Диссертация (1140008), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Подсчет количества нейтрофилов, содержащих гранулы восстановленного диформазана (фиолетовогоцвета) любого размера (НСТ-позитивные клетки) на 100 нейтрофилов,а также размер этих гранул в мазкахсо спонтанным и индуцированнымтестами.6210Расчетывали индекс активации нейтрофилов(ИАН), ед.ИАН=(Ах0+Вх1+Сх2+Dх3)/1002А – количество клеток, не содержащих диформазан или содержащих ввиде пылевидных включенийВ – площадь гранул диформазана до1/3 площади ядраС – площадь гранул диформазана от1/3 до целой площади ядраD – отложения диформазана болееплощади ядра11Регистрировалирезультаты исследованияВносили результаты исследования вкомпьютер и распечатывали бланкрезультата анализа4Концентрацию лизоцима в ротовой жидкости определяли по изменению мутности суспензии бактерий вида Micrococcus lysodeikticus, основанной на способности фермента расщеплять полисахариды клеточной стенки бактерий.Показатели активности уреазы в ротовой жидкости оценивали с помощью портативного переносного анализатора «AMA RUT Reader» производства ООО«АМА» (Санкт-Петербург, рисунок 2.3), который предназначен для полуколичественного определения активности фермента уреазы.
Принцип действия индикатора анализатора основан на определении активности фермента уреазы посредством следующей биохимической реакции:уреаза(NH2)2CO + H2O → 2NH3↑ + CO2↑(2.1)Индикатор регистрирует изменение pH, вызванное образованием аммиака и появлением на чувствительном элементе красного или малинового пятна.Портативный считыватель для анализа активности уреазы проводит сериюсканирований для выявления пятна.
Считыватель завершает работу, как только обнаруживает пятно, либо продолжает до истечения времени экспозиции (14 минут),63чтобы подтвердить отсутствие пятна и, следовательно, зафиксировать отрицательный результат анализа. Результат отображается на дисплее и сохраняется во внутреннюю память аппарата.Рисунок 2.4 – Портативный анализатор активности уреазыв биологических жидкостях «AMA RUT Reader»2.3.2.3 Гистоморфологическое исследованиеИссекали биоптаты многослойного плоского неороговевающего эпителиядесны с подлежащими тканями.
После этого их фиксировали в 10% растворенейтрального формалина (рН=7,2), затем проводили в изоприловом спирте с добавлением «IsoPrep» и заливали в гомогенизированную парафиновую среду HISTOMIX, формируя блоки. Из парафиновых блоков изготавливали гистологическиепрепараты толщиной 5-6 мкм и окрашивали гематоксилином и эозином. Кромеэтой методики применяли гистохимическую окраску по Вейгерт-Ван-Гизону. Микроскопическое исследование, фоторегистрацию и морфометрические исследования проводили с применением: исследовательского тринокулярного микроскопа«Nikon Eclipse 50i», специализированной цифровой фотокамеры «Nikon DS-Fi2»,персонального компьютера с операционной системой Windows 7, специализированных морфометрических программ NIS-Elements и Bio Vision Professional.
Приэтом определяли плотность воспалительного инфильтрата (путем подсчета количества клеток в гистологических препаратах в 10 полях зрения при увеличении микроскопа ×400), состав клеточного инфильтрата с каждого микропрепарата с подсчетом нейтрофильных лейкоцитов, лимфоцитов, фибробластов, фиброцитов,64плазматических клеток и макрофагов (в %) в 10 полях зрения при увеличении микроскопа ×40 – 400. При изучении микроскопических препаратов оценивали динамику изменений воспалительной реакции и особенности регенерации тканей.2.4 Ортодонтическое лечение пациентовНаблюдение за пациентами и ортодонтическое лечение начинали спустя 7суток после проведения профессиональной гигиены полости рта.
Этим мы попытались обеспечить одинаковый старт обследования для всех больных в аспекте биопленки полости рта, которая за этот срок уже имела возможность сформироватьсяв соответствии с индивидуальными особенностями каждого пациента.Активный период ортодонтического лечения проводили в пять этапов с помощью брекет-систем: фиксация брекетов, выравнивание зубов, коррекция прикуса, завершающий этап, детализация положения зубов, снятие брекетов. Ретенционный период предполагал использование ретейнеров.Длительность ортодонтического лечения у наших пациентов составляла от 6месяцев (несколько больных) до 2,5 лет. В среднем лечение длилось 1,5 – 2 года. Всвязи с тем, что период лечения не был короче 6 месяцев, именно этот срок мывыбрали для проведения активного наблюдения за пациентами.
