Sxk – стандартные отклонения сравниваемых показателей в опытнойгруппе и группе сравнения;Δ – требуемая величина различий между средними значениями показателей сравниваемых групп;Zα и Zβ - критические значения нормального распределения, соответствующие заданным уровням ошибок 1 и 2 рода, которые определяются по таблицам.Математическую обработку результатов исследований проводили с помощью персонального компьютера и стандартного программного обеспечения. Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета Statistica 8.0 для Windows, по стандартным методикам вариационной статистики.В случае нормального распределения величин в выборках сравнение проводили путем анализа значений t–критерия Стьюдента и F–критерия Фишера.t–критерий Стьюдента – общее название для класса методов статистической проверки гипотез (статистических критериев), основанных на распределенииСтьюдента.
Наиболее частые случаи применения t–критерия связаны с проверкойравенства средних значений в двух выборках.F–критерий Фишера – статистический критерий, тестовая статистика которого при выполнении нулевой гипотезы имеет распределение Фишера (F–распределение).В случае нарушения нормальности распределения величин внутри выборокиспользовали непараметрический критерий Манна–Уитни. U–критерий Манна–Уитни – статистический критерий, используемый для оценки различий междудвумя независимыми выборками по уровню какого–либо признака, измеренногоколичественно.
Позволяет выявлять различия в значении параметра между малымивыборками.70При анализе взаимосвязей внутри пары количественных или порядковых качественных признаков использовали корреляционный анализ по методу Спирмана,использовали методы статистической оценки согласия с помощью 2.Уровень статистической значимости во всех видах статистического анализабыл одинаковым: 95% (р<0,05).71ГЛАВА 3.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙВ настоящей главе описаны результаты полученных нами наблюдений за пациентами, проходящими ортодонтическое лечение. Всех больных осматривали иобследовали непосредственно перед началом ортодонтического лечения, по завершении санационных мероприятий и спустя неделю после проведения профессиональной гигиены полости рта. Нами учтены наблюдения только за теми пациентами, которые смогли обследоваться в начале ортодонтического лечения и спустя6 месяцев. Это срок повторного обследования обусловлен тем, что минимальнодлительность лечения составляла 6 месяцев, хотя у многих больных она продолжалась в течение 1, 1,5 и 2 лет. Кроме того, мы считаем, что за период 6 месяцев втканях пародонта под влиянием как ортодонтических сил, так и проводимых намипрофилактических и лечебных мероприятий произошли достаточно серьезные изменения, которые можно зафиксировать с помощью использованных методов обследования.
Среди таковых были: клинические методы, молекулярно-биологические, биохимические и иммунологические, гистоморфологические и рентгенологические. При анализе результатов исследований проводили статистическое сравнение показателей до начала ортодонтического и пародонтологического лечения испустя 6 месяцев. Кроме того, провели сравнение показателей между пациентамиосновной группы и группы сравнения, а также между больными подгрупп с выявленным полиморфизмом генов интерлейкинов и без такового.3.1 Результаты молекулярно-биологических исследований по выявлению полиморфизма генов интерлейкинов IL-1α и IL-1β72Поскольку от того, имеется ли у обследованных больных полиморфизм геновинтерлейкинов, зависело формирование подгрупп наблюдения, мы сначала описываем результаты этого исследования.Прежде всего нам было необходимо выяснить частоту носительства полиморфизма генов IL-1α и IL-1β в выбранной нами возрастной популяции пациентов,нуждающихся в ортодонтическом лечении.
Для этого было проведено на протяжении года предварительное молекулярно-генетическое обследование 300 больныхобоего пола в возрасте от 16 до 44 лет. При этом удалось определить, что частотыгенотипов у обследованных соответствовали равновесию Харди-Вайнберга. А частота полиморфизма генов в локусах IL-1α –899, IL-1β +3953 (rs1143644), составила, соответственно, 12,2 и 14,3%. В связи с этим, для формирования сопоставимых при последующем статистическом анализе подгрупп пациентов нам необходимо было выявить около 80 больных с полиморфизмом генов интерлейкинов IL1α и IL-1β.
