Диссертация (1139722), страница 44
Текст из файла (страница 44)
Наиболее часто используемый метод механического разрушения(растирание) является не приемлемым, так как приводит к дополнительному измельчениюрастительных компонентов. Наличие оболочки у пилюль "Глибедин" создает дополнительные217трудности при получении качественных препаратов.Учитываявсевышесказанное,быларазработанаспециальнаяметодикапробоподготовки, позволяющая разрушить оболочку пилюль, разрушить ядро, растворитьэкстракты и просветлить растительные порошки.Пробоподготовка пилюль "Глибедин" к микроскопическому анализу. 4 пилюлипомещают в химический стакан на 50 мл, приливают 30 мл воды деминирелизованной, инагревают на плитке до разрушения верхнего слоя пилюль. Освобожденные от оболочекпилюли достают пинцетом и помещают в другой химический стакан на 50 мл, приливают 30 млводы деминирелизованной, и нагревают на плитке до кипения и кипятят до полногоразрушения пилюль (при необходимости оставшиеся комочки разрушают стекляннойпалочкой).
Стакан снимают с плитки, добавляют 10-15 мл деминерализованной водыкомнатной температуры и оставляют до полного осаждения частиц (15-20 мин). Затемнадосадочную жидкость осторожно (избегая потери порошка) сливают, оставляя 10 мл,приливают 10мл 5 % р-ра NaOH, нагревают на плитке до кипения и кипятят 30-60 секунд.После чего в стакан приливают 20-30 мл деминерализованной воды, дают отстояться 1-2 мин инадосадочную жидкость сливают, повторяя операцию до тех пор, пока надосадочная жидкостьне станет прозрачной (3-4 раза). Последний раз жидкость медленно (избегая потерь частиц)сливают, оставляя около 1 мл.
Затем скальпелем или лопаточкой осторожно (поднимая постенке стакана) порошок переносят на предметное стекло в каплю включающей жидкости(глицирин-вода (1:1) или раствор хлоралгидрата), равномерно распределяют порошок в каплепрепаравальной иглой, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. В случаенеобходимости (при наличии пузырьков воздуха) препараты прогревают над пламени горелки.Делают не менее 10-20 микропрепаратов.Описанная методика пробоподготовки позволяет предварительно разрушить и удалитьоболочку пилюль. Деструкция ядер достигается за счет их собственной распадаемости вкипящей воде и тем самым исключается стадия разрушения пилюль путем растирания,приводящая к дополнительному измельчению растительных частиц и, как следствие,ухудшению их диагностичности.
Одновременно происходит растворение растительныхэкстрактов, входящих в состав препарата. Дальнейшая обработка распавшихся пилюль(кипячение в 2,5 % растворе NaOH в течение 30-60 секунд) позволяет в щадящем режимеразмягчить и просветлить растительные ткани. Промыванием просветленного растительногопорошка методом декантации удаляются растворенные экстракты растительного сырья имелкие (до 10 мкм) растительные частицы, не несущие диагностических признаков.При исследовании микропрепаратов видны:218-участки механических волокон отдельные и в группах с разной степеньюодревеснения с продольной морщинистостью, часто расщепленные на концах (рис. 104А)(корни астрагала перепончатого);-разновеликиефрагментыэпидермисасеменнойкожуры,состоящиеизмногоугольных, тангентально удлиненных клеток, заполненных красноватым содержимым ссильноутолщенными темно-желтыми стенками (Рис.
105А); редко участки эпидермиса,состоящего из полигональных клеток с прямыми стенками и выраженной волнистойскладчатостью кутикулы (плоды лимонника китайского);-кубические кристаллы оксалата кальция размером 6-10 мкм (корневища диоскореисупротивной);-каменистые клетки разной формы и степени одревеснения пористых клеточныхстенок, некоторые с красно-бурым содержимым (рис. 104А) (плоды лимонника китайского,корневища диоскореи супротивной, корни астрагала перепончатого);-фрагменты широкополостных сосудов ксилемы с пористо-сетчатой вторичнойутолщенностью клеточных стенок (корни астрагала перепончатого, корневища диоскореисупротивной);-многочисленные недиагностируемые растительные фрагменты и минеральныебесформенные частицы.АБРисунок 104. Препарат «Глибедин».