К тому же, это тотсрок, за который в зубочелюстной системе под влиянием ортодонтических сил ужепроисходила существенная перестройка, а используемые нами профилактическиеи лечебные мероприятия вполне могли дать определенные результаты, которые мымогли зафиксировать с помощью комплекса использованных методов исследования.2.5 Методы профилактики и лечения воспалительных заболеванийпародонтаДо начала ортодонтического лечения все больные подвергались детальномустоматологическому и пародонтологическому осмотру. Во всех случаях использо-65вали рентгенологические методы исследования. Всего было выполнено 236 ортопантомографических исследований, 27 телерентгенографических, 117 внутриротовых снимков.Ортодонтическое лечение всех пациентов было начато в фазе ремиссии воспалительных заболеваний пародонта. В подгруппах пациентов группы сравненияпосле установки брекетов проводили поддерживающую пародонтальную терапию(supportive periodontal therapy — SPT) в сроки: 1 посещение – через месяц посленачала ортодонтического лечения, второе – через 3 месяца, третье – через 5 месяцев, четвертое через 10 месяцев и т.д.
Через 6 месяцев после начала лечения былопроведено контрольное обследование. Эту терапию проводили в соответствии с методическими рекомендациями при диагнозе «пародонтит», утвержденными Решением Совета Ассоциации общественных объединений «Стоматологическая Ассоциация России» 23.04.2013 года с изменениями и дополнениями на основании Постановления № 15 Совета Ассоциации общественных объединений «Стоматологическая Ассоциация России» от 30.09.2014 года.Она включала помимо контроля индивидуальной гигиены полости рта, профессиональную гигиену и ротовые ванночки с раствором хлоргексидина биглюконата.
При травматических повреждениях десны или слизистой оболочки проводилипоказанное в каждом случае местное лечение. Такое лечение в дальнейшем мыназывали рекомендованным СтАР пародонтологическим лечением или пародонтологической поддержкой ортодонтического лечения.Перед началом ортодонтического лечения у всех больных проводили индивидуальную коррекцию гигиены полости рта, включавшую неоднократную контролируемую гигиену и обучение рациональным гигиеническим процедурам(«Tach to tich»).
Пациентам преимущественно рекомендовали технику чистки зубовБасс, межзубные ершики, монопучковые зубные щетки. Не менее, чем за неделюдо установки брекетов проводили профессиональную гигиену с применением инструментов для снятия зубных отложений (кюреты Грейси), ультразвуковых и воздушно-абразивных аппаратов. После установки брекетов также проводили коррекцию индивидуальной гигиены в связи с изменившимися условиями в полости рта.66В процессе ортодонтического перемещения зубов не использовали общеголечения за исключением нескольких случаев простудных респираторных заболеваний (8 случаев), когда больные вынуждены были кратковременно применять лекарственные препараты, назначенные терапевтом.Схемы применения профилактических и лечебных мероприятий в подгруппах основной группы различались.В подгруппах «ОХН» и «ОYН» все пациенты (48 человек) использовалитолько ротовые ванночки с нанодисперсным препаратом нового поколения«НанАргол» два раза в день по 30 – 50 мл в течение 1 мин.
курсами по 15 дней вначале первого, третьего и пятого месяцев ортодонтического лечения. Проведениеиных профилактических и лечебных мероприятий у них не отличалось от группысравнения.«НанАргол» – это препарат, разработанный в лаборатории функциональныхнаносистем Национального исследовательского технологического университета«МИСиС» (Москва, рис. 2.5).Рисунок 2.5 – Концентрат нанодисперсного безионного коллоидного серебра«НанАргол»67Препарат представляет собой раствор безионного коллоидного серебра. Номер свидетельства: RU.77.99.11.003.Е.001609.03.13.
Дата регистрации и переоформления: 01.03.2013. Декларация о соответствии: ТС RU Д-RU.ПК04.В.00234.Состав: коллоидное наносеребро – 17-23 мкг/мл, вода, натрий лимоннокислый. Перед употреблением флакон рекомендуется перевернуть и несколько развстряхнуть.В инструкции к препарату основными показаниями к его применению являются: пародонтит, неспецифические воспалительные заболевания, установка брекет-системы, стоматит. После чистки зубов 3 мл концентрата разводят на 200 мл(стакан воды). Срок годности концентрата – 3 года.Препарат обладает пролонгированным бактерицидным эффектом в отношении штаммов микрофлоры наддесневого и поддесневого зубного налета, преимущественно – анаэробной 57.
Противопоказания: индивидуальная непереносимость компонентов препарата, беременность, кормление грудью.Пациентам подгрупп «ОХМ» и «ОYМ» проводили три курса аутосеротерапии: в течение первого, третьего и пятого месяцев ортодонтического лечения. Вотношении других каких-либо профилактических или лечебных мероприятий онине отличались от группы сравнения. Курс аутосеротерапии состоял из трех парныхподслизистых инъекций обедненной клетками аутологичной сыворотки крови. Такую сыворотку получали путем забора венозной крови пациента в вакуумные стерильные пробирки (рисунок 2.6) в объеме 8-10 мл.
Кровь двукратно центрифугировали. При этом первое центрифугирование проводили с использованием «мягкого старта» для плавного отделения клеточных элементов с помощью лабораторной центрифуги «ЕВА-200» («Hettich-Zentrifugen», Германия, рисунок 2.7). Основное центрифугирование проводили при скорости вращения 3000 об/мин. в течение10 мин.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
