Диссертация (1139727), страница 32
Текст из файла (страница 32)
Изучение сравнительной кинетики растворения препаратов капецитабинаСТКР проводили согласно ОФС 42-0003-04 «Растворение» на аппарате«лопастная мешалка» при скорости вращения 100 об/мин при температуре 37 ±0,5 оС. Среды растворения – ацетатный буферный раствор рН 4,5, фосфатныйбуферный раствор pH 6,8, вода. Объем среды растворения – 900 мл.
Временныеточки отбора проб: 10, 15, 20, 30 мин.В качестве условий для изучения СТКР были выбраны оптимальные условия, описанные в разделе 3.2.2. Среду рН 1,2 не использовали в связи с нестабильностью капецитабина, как это было установлено в Главе 2. Объем средырастворения (900 мл) был выбран для обеспечения «sink conditions» (полногорастворение высвободившейся субстанции в данном объеме). Аппарат 2 былвыбран как наиболее оптимальный для невсплывающих твердых ЛФНВ. Скорость 100 об/мин была выбрана для создания оптимальной гидродинамики, позволяющей обеспечить распадения достаточно большой таблетки капецитабина(дозировки 150 мг и 500 мг).В каждый из 6 сосудов для растворения с 900 мл среды растворения,предварительно термостатированными при 37 ± 0,5 ºС, помещали по 1 таблеткеисследуемого лекарственного средства.
Спустя указанные промежутки временипроводили отбор 5 мл среды, который незамедлительно восполняли таким жеобъемомсредырастворения.Отобранныепробыфильтроваличерезмембранные фильтры «Agilent Captiva Premium Syringe Filter®» с диаметромпор 0,45 мкм, отбрасывая первые порции фильтрата. 5,0 мл фильтратапомещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводили объем растворасредой растворения до метки и перемешивали (испытуемый раствор).Параллельно и аналогичным образом проводили исследование референтноголекарственного средства. Испытание проводили на 12 единицах каждоголекарственного средства.216Количественное определениеПриготовление стандартного раствора капецитабина.Около 42,0 мг (точная навеска) стандартного образца капецитабинапомещали в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяли в 200 мл средырастворения, доводили объем раствора тем же растворителем до метки иперемешивали.
5,0 мл полученного раствора помещали в мерную колбувместимостью 25 мл, доводили объем раствора до метки средой растворения,перемешивали. Концентрация приготовленного раствора приблизительно равна0,03 мг/мл.КоличественноеопределениепроводилиметодомУФ-спектрофотометрии. Измеряли оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов на спектрофотометре в кварцевой кювете с толщиной слоя 10мм в области максимального поглощения при длине волны 304 нм, используя вкачестве раствора сравнения среду растворения.Количество капецитабина, перешедшего в раствор (X), в процентах, рассчитывали по формуле:X где:A1 900 100 V,SFср LA1–оптическая плотность испытуемого раствора;900–объем среды растворения, в миллилитрах;100–коэффициент пересчета в проценты;SFср–среднее значение стандартного коэффициента;L–номинальная дозировка препарата, в мг;V–коэффициент разбавления (5 – для таблеток с дозировкой 150 мг):5.1.7.
Синопсисы исследований биоэквивалентности5.1.7.1. Исследование биоэквивалентности ЛС мелоксикамаИсследование представляло собой открытое, рандомизированное, перекрестное сравнительное, с двумя периодами исследование по изучению биоэк-217вивалентности при введении однократной дозы каждого из сравниваемых лекарственных препаратов добровольцам натощак. Исследование было проведенона 18 добровольцах-женщинах. Основные критерии включения добровольцевбыли установлены согласно Методическим Указаниям «Оценка биоэквивалентности лекарственных средств». Исследование было одобрено Министерством Здравоохранения РФ и локальным этическим комитетом в установленномпорядке.Временные точки для отбора проб были выбраны на основе средних значений времени достижения максимальной концентрации (Tmax) и периода полувыведения исходного действующего вещества (Т½), приведенных в литературе.Количество образцов крови, а также интервал времени между первым и последним отбором проб должны обеспечить возможность построения фармакокинетической кривой «концентрация-время» AUC0-t не менее чем на 80% соответствующей полной фармакокинетической кривой (AUC0-∞).