Ув. х100.А - Группа механических волокон корня астрагала.Б - порошок корней астрагала (менее 1,0 мм) (Astragalus membranaceus Bunge (Fabaceae)Участок сосуда ксилемы, механические волокна.219АБРисунок 105. Диагностика плодов лимонника по фрагменту семенной кожуры. Ув. х100А - в пилюлях «Глибедин»Б – порошок семян лимонникаКак показали проведенные микроскопические исследования, при использованииразработаннойпробоподготовкиудаетсяподтвердитьподлинностьвсехтрехвидоврастительных порошков, включенных в состав пилюль, по присущим им и сохранившимся врезультате производства препарата специфическим диагностическим признакам (механическиеволокна корней астрагала, эпидермис семенной кожуры лимонника китайского, кубическиекристаллы диоскореи). Однако из-за высокой дисперсности используемого растительногосырья, а также в результате проведения пробоподготовки ряд анатомо-диагностическихпризнаков в микропрепаратах не обнаруживается, тем самым теряя свою диагностичность(рафиды оксалата кальция и крахмальные зерна корневищ диоскореи; особенности строенияоколоплодника, эндосперма и внутреннего слоя семенной кожуры плодов лимоннка).Согласно выполненным расчетам частоты встречаемости анатомо-диагностическихпризнаков в микропрепаратах характерные для корней астрагала волокна, участки эпидермисасеменной кожуры лимонника, кристаллы оксалата кальция корневищ диоскореи определяютсяв 100% случаев, фрагменты сосудов и каменистые клетки – в 90%, фрагменты эпидермисаоколоплодника лимонника – в 10%.Такимобразом,пробоподготовкакврезультатемикроскопическомухарактеристики его подлинности.проведенныханализуисследованийпилюльбыла"Глибедин"иразработанаопределены2205.3.5.
Таблетки «Вентеро-Нова»Лекарственноесредство–таблетки,покрытыеоболочкой,"Вентеро-Нова"фармацевтической акционерной компании "Цисин Лтд." представляет собой комплексныйпрепарат, содержащий в своем составе 9 компонентов природного происхождения, 6 изкоторых порошки лекарственного растительного сырья различных морфологических групп, 1вид растительной смолы (смола алойного дерева), 1 вид растительного экстракта (экстрактсемян хурмы восточной) и 1 вид сырья животного происхождения (измельченный грудной щитсепии (каракатицы) съедобной). Процентное содержание компонентов в препарате составляетот 2,3% до 30%: порошок грудного щита сепии съедобной – 30%; луковицы рябчика хубэйскогои плоды мелии тоозендан – по 15%; корневища коптиса китайского, семена абрикосаобыкновенного, корневища хохлатки яньхусо, экстракт семян хурмы восточной – по 7,5%;плоды эводии рутоплодной – 3,85%; смола алойного дерева – 2,3%.
В качествевспомогательных веществ для изготовления ядра таблетки используются сахар, тальк,гидроксиметил-целлюлоза, а также полиакрилат, окись титана, Твин-80 и хлорофилла меднонатриевая соль, входящие в состав оболочки.С целью определения высокоспецифичных анатомо-диагностических признаков былопроведено детальное микроскопическое исследование каждого вида растительного сырья,включенноговсоставтаблеток"Вентеро-Нова"ввидепорошка.Проведениюэкспериментальных исследований предшествовал анализ доступных литературных данных помикроскопии вышеназванных объектов.Для анализа были получены образцы лекарственного растительного сырья 8компонентов препарата как в измельченном, так и в цельном виде.
Все образцы измельченногосырья по дисперсности были менее 1,0 мм. Образец смолы алойного дерева отсутствовал.Полученный образец сырья, заявленный как семена хурмы представлял собой плоскиекруглые пластины высотой около 5 мм и диаметром от 3 до 5 см кремовато-коричневого цвета сровным изломом, очень сладкого вкуса, полностью растворимый в воде, и, как показалмикроскопический анализ, полностью лишенный частиц нативного растительного сырья. Этодало нам основания предположить, что полученный образец является растворенным в сахарномсиропе и высушенным экстрактом растительного сырья и исключить из дальнейших детальныхисследований.Следующим этапом исследований явилась разработка пробоподготовки и подбороптимальных условий для проведения микроскопического анализа препарата.Приготовление микропрепаратов из измельченных таблеток по методике ГФ ХI (на предметном221стекле) не позволяет различить среди общей склеенной массы отдельные растительные частицыи выделить ключевые диагностические элементы их анатомического строения.Предварительныймикроскопическийанализтаблеток"Вентеро-Нова"выявилдостаточно высокую дисперсность растительных порошков, входящих в его состав (3-150 мкм).Измельчение сырья до такого размера частиц может привести к потере многих диагностическихпризнаков и затруднить идентификацию растительного сырья.В связи с этим встает вопрос об оптимальном выборе способа измельчения таблеток входе пробоподготовки.
Наиболее часто используемый метод механического разрушения(растирание) является не приемлемым, так как приводит к дополнительному измельчениюрастительныхкомпонентов.Наличиеоболочкиутаблеток"Вентеро-Нова"создаетдополнительные трудности при получении качественных препаратов.Учитывая все вышесказанное, была разработана специальная методика пробоподготовки,позволяющая разрушить оболочку и ядро таблеток, максимально освободить растительныепорошки от растворимого экстракта и сахара, после чего просветлить растительное сырье.Пробоподготовка таблеток "Вентеро-Нова" к микроскопическому анализу.
Изаналитической пробы произвольно отбирают 5 таблеток. При помощи скальпеля таблеткиразделяют на кусочки размером 3-5 мм. 8-10 из них помещают в химический стакан на 50 мл,приливают 30 мл воды деминерализованной и нагревают на плитке, помешивая стекляннойпалочкой до разрушения фрагментов таблетки. Стакан снимают с плитки, добавляют 10-15 млдеминерализованной воды комнатной температуры и оставляют до полного осаждения частиц(15-20 мин).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
