Диссертация (1140008), страница 17
Текст из файла (страница 17)
То есть высокое содержание восстановленного глутатиона (тиоловый статус), свидетельствует о наличии антиоксидантной защиты, достаточной для предотвращения оксидативного стресса и связанных с ним повреждений липидов, белков и ДНК.Мы изучили тиоловый статус сыворотки крови обследованных пациентов(таблица 3.12). Таким образом, мы попытались оценить общую реакцию организмабольных на оксидативный стресс, обусловленный как воспалительными заболеваниями пародонта, так и проводящимся у них ортодонтическим лечением.Таблица 3.12 – Изменения показателей тиолового статуса сыворотки кровиу пациентов в ходе исследования (мкмоль/л, М±m, Δ, n, t, р)Подгруппыпациентов«ОХН»«ОХМ»«ОХК»«ОYН»«ОYМ»«ОYК»«СХ»«CY»n2825272021213127В началеисследования296,5±28,3284,3±27,4297,6±27,9284,2±29,6279,1±28,7288,4±28,1269,5±25,4272,2±26,7Через 6месяцев328,2±29,8377,1±31,0418,2±32,2319,4±30,8376,6±30,1403,5±29,8254,2±27,0248,8±28,1Изменения(Δ)+ 31,7+ 92,8+ 120,6+ 35,2+ 97,5+ 115,1– 15,3– 23,4tр0,772,22,80,822,32,80,40,6= 0,44< 0,05< 0,05= 0,42< 0,05< 0,05= 0,68= 0,55Примечание: референтное значение – 515±21мкмоль/л.Анализ таблицы показывает, что в начале исследования и лечения тиоловыйстатус у обследованных больных обеих групп был существенно ниже референтногозначения и не достигал его в среднем на 44,9% (р<0,05).
В процессе наблюдения втечение 6 месяцев во всех подгруппах основной группы отмечено увеличение средних значений показателя, которые, однако, не достигали референтного значения.Наиболее выраженными и статистически достоверными были изменения показателей тиолового статуса у больных подгрупп «ОХМ», «ОХК», «ОYМ» и «ОYК», тоесть там, где мы использовали инъекции аутологичной сыворотки крови. В подгруппах, где пациенты применяли только ротовые ванночки с «НанАрголом» увеличение показателя было очень слабым, а в группе сравнения, наоборот, отмечено94не достоверное статистически, но снижение показателя еще более выраженное, чемв начале исследования.
Различия между средними показателями динамики тиолового статуса в основной и группе сравнения оказались статистически значимы(t=2,93, р=0,005). Таким образом, можно заключить, что проведенный курс лечебно-профилактических мероприятий привел к статистически достоверному повышению тиолового статуса сыворотки крови, хотя и не достигшего референтногозначения. Основное влияние на изменение этого показателя обусловлено использованием инъекций аутологичной сыворотки крови.Тот же самый показатель мы оценили и в ротовой жидкости. Результаты этихисследований представлены в таблице 3.13.Как и в крови, средние начальные значения показателя тиолового статуса ротовой жидкости оказались существенно ниже референтного значения, в среднем –на 57,5% (р<0,05).
Как и в предыдущем случае, следует заметить, что основная игруппа сравнения по показателю в начале исследования были идентичны. Спустя 6месяцев статистически значимое изменение показателя в сторону его увеличениябыло выявлено только в подгруппе «ОХК». Во всех других подгруппах основнойгруппы также отмечено увеличение средних значений тиолового статуса ротовойжидкости, но не значимое статистически.Таблица 3.13 – Изменения показателей тиолового статуса ротовой жидкостиу пациентов в ходе исследования (мкмоль/л, М±m, Δ, n, t, р)Подгруппыпациентов«ОХН»«ОХМ»«ОХК»«ОYН»«ОYМ»«ОYК»«СХ»«CY»n2825272021213127В началеисследования58,6±15,659,4±16,260,8±15,855,2±16,757,4±16,954,0±16,061,2±14,555,8±15,7Через 6месяцев82,4±16,998,3±17,2124,4±18,780,6±17,979,5±17,495,7±17,558,5±14,255,1±15,4Изменения(Δ)+ 23,8+ 38,9+ 63,6+ 25,4+ 22,1+ 41,7– 2,7– 0,7Примечание: референтное значение – 136±19 мкмоль/лtр1,01,72,61,01,01,80,10,02= 0,31= 0,11< 0,05= 0,31= 0,37= 0,09= 0,89= 0,9995В группе сравнения практически не было изменений показателя, хотя и отмечена слабая тенденция его снижения.
Различия между показателями динамики восновной и группе сравнения оказались не достоверны (t=1,29, р=0,2). Таким образом, в ротовой жидкости тиоловый статус изменился в лучшую сторону за периоднаблюдения только в подгруппе больных без генетической предрасположенностик воспалительным заболеваниям пародонта и где использовали комплекс лечебнопрофилактических мероприятий. Мы предполагаем, что различие в динамике тиолового статуса в крови и ротовой жидкости обусловлено проводимым ортодонтическим лечением – местным оксидативным стрессом в полости рта.С помощью иммуно-биохимических методов нам показалось интереснымоценить функциональную активность клеточного звена врожденного иммунитета.Имеются ввиду нейтрофилы крови и их кислородзависимая микробоцидность.
