Диссертация (1139722), страница 43
Текст из файла (страница 43)
Последний раз жидкость медленно(избегая потерь частиц) сливают, оставляя около 1 мл. Затем скальпелем или лопаточкойосторожно (поднимая по стенке стакана) порошок переносят на предметное стекло в каплювключающей жидкости (глицирин-вода (1:1) или раствор хлоралгидрата), равномернораспределяют порошок в капле препаравальной иглой, накрывают покровным стеклом иисследуют под микроскопом. В случае необходимости (при наличии пузырьков воздуха)препараты прогревают над пламени горелки.
Делают не менее 20-30 микропрепаратов.Описанная методика пробоподготовки позволяет предварительно разрушить и частично212удалить оболочку пилюль. Деструкция ядер достигается за счет их собственной распадаемостив кипящей воде и тем самым исключается стадия разрушения пилюль путем растирания,приводящая к дополнительному измельчению растительных частиц и, как следствие,ухудшениюихдиагностичности.Одновременнопроисходитрастворениемеда-вспомогательного склеивающего вещества. Дальнейшая обработка распавшихся пилюль(кипячение в 2,5 % растворе NaOH в течение 30-60 секунд) позволяет в щадящем режимеразмягчить и просветлить растительные ткани.
Промыванием просветленного растительногопорошка методом декантации удаляется растворенный мед, частично фрагменты оболочки имелкие (до 10 мкм) растительные частицы, не несущие диагностических признаков.При исследовании микропрепаратов видны:-фрагменты мицелия гриба в виде бесцветных аморфных образований, состоящих избеспорядочно переплетенных гифов (рис. 103А) (склероции пории кокосовидной);-фрагменты эпидермиса, состоящие из удлиненных клеток с прямыми равномерноутолщенными стенками, устьица овальные крупные длиной 45 мкм, шириной 25 мкм с узкойустьичной щелью, окруженные как правило 4 эпидермальными клетками (устьица могутвстречаться изолированно) (Рис.
102); обрывки мощных механических волокон, одиночных илив собранных в группы по 1-7; волокна прямые с очень толстыми стенками и узкой, едвазаметной полостью (Рис. 102) (трава эфедры);-обрывки эпидермиса листа, состоящего из полигональных прямостенных клеток;обломки простых многоклеточных толстостенных грубобородавчатых волосков (травакопытня);-участки рыхлой крупноклеточной паренхимы, состоящей из округлых тонкостенныхклеток с рафидами оксалата кальция (рис.
101); фрагменты сосудов древесины со спиральным икольчатым вторичным утолщением клеточных стенок (корневища ариземы);-группы волокон с кристаллоносной обкладкой из призматических кристалловоксалата кальция (рис. 103А) (корни солодки);-коричневые волокна веретеновидной формы с толстыми пористыми стенками, узкойполостью и неровным контуром длиной до 300 мкм. (рис. 103Б) (побеги коричника);-фрагменты паренхимной ткани, состоящей из округлых или слегка удлиненныхклеток и содержащей друзы оксалата кальция размером 15-20 мкм (корни пиона);-одиночные друзы оксалата кальция (корни пиона, корневища лигустикума);-участкирыхлойкрупноклеточнойпаренхимы,скоричневымсодержимым(корневища сыти, корни атрактилодеса);-фрагменты паренхимной ткани с маслянистыми каплями (корни горечавки, корни213сапожниковии, трава копытня);-участки паренхимы с секреторными ходами коричневого цвета (корни атрактилодеса,корни сапожниковии);-тонкостенные каменистые клетки, округло-четырехугольной формы размером 60-90 мкм с ярко выраженными порами и их обломки (корни аконита Кармишеля, корни аконитаКузнецова, корни сапожниковии);-толстостенные каменистые клетки размером 50-90 мкм, одиночные и группами,округлой или удлиненной формы желтоватого цвета (побеги коричника, корни атрактилодеса,корни аконита Кузнецова);-мелкие (размер до 20 мкм) каменистые клетки с тонкими пористыми стенками,одиночные или небольшими группами (корневища сыти, побеги коричника);-группы длинных узкополостных механических волокон без пор в плотных ирасщепленных пучках (корневища ариземы, побеги коричника, корни солодки);-пористостенные механические волокна с разными по толщине клеточными стенками,одиночные и в группах (корни атрактилодеса, корневища лигустикума, корни аконитаКузнецова, корневища сыти);-фрагменты проводящей системы стеблей и черешков, состоящие из узкополостныхспиральных и лестничных сосудов, расположенных группами с прикрепленными к нимчастичносохранившимисямеханическимиволокнамииклеткамипаренхимы(морфологическая группа сырья травы (побеги);-фрагменты сосудов ксилемы – широких и узких с различной вторичнойутолщенностью клеточных стенок (пористые, сетчатые, лестничные) (морфологическая группасырья корни (корневища);-участки крупноклеточной паренхимы, состоящей из округлых или удлиненныхклеток с тонкими стенками (морфологическая группа - корни (корневища);-фрагменты пробки разных оттенков коричневого цвета, состоящие из пластовплоских изодиаметричных клеток с утолщенными стенками (морфологическая группа - корни(корневища);частицы.недиагностируемыерастительныефрагментыиминеральныебесформенные214АБРисунок 101.
