Диссертация (1139722), страница 42
Текст из файла (страница 42)
Вхимический стакан на 50 мл помещают 2-3 драже "Канефрон Н", приливают 20 мл теплойдистиллированной воды (40-50оС) и помешивают стеклянной палочкой до полного разрушенияи удаления оболочки с поверхности ядра. Затем освобожденные от оболочки драже (ядра)пинцетом переносят в другой химический стакан, избегая попадания частиц оболочки (принеобходимости их удаляют, смывая водой). К ядрам приливают 5 мл теплой воды (40-50оС) ипокачивают стакан до полного их разрушения. После чего приливают 5 мл 2 % раствора NaOHи кипятят на плитке в течение 30-60 секунд. Затем порошок промывают водой методомдекантации 3-5 раз при условии максимального осаждения (не менее 5 минут) частиц.Последний раз жидкость медленно сливают, оставляя около 1 мл. Затем скальпелем илилопаточкой осторожно (поднимая по стенке стакана) порошок переносят на предметное стеклов каплю включающей жидкости (глицирин-вода (1:1) или раствор хлоралгидрата), равномернораспределяют порошок в капле препаравальной иглой, накрывают покровным стеклом иисследуют под микроскопом.
В случае необходимости (при наличии пузырьков воздуха)препараты прогревают над пламени горелки. Делают не менее 10 микропрепаратов.Описанная методика пробоподготовки позволяет предварительно разрушить и удалитьоболочку драже. Для этого используется дистиллированная вода t 40-50оС. Деструкция ядер208достигается за счет их собственной распадаемости в теплой воде и тем самым исключаетсястадия разрушения ядра путем растирания, приводящая к дополнительному измельчениюрастительных частиц и, как следствие, ухудшению их диагностичности.
Одновременнопроисходит растворение лактозы - вспомогательного вещества-наполнителя. Дальнейшаяобработка распавшегося ядра драже (кипячение в 1 % растворе NaOH в течение 30-60 секунд)позволяет в щадящем режиме размягчить и просветлить растительные ткани, растворитькукурузный крахмал, затрудняющий детальное микроскопическое изучение, особенно внабухшемсостоянии. Промыванием просветленногорастительногопорошка методомдекантации удаляется растворенный крахмал, стеарат Mg и мелкие (до 10 мкм) растительныечастицы, не несущие диагностических признаков.При исследовании микропрепаратов видны:-фрагментылистовойпластинкиспрямостеннымичетковидноутолщеннымиэпидермальными клетками и толстой отслаивающейся кутикулой; фрагменты листовойпластинки в поперечном сечении с отслаивающейся кутикулой или полностью лишенныеэпидермиса, а также с калленхимой, имеющей сильно утолщенные клеточные стенки; обрывкинижнего опушенного эпидермиса с многочисленными часто сбитыми в комки простымиветвистыми волосками; отдельные простые ветвистые волоски и их обломки; фрагментынаджилочного эпидермиса с четковидноутолщенными стенками и местами прикрепленияволосков в виде многочисленных округлых валиков (листья розмарина);-обрывки паренхимы с округлыми или слегка вытянутыми клетками; группыфрагментов сетчатых сосудов; отдельные сосуды и их части; реже обрывки характерныхширокополостных волокон с крестообразным мелкосетчатым утолщением клеточной стенки(рис.
99А); редко фрагменты секреторных каналов; обрывки пробки коричневого цвета,состоящей из многоугольных прямостенных клеток (корни любистока);-обрывки эпидермиса с извилистостенными слегка удлиненными клетками, крупнымиокруглыми устьицами и складчатой кутикулой; фрагменты стеблей с плотными группамитолстостенных волокон и сосудами различного типа вторичного утолщения клеточных стенок;реже группы волокон стеблей и фрагменты крупных жилок с приуроченными к нимпризматическими кристаллами оксалата кальция в мезофилле (трава золототысячника);-многочисленные фрагменты стеблей и жилок с механическими и проводящимиэлементами, недиагностируемые растительные фрагменты и минеральные бесформенныечастицы.209АБРисунок 100.
Анатомо-диагностические признаки ЛРС в драже «Канефрон». Ув.х400.А - фрагмент механического волокна с характерным «крестообразно сетчатым» утолщениемклеточной стенки корня любистокаБ - фрагменты сосудов ксилемы корня любистока.Основныеанатомо-диагностическиепризнакирастительныхпорошковпослепроведенной пробоподготовки в целом сохраняются (разветвленные волоски розмарина,сетчатые волокна, сосуды и секреторные ходы корня любистока, эпидермис листа и кристаллыоксалата кальция в элементах травы золототысячника) и позволяют идентифицировать данныевидысырья.Однакоряданатомическихобразований,свойственныхрастительнымкомпонентам, не был обнаружен. Так в микропрепаратах не определяются железки иголовчатые волоски листа розмарина, что можно объяснить хрупкостью этих трихом иразрушением их в процессе измельчения и изготовления лекарственного препарата.В ходе проведения пробоподготовки по разработанной методике не удается определить вмикропрепаратахкрахмальныезернакорнялюбистокаидостичьудалениятакихвспомогательных веществ-наполнителей как оксид кремния и поливинилпиролидон, что вцелом не снижает качества микропрепаратов и не оказывает отрицательного влияния надиагностику растительного компонента.5.3.3.