Сэтой целью провели оценку спонтанного и индуцированного НСТ-теста.Спонтанный (базальный) НСТ-тест указывает на степень активации кислород-зависимых механизмов фагоцитов под влиянием внутренних причин, например, инфекции. Индуцированный (стимулированный) НСТ-тест указывает на потенциальную способность нейтрофилов к активации под действием внешних факторов (бактерий и их продуктов: зимозана, пирогенала).
В таблице 3.14 приведенырезультаты оценки спонтанного НСТ-теста в крови пациентов.Таблица 3.14 – Изменения показателей спонтанного НСТ-теста в кровиу пациентов в ходе исследования (%, М±m, Δ, n, t, р)Подгруппыпациентов«ОХН»«ОХМ»«ОХК»«ОYН»«ОYМ»«ОYК»«СХ»«CY»n2825272021213127В началеисследования16,2±1,4515,9±1,5116,0±1,4819,5±1,5920,3±1,7520,8±1,7816,7±1,1920,3±1,22Через 6месяцев13,9±1,2712,3±1,4211,2±1,4016,8±1,4215,2±1,6615,3±1,5917,2±1,2122,4±1,25Изменения(Δ)– 2,3– 3,6– 4,8– 2,7– 5,1– 5,5+ 0,5+ 2,1Примечание: референтные значения – 0 - 10%.tр1,21,72,41,32,12,30,31,2= 0,24= 0,09< 0,05= 0,21< 0,05< 0,05= 0,77= 0,2396Как оказалось, в начале наблюдения за больными средние значения теста вовсех подгруппах были повышены в 1,5 – 2 раза в сравнении с референтными значениями (р<0,05).
Через 6 месяцев наблюдалось уменьшение средних значений показателя, статистически значимое в подгруппах «ОХК», «ОYМ» и «ОYК». В другихподгруппах изменения были незначительными, а в группе сравнения они происходили в сторону увеличения показателя, но не значимо статистически. Повышенныезначения НСТ-теста в начале исследования свидетельствовали об активации клеточного звена врожденного иммунитета. Причем, в наибольшей степени это быловыражено в подгруппах больных, имеющих полиморфизм генов интерлейкинов. Впроцессе наблюдения в основной группе под влиянием лечебно-профилактическихмероприятий произошло снижение активации клеточного звена врожденного иммунитета, но оно не достигло показателей, характерных для здоровых пациентов.Как и в предыдущих наблюдениях, наибольшая динамика наблюдалась под влиянием инъекций аутологичной сыворотки крови или комбинации предложенных мероприятий.Результаты индуцированного НСТ-теста у больных приведены в таблице3.15.Таблица 3.15 – Изменения показателей индуцированного НСТ-теста в кровиу пациентов в ходе исследования (%, М±m, Δ, n, t, р)Подгруппы пациентов«ОХН»«ОХМ»«ОХК»«ОYН»«ОYМ»«ОYК»«СХ»«CY»nВ началеисследованияЧерез 6месяцевИзменения(Δ)tр282527202121312760,8±2,7761,1±2,8259,7±2,8062,3±2,9161,9±2,8463,3±2,8959,2±2,1663,0±2,8860,4±2,7958,3±2,8855,4±2,7569,6±2,9674,3±2,8779,5±2,8960,1±2,2359,8±2,65– 0,4– 2,8– 4,3+ 7,3+ 12,4+ 16,2+ 0,9– 3,20,10,71,11,83,14,00,30,8= 0,92= 0,49= 0,28= 0,09< 0,05= 0,0003= 0,77= 0,42Примечание: референтные значения – 40 - 80%.97Здесь, в отличие от спонтанного НСТ-теста средние значения показателей вовсех подгруппах в начале исследования находились в диапазоне референтных значений.
