Диссертация (1139722), страница 41
Текст из файла (страница 41)
Затем освобожденные от оболочки драже (ядра)пинцетом переносят в другой химический стакан, избегая попадания частиц оболочки (принеобходимости их удаляют, смывая водой). К ядрам приливают 5 мл теплой воды (40-50оС) ипокачивают стакан до полного их разрушения. После чего приливают 5 мл 2 % раствора NaOHи кипятят на плитке в течение 30-60 секунд. Затем порошок промывают водой методомдекантации 3-5 раз при условии максимального осаждения (не менее 5 минут) частиц.Последний раз жидкость медленно сливают, оставляя около 1 мл.
Затем скальпелем илилопаточкой осторожно (поднимая по стенке стакана) порошок переносят на предметное стеклов каплю включающей жидкости (глицерин-вода (1:1) или раствор хлоралгидрата), равномернораспределяют порошок в капле препаравальной иглой, накрывают покровным стеклом иисследуют под микроскопом. В случае необходимости (при наличии пузырьков воздуха)препараты прогревают над пламени горелки. Делают 20-30 микропрепаратов.Описанная методика пробоподготовки позволяет предварительно разрушить и удалитьоболочку драже. Для этого используется дистиллированная вода t 40-50оС. Деструкция ядердостигается за счет их собственной распадаемости в теплой воде и тем самым исключаетсястадия разрушения ядра путем растирания, приводящая к дополнительному измельчениюрастительных частиц и, как следствие, ухудшению их диагностичности.
Одновременно203происходит растворение лактозы и глюкозы - вспомогательных веществ-наполнителей.Дальнейшая обработка распавшегося ядра драже (кипячение в 1 % растворе NaOH в течение 3060 секунд) позволяет в щадящем режиме размягчить и просветлить растительные ткани,растворить кукурузный и картофельный крахмал, затрудняющий детальное микроскопическоеизучение, особенно в набухшем состоянии. Промыванием просветленного растительногопорошка методом декантации удаляется растворенный крахмал, стеариновая кислота и мелкие(до 10 мкм) растительные частицы, не несущие диагностических признаков.В результате изучения полученных микропрепаратов была выявлена следующаямикроскопическая картина.В поле зрения наблюдается обилие механических растительных тканей в основномволокнистой структуры. Часть из них можно соотнести с волокнами жилок листа грецкогоореха, встречающихся в виде крупных групп, разрозненных волокон и частично в виденебольших пучков по 2-3 волокна.
Их отличает: неровный контур, разветвляющиесяклювовидные или плавнозаостряющиеся концы, иногда пористые стенки. Крупные группыволокон и участки жилок часто сопровождаются кристаллическими образованиями оксалатакальция в виде призматических кристаллов, плохо сформированных или тупоконечных друз.Второй тип волокон можно соотнести с волокнами коры дуба. Их отличительнаяособенность - наличие частично сохранившейся кристаллоносной обкладки из призматических(почти кубических) кристаллов оксалата кальция и меньший диаметр по сравнению сволокнами жилок листа грецкого ореха. Волокна коры дуба наблюдаются в небольших группахили одиночно.Третий тип волокон можно соотнести с волокнами корня алтея.
Они длиннее, с болеетонкими стенками и значительно мягче (легче сминаются, перекручиваются и расщепляются).Кроме того, они лишены кристаллоносной обкладки, обладают ровным контуром и, какправило, плавно заострены на концах.В поле зрения микроскопа характерно также наличие значительного количестваэлементов травы хвоща. Это - обрывки эпидермиса с удлиненными клетками, мелкоизвилистыестенки которых образуют ажурный контур; характерные устьица с лучистой складчатойкутикулой; фрагменты стеблевых ребер с зубчатым краем.Под микроскопом также видны частицы деструктурированного мезофилла листагрецкого ореха красновато-коричневого цвета с крупными тупоконечными друзами оксалатакальция.204Хорошо различаются разновеликие компактные плотные группы каменистых клеток иотдельные изодиаметричные склереиды коры дуба.
В некоторых из них видны поры и краснокоричневое содержимое.Значительно реже в поле зрения встречаются элементы корня алтея: небольшие группыпаренхимных клеток (иногда с небольшими остроконечными друзами) и обрывки членистыхсосудов ксилемы с преобладающим сетчато-пористым вторичным утолщением стенок.Редко обнаруживаются одиночные простые остроконечные волоски (из пучковыхволосков) листа грецкого ореха или их обломки, имеющие гладкую поверхность, ампуловиднорасширенное основание и полость, заполненную коричневатым аморфным содержимым.Также редко в поле зрения микроскопа встречаются элементы цветка ромашки.