Для этого продолжительность наблюдения за концентрацией должна, не менее, чем в четырераза превосходить период его полувыведения. Количество проб должно обеспечить не менее 3 точек контроля на этапе абсорбции препарата и 5 точек дляописания процесса элиминации лекарственного средства. Отбор проб кровипроводился до приема и через 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10,0; 12,0;24,0; 48 и 80 часа после приема препарата. Образцы крови забирались через постоянный катетер, введенный в вену руки.
Образец крови был забран и перенесен в пробирки для образцов, содержащих цитрат натрия в качестве противокоагулирующего средства, в каждый момент взятия крови. После взятия образцов у всех добровольцев в каждый момент времени в течение 30 минут послезабора крови, образцы были центрифугированы при ~1700 g в течение около 10минут. После центрифугирования образцы плазмы помещали в пробирки типа«Эппендорф» вместимостью 1,5 мл. После завершения отбора проб крови увсех добровольцев промаркированные пробирки с замороженной плазмой с соблюдением температурного режима (минус 20 оС) были переданы в биоаналитическую лабораторию.2185.1.7.1.
Исследование биоэквивалентности ЛС капецитабинаИсследование представляло собой открытое, сравнительное рандомизированное перекрестное с двумя периодами исследования по изучению биоэквивалентности при приеме однократной дозы каждого из сравниваемых лекарственных препаратов здоровыми добровольцами мужского пола натощак. Исследование было проведено на 48 добровольцах-мужчинах.
Основные критериивключения добровольцев были установлены согласно Методическим Указаниям «Оценка биоэквивалентности лекарственных средств». Исследование былоодобрено Министерством Здравоохранения РФ и локальным этическим комитетом в установленном порядке.Длительностьотборапробопределяласькривой«концентрациядействующего вещества - время» и составляла 4 часа 30 минут после приемапрепарата, что превышало длительность 4 периодов полувыведения капецитабина и 5-ФУ (>4Т½). Выбормоментов времени для отбора проб кровиобеспечивал получение как минимум 3 точек для фазы первоначальноговозрастания концентраций капецитабина и 5-ФУ и более 5-ти точек – для фазыих снижения.В локтевую вену добровольца устанавливался индивидуальный гепаринизированный катетер, с помощью которого осуществлялся сбор венозной кровина протяжении 4,5 часов исследования.
За 15 минут до приема препаратов отбиралась исходная проба крови. Далее отбор крови осуществлялся через 0,25;0,50; 0,75; 1,0; 1,25; 1,50, 1,75; 2,0; 2,25; 2,50; 2,75; 3,0; 3,50; 4,0 и 4,5 часа послеприема препарата. Кровь в количестве 6 мл отбиралась в гепаринизированныепробирки. Промежуток времени между отбором крови и ее обработкой не превышал 20 минут. Плазму крови отделяли центрифугированием при 3000 об/минв течение 10 минут. После центрифугирования образцы плазмы помещали впробирки типа «Эппендорф» вместимостью 1,5 мл.
После завершения отборапроб крови у всех добровольцев промаркированные пробирки с замороженнойплазмой с соблюдением температурного режима (минус 20 оС) были переданы вбиоаналитическую лабораторию.219Несмотря на то, в исследования БЭ препаратов капецитабина рекомендуется включать в качестве субъектов онкологических пациентов (что связано ссущественными НЛР препарата), данное исследование получило одобрение дляпроведения на добровольцах, поскольку проводилось на минимальной дозировке препарата – 150 мг.5.1.7. Биоаналитические методики определения исследуемых лекарственныхсредств5.1.7.1.
Биоаналитическая методика определения мелоксикама в плазме кровичеловекаЛитературный обзор методик анализаМелоксикам – нестероидный противовоспалительный препарат из группыоксикамов, включенный в перечень ЖНВЛС. Мелоксикам представляет собойсветло-желтое вещество, практически нерастворимое в воде, очень хорошо растворимое в сильных кислотах и щелочах, практически нерастворимое в метаноле. Кажущийся коэффициент распределения (log P)app составляет 0,1 в ноктанол/буфер pH 7,4, что говорит о его ионизации в нейтральных и слабощелочных средах.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