В ходе наблюдения произошло статистически значимое увеличение показателей только в двух подгруппах основной группы: «ОYМ» и «ОYК». Однако и этоувеличение не вышло за границы референтного диапазона показателя. Таким образом, можно сделать вывод, что по показателям индуцированного НСТ-теста в кровипотенциальная микробоцидная активность нейтрофилов оставалась у обследованных на нормальном уровне.Изучая биохимические изменения в ротовой жидкости и крови пациентовмы, конечно, не могли обойти такой важный показатель, как концентрация лизоцима в ротовой жидкости. Этот фермент оказывает влияние на микрофлору полости рта и показатель, характеризующий его концентрацию может оказаться интересен, поскольку наши пациенты применяли местно противомикробный препарат.Результаты исследования приведены в таблице 3.16.Таблица 3.16 – Изменения концентрации лизоцима в ротовой жидкостиу пациентов в ходе исследования (мкг/мл, М±m, Δ, n, t, р)Подгруппы пациентов«ОХН»«ОХМ»«ОХК»«ОYН»«ОYМ»«ОYК»«СХ»«CY»nВ началеисследованияЧерез 6месяцевИзменения(Δ)tр282527202121312776,3±8,3877,5±8,5679,1±8,4142,3±8,7447,1±8,7144,9±8,6879,2±8,0845,0±8,5869,2±8,3271,8±8,4774,3±8,3651,6±8,8058,3±8,8259,2±8,8176,8±7,8655,8±8,40– 7,1– 5,7– 4,8+ 9,3+ 11,2+ 14,3– 2,4+ 10,80,60,50,40,80,91,20,20,9= 0,55= 0,64= 0,69= 0,46= 0,37= 0,25= 0,83= 0,37Примечание: референтные значения – 21 - 95 мкг/мл.98Из таблицы следует, что в начале исследования средние значения показателей концентрации лизоцима в ротовой жидкости обследованных находились в границах референтных значений.
В процессе наблюдения за 6 месяцев произошли разнонаправленные изменения показателей. При этом статистически значимых изменений ни в одной подгруппе больных выявлено не было. Однако в подгруппах«ОYМ» и «ОYК» наблюдалась тенденция увеличения показателя, что можно рассматривать как положительный эффект проведения лечебно-профилактических мероприятий. Таким образом, изучение концентрации лизоцима в ротовой жидкостине позволило нам выявить значимых изменений.Полагая, что пародонтопатогенная микрофлора полости рта у больных воспалительными заболеваниями пародонта является, главным образом, уреазопозитивной и способна в значительной степени продуцировать фермент уреазу, мы изучили ее активность в ротовой жидкости с помощью анализатора «AMA RUTReader», который по нашим более ранним наблюдениям достаточно точно отражает ситуацию с этим показателем в смешанной слюне.
Результаты этого исследования приведены в таблице 3.17. В полости рта уреаза имеет исключительно микробное происхождение, поэтому показатель ее активности практически напрямуюхарактеризует метаболическую активность уреазопозитивной микрофлоры в полости рта.Таблица 3.17 – Изменения показателя активности уреазы в ротовой жидкостиу пациентов в ходе исследования по данным «AMA RUT Reader»(баллы, М±m, Δ, n, t, р)Подгруппы пациентов«ОХН»«ОХМ»«ОХК»«ОYН»«ОYМ»«ОYК»«СХ»«CY»nВ началеисследованияЧерез 6месяцевИзменения(Δ)tр28252720212131272,15±0,042,18±0,052,10±0,042,34±0,062,37±0,062,28±0,062,15±0,032,30±0,040,59±0,021,49±0,020,32±0,010,66±0,021,72±0,040,44±0,022,22±0,032,39±0,03– 1,56– 0,69– 1,78– 0,62– 0,65– 1,84+ 0,07+ 0,0934.912,843,226,69,129,11,71,8< 0,05< 0,05< 0,05< 0,05< 0,05< 0,05= 0,10= 0,0899Действительно, во всех подгруппах основной группы нам удалось выявитьстатистически значимое уменьшение активности микробной уреазы.
Оно былонаиболее выражено в подгруппах «ОХК» и «ОYК» основной группы, где мы использовали комплекс лечебно-профилактических мероприятий. Учитывая, что вначале исследования основная группа и группа сравнения не отличались по средним значениям показателей (р>0,05), мы обнаружили, что в группе сравнения запериод 6 месяцев активность уреазы слабо увеличилась. Это увеличение не былостатистически значимым, поэтому его можно не учитывать. А снижение показателяв основной группе свидетельствовало о заметном подавлении метаболической активности уреазопозитивной микрофлоры в полости рта. То, что такое изменениебыло хорошо выражено и в подгруппах «ОХН», «ОХК» и «ОYК» свидетельствуето том, что свою лепту в подавление активности пародонтопатогенной микрофлорывнесли и ротовые ванночки с «НанАрголом».
Таким образом, использование ротовых ванночек с «НанАрголом» благоприятно сказывается в плане подавления уреазной активности микробиоты полости рта.Резюмируя результаты биохимических и иммунологических исследований,проведенных у обследованных пациентов, можно заключить, что предложенныйнами комплекс лечебно-профилактических мероприятий, включающий применение ротовых ванночек с «НанАрголом» и инъекций аутологичной сыворотки кровине только положительно влияют на характер иммунного ответа организма, но и дополняют друг друга, что делает такое сочетание достаточно эффективным в профилактике и лечении воспалительных заболеваний пародонта во время проведениякурса ортодонтического лечения.Помимо функциональных лабораторных методов исследования, характеризующих как активность микрофлоры полости рта, так и ответных защитных реакций организма обследованных больных нам было интересно проанализировать иструктурные изменения в тканях пародонта, которые предположительно должныбыли произойти в течение 6 месяцев лечения.
