Препарат «Долартрин». Ув. х100.А - фрагмент паренхимы корневищ ариземы с рафидами оксалата кальция.Б - порошок корневищ ариземы (менее 1,0 мм), клетки паренхимы с рафидой оксалата кальция.АБРисунок 102. Препарат «Долартрин». Ув. х100.А - фрагмент эпидермиса травы эфедры с устьицем.Б - порошок травы эфедры (менее 1,0 мм). фрагмент эпидермиса стебля с устьицем,механические волокна.215АБРисунок 103. Препарат «Долартрин». Ув. х100.А - фрагмент группы волокон с кристаллоносной обкладкой корня солодки, фрагментыплодового тела порииБ - механическое волокно побегов коричника.Как показали проведенные микроскопические исследования, при использованииразработанной пробоподготовки удается подтвердить подлинность 7 отдельных компонентовпрепарата "Долартрин" по присущим им специфическим диагностическим признакам (пориякокосовидная, трава эфедры, трава копытня, корневища ариземы, корни солодки, побегикоричника, корни пиона).Диагностика 10 оставшихся видов сырья вызывает значительные затруднения.
Вусловиях высокой дисперсности и при совместном присутствии корней и корневищ, иханатомические признаки являются малоспецифичными и не могут дать однозначного ответа оналичие того или иного компонента в препарате. Разработанная методика микроскопическогоисследования позволяет провести групповую дифференциацию отдельных составляющих.Удается выявить в препарате 7 компонентов, объединяемых в группы по сходномудиагностическому признаку (корневища лигустикума, корневища сыти, корни атрактилодеса,корни горечавки, корни сапожниковии, корни аконита Кармишеля, корни аконита Кузнецова), атакже подтвердить наличие в препарате отдельных морфологических групп сырья (подземныеорганы (корни, корневища) и травы (побеги).Согласно выполненным расчетам частоты встречаемости анатомо-диагностическихпризнаков в микропрепаратах характерные для травы эфедры эпидермис, устьица и волокна, атакже мицеллий пории кокосовидной определяются в 100% случаев, группы волокон скристаллоносной обкладкой корня солодки – в 70%, верхний эпидермис листа травы копытня идрузы оксалата кальция корней пиона – в 50%, веретеновидные волокна побегов коричника – в21630%, рафиды оксалата кальция корневищ ариземы – в 20%.Сходные диагностические признаки, характерные для нескольких видов сырьявстречаются со следующей частотой: группы механических волокон – в 90%; округлочетырехугольные каменистые клетки - в 70% микропрепаратов; толстостенные каменистыеклетки - в 40%; паренхима с коричневым содержимым – в 20%; паренхима с маслянистымикаплями – в 20%; мелкие каменистые клетки – в 20%.Малоспецифичные диагностические признаки, характерные сразу для всей морфологическойгруппы сырья корни (корневища) и травы (побеги) встречаются в 100% микропрепаратов.Такимобразом,пробоподготовкакврезультатемикроскопическомупроведенныхисследованийанализу пилюльбыла"Долартрин"иразработанаопределеныхарактеристики подлинности растительных копмпонентов, входящих в его состав.5.3.4.
Пилюли «Глибедин»Лекарственное средство - пилюли "Глибедин" фармацевтической акционерной компании"Цисин Лтд." представляет собой комплексный препарат, содержащий в своем составе 8компонентов, 7 из них природного происхождения: 4 – растительные экстракты, 3 - порошкилекарственного растительного сырья (корни астрагала перепончатого – 41,6%, корневищадиоскореи супротивной и плоды лимонника китайского - по 10,4%). В качествевспомогательных веществ используются тальк, окись железа, декстрин, входящие в составоболочки.Целью исследования явилась разработка пробоподготовки и подбор оптимальныхусловий для проведения микроскопического анализа препарата.Приготовление микропрепаратов из измельченных пилюль по методике ГФ ХI (напредметном стекле) не позволяет различить среди общей склеенной массы отдельныерастительные частицы и выделить ключевые диагностические элементы их анатомическогостроения.Предварительный микроскопический анализ пилюль "Глибедин" выявил достаточновысокую дисперсность растительных порошков, входящих в его состав (3-150 мкм).Измельчение сырья до такого размера частиц может привести к потере многих диагностическихпризнаков и затруднить идентификацию растительного сырья.В связи с этим встает вопрос об оптимальном выборе способа измельчения пилюль входе пробоподготовки.