Восновном это - фрагменты оснований трубчатых цветков с тонкой эпидермальной структуройвенчика, характерными для астровых овальными эфирно-масличными железками (вид сверху) имелкими друзами оксалата кальция в мезофилле; а также кольцеобразные основания трубчатыхцветков, состоящие из квадратных толстостенных клеток.Чрезвычайноредковстречаютсязеленоватыефрагментылистовойпластинкиодуванчика с поверхности, а иногда в продольном сечении с заметными по зернистомусодержимому тонкими млечниками, сопровождающими жилки.С большим трудом обнаруживаются элементы травы тысячелистника с овальнымихарактерными для астровых железками и бичевидными волосками и их обломками.В этой связи для разработки точных микроскопических критериев подлинности драже"Тонзилгон Н" нами была приготовлена и проанализирована модельная растительная смесь,максимально приближенная по составу и дисперсности к анализируемой растительнойкомбинации препарата.
Для этого использовалось стандартное сырье, измельченное в ступке доразмера частиц менее 100 мкм.В результате исследования приготовленных из модельной смеси микропрепаратов былиобнаружены и идентифицированы по характерным анатомо-диагностическим признакам всевходящие в ее состав растительные компоненты.Обобщив вышеизложенные результаты проведенных исследований были предложеныследующие микроскопические критерии подлинности драже "Тонзилгон Н":- фрагменты мезофилла листа с друзами оксалата кальция; одиночные крупные друзы;коричневые участки жилок, сопровождающиеся цепочками призматических кристаллов, плохооформленных и тупоконечных друз; одиночные простые остроконечные толстостенныеволоски (из пучковых волосков), имеющие гладкую поверхность, ампуловидное расширенное205основание и полость, заполненную коричневатым аморфным содержимым и их фрагменты(листья грецкого ореха);- участки эпидермиса, состоящего из удлиненных мелкоизвилистых клеток; устьица случистой складчатой кутикулой; фрагменты стеблевых ребер с зубчатым краем (рис.
98Б)(трава хвоща);- обрывки групп волокон или отдельные волокна (часто смятые, перекрученные ирасщепленные); группы округлых или овальных паренхимных клеток (иногда с небольшимиостроконечными друзами); обрывки членистых сосудов ксилемы с преобладающим сетчатопористым вторичным утолщением стенок (корень алтея);- фрагменты трубчатых цветков с извилистыми тонкостенными клетками, характернымидля астровых овальными эфирно-масличными железками и мелкими друзами оксалата кальцияв мезофилле; кольцеобразные основания трубчатых цветков, состоящие из квадратныхтолстостенных клеток (цветки ромашки);- группы волокон или отдельные волокна с частично сохранившейся кристаллоноснойобкладкой из призматических (почти кубических) кристаллов оксалата кальция (рис. 98А);компактные плотные группы каменистых клеток и отдельные изодиаметричные склереиды(иногда в них видны поры и красно-коричневое содержимое); окрашенные фрагменты коровойпаренхимы с друзами оксалата кальция (кора дуба);- очень редко в поле зрения наблюдаются фрагменты эпидермиса листа с удлиненнымиизвилистостенными клетками, крупными округлыми устьицами (аномоцитный тип), овальнымиэфирно-масличными железками (характерными для астровых), складчатой кутикулой имногоклеточными основаниями отломанных "бичевидных" волосков; участки листочковобвертки, состоящие из волокнообразных сигаровидных пористостенных клеток; элементыстебля (участки прямостенного эпидермиса с обломками волосков, обрывки проводящих имеханических тканей) (трава тысячелистника);- очень редко в поле зрения наблюдаются фрагменты листа в продольном сечении стонкими сероватыми или оранжевыми (Судан III) млечниками вдоль жилок, обладающимизернистым содержимым; простые многоклеточные тонкостенные волоски, иногда соспавшимися стенками и их обломки (трава одуванчика);- многочисленные недиагностируемые растительные фрагменты и минеральныебесформенные частицы.206АБРисунок 99.
Анатомо-диагностические признаки ЛРС в драже «Тонзилгон». Ув.х400.А - группа лубяных волокон с кристаллоносной обкладкой коры дуба.Б - фрагмент стеблевого ребра с зубчатым краем травы хвоща.В ходе проведения микроскопического анализа диагностика растительных компонентовдраже "Тонзилгон Н" осуществляется не по всем, а только по сохранившимся в результатеиспользуемой технологии измельчения сырья, наиболее устойчивым анатомо-диагностическимпризнакам (группы волокон, сосуды, кристаллические включения, толстостенные трихомы,кремнесодержащие ткани).Вместе с тем часть диагностически значимых элементов теряет свое значение (строениеэпидермиса листьев, цветков; тонкостенные волоски), а для травы тысячелистника и травыодуванчикаобнаружениеиидентификациядиагностическихпризнаковвданномлекарственном средстве чрезвычайно затруднены.5.3.2.
Драже "Канефрон Н".Драже "Канефрон Н" (Бионорика) является комплексным лекарственным средством исодержат в своем составе порошки 3-х видов лекарственного растительного сырья,обеспечивающих фармакологический эффект: листья розмарина (Folia Rosmarini), корнилюбистока (Radix Levistici), трава золототысячника (Herba Centaurii).Основу ядра драже составляют