Поэтому дополнительно было проведено обследование еще 350 пациентов, среди которых мы также выявили носителей полиморфизма генов. Всего висследовании участвовали 79 таких пациентов. Таким образом, на полиморфизмгенов интерлейкинов нами были обследованы 650 человек. Имеющие полиморфизм генов были в разное время включены в подгруппы «OYH», «OYM», «OYK»и «CY» (таблица 2.2).3.2 Результаты клинических исследованийКак описано в главе 2, клиническое исследование включало детальное стоматологическое обследование, в которое входило ортодонтическое и пародонтологическое обследования.
Поскольку в задачах нашей работы не было оценки эффективности проведения ортодонтического лечения, мы сосредоточились только наоценке состояния тканей пародонта, местного гомеостаза и характера ответа организма пациента на это лечение. Для большей объективизации исследования использовали при проведении пародонтологического обследования компьютерную73диагностическую систему «Florida probe», которая позволяет минимизироватьсубъективизм визуально-инструментального обследования пародонтологом.При оценке жалоб пациентов обращали внимание на такие показатели, какналичие неприятных ощущений в области зубов и десен, наличие кровоточивостидесны во время проведения гигиенических мероприятий, приема пищи или спонтанно, болезненность при жевании, неприятный запах изо рта, появление симптомов отечности и припухлости в области тканей пародонта.
Пальпировали регионарные лимфоузлы, оценивали перкуторную реакцию со стороны периодонта зубов, при компьютерном обследовании определяли индексы гигиены и кровоточивости десны. При анализе диагностических карт «Florida probe» рассчитывалисредний показатель глубины пародонтальных карманов.В таблице 3.1 представлены результаты динамического наблюдения за показателем зубного налета у пациентов всех обследованных подгрупп.
Следует отметить, что даже после проведения профессиональной гигиены полости рта показатели индекса зубного налета были высокими и в среднем среди всех обследованныхсоставили 1,64±0,02 балла. Статистически значимых различий между средними показателями в группах не обнаружено, также, как и между подгруппами с полиморфизмом генов интерлейкинов и без него (р>0,05). Таким образом, по показателяминдекса гигиены в начале исследования все подгруппы пациентов были практически тождественны.Таблица 3.1 – Изменения показателей индекса зубного налета у пациентовв ходе исследования (баллы, М±m, Δ, n, t, р)Подгруппы пациентов«ОХН»«ОХМ»«ОХК»«ОYН»«ОYМ»«ОYК»«СХ»«CY»nВ началеисследованияЧерез 6месяцевИзменения(Δ)tр28252720212131271,6±0,051,5±0,051,6±0,061,8±0,071,7±0,061,8±0,061,4±0,041,7±0,060,3±0,050,8±0,050,2±0,040,5±0,041,1±0,050,4±0,042,3±0,062,6±0,06– 1,3– 0,8– 1,4– 1,3– 0,6– 1,4+ 0,9+ 0,918,49,919,416,17,719,412,510,6<0,05<0,05<0,05<0,05<0,05<0,05<0,05<0,0574Спустя 6 месяцев картина изменилась.
Как следует из таблицы, во всех подгруппах основной группы было отмечено статистически значимое уменьшениесредних значений показателя зубного налета (р<0,05). Наиболее выраженным онобыло в подгруппах «ОХК» и «ОYК» и составило 1,4 балла. Наименьшим – в подгруппах «ОХМ» и «ОYМ» (0,8 – 0,6 балла). Различия между этими подгруппамиоказались статистически значимы (р<0,05). То есть, совместное применение«НанАргола» и аутологичной сыворотки крови значимо подавляло образованиезубного налета у обследованных основной группы в сравнении с теми пациентами,которые местно не использовали «НанАргол», а только проводили профилактику илечение с помощью сыворотки крови.
Интересно, что мы не обнаружили статистически значимых различий по динамике показателя между больными подгрупп«ОХК», «ОYК» и «ОХН», «ОYН». Это свидетельствует о том, что на показательзубного налета в наибольшей степени влияет местное применение противомикробного препарата «НанАргола», чем инъекций аутологичной сыворотки. В то жевремя, совместное использование этих двух методов профилактики образованиязубного налета наиболее эффективно и, по-видимому, они дополняют друг друга.Что касается группы сравнения, то в обеих ее подгруппах отмечено такжестатистически значимое, но увеличение средних значений показателя до 2,3 – 2,6балла, то есть в среднем на 0,9 балла.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