Пилюли «Долартрин»Лекарственное средство - пилюли "Долартрин" фармацевтической акционернойкомпании "Цисин Лтд." представляет собой комплексный препарат, содержащий в своемсоставе 18 компонентов природного происхождения, 15 из которых – порошки лекарственногорастительного сырья различных морфологических групп (побеги, травы, подземные органы), 2вида растительных смол, 1- плодовое тело гриба. Процентное содержание компонентов в210препарате составляет от 1,14% до 5,7%: плодовое тело пории кокосовидной – 5,7%;корнеклубни аконита Кормишеля, корнеклубни аконита Кузнецова, корнеклубни ариземыкрасноватой (или ариземы разнолистной, или ариземы амурской), корни дудника даурского,трава копытня гетеротроповидного (или копытня Зибольда), корневища лигустикума чуаньсюн,корни пиона молочноцветкового (или пиона Вейча), корни солодки голой (или солодкиуральской, солодки вздутой), корневища сыти круглой, трава эфедры китайской (илипромежуточной, эфедры хвощевой) – по 3,42%; смола босвеллии Картера, корни дудникакитайского побеги коричника китайского (или коричника цейлонского), корни сапожниковиирастопыренной – по 2,28%; корни атрактилодеса крупноголового, корни горечавкикрупнолистной (или горечавки толстостебельной, горечавки даурской, горечавки соломенной) –по 1,71; смола миррового дерева – 1,14%.
В качестве вспомогательного склеивающего веществаиспользуется мед; кроме того в технологии производства пилюль применяется краситель.Так как в составе комплексного препарата "Долартрин" доминируют порошки нативногорастительного сырья, то для определения его подлинности решающее значение имеетмикроскопический анализ, позволяющий дифференцировать растительные составляющие откомпонентов иного происхождения (животного, минерального и т.д.); доказать наличие тех илииных морфологический групп сырья, и по возможности (при наличии высоко специфичныхдиагностических признаков) подтвердить присутствие в препарате отдельных компонентов.С целью обнаружения высокоспецифичных анатомо-диагностических признаков былонеобходимо провести детальное микроскопическое исследование каждого вида растительногосырья, включенного в состав пилюль "Долартрин". Проведению экспериментальныхисследований предшествовал анализ доступных литературных данных по микроскопиивышеназванных объектов.Для анализа были получены образцы лекарственного растительного сырья 15компонентов препарата как в измельченном, так и в цельном виде.
Все образцы измельченногосырья по дисперсности были менее 1,0 мм.Следующим этапом исследований явилась разработка пробоподготовки и подбор оптимальныхусловий для проведения микроскопического анализа препарата.Приготовление микропрепаратов из измельченных пилюль по методике ГФ ХI (на предметномстекле) не позволяет различить среди общей склеенной массы отдельные растительные частицыи выделить ключевые диагностические элементы их анатомического строения.Опыт микроскопического изучения комплексных лекарственных средств, включающихнативные растительные порошки (таблетки "Викаир", "Таблетки от кашля", брикеты "Кафиол")свидетельствует о том, что для проведения микроскопического анализа с целью подтверждения211подлинности входящих в состав лекарственного средства растительных компонентовнеобходимо разработать специальную пробоподготовку, которая учитывала бы особенностисостава препарата и позволяла бы максимально визуализировать анатомо-диагностическиеособенности растительного сырья.Предварительный микроскопический анализ пилюль "Долартрин" выявил достаточновысокую дисперсность растительных порошков, входящих в его состав (3-200 мкм).Измельчение сырья до такого размера частиц может привести к потере некоторыхдиагностических признаков и затруднить идентификацию растительного сырья.В связи с этим встает вопрос об оптимальном выборе способа измельчения пилюль входе пробоподготовки.
Наиболее часто используемый метод механического разрушения(растирание) является не приемлемым, так как приводит к дополнительному измельчениюрастительных компонентов. Наличие оболочки у пилюль "Долартрин" создает дополнительныетрудности при получении качественных препаратов.Учитываявсевышесказанное,быларазработанаспециальнаяметодикапробоподготовки, позволяющая разрушить оболочку пилюль, максимально освободитьрастительный компонент от меда - склеивающего вещества, а также разрушить ядро ипросветлить растительные порошки.Пробоподготовка пилюль "Долартрин" к микроскопическому анализу.
4 пилюлипомещают в химический стакан на 50 мл, приливают 30 мл воды деминирелизованной,нагревают на плитке до кипения и кипятят до полного разрушения пилюль (при необходимостиоставшиеся комочки разрушают стеклянной палочкой). Стакан снимают с плитки, добавляют10-15 мл деминерализованной воды комнатной температуры и оставляют до полного осаждениячастиц (15-20 мин). Затем надосадочную жидкость осторожно (избегая потери порошка)сливают, оставляя 10 мл, приливают 10мл 5 % р-ра NaOH, нагревают на плитке до кипения икипятят 30-60 секунд. После чего в стакан приливают 20-30 мл деминерализованной воды, даютотстояться 1-2 мин и надосадочную жидкость сливают, повторяя операцию до тех пор, поканадосадочная жидкость не станет прозрачной (3-4 раза).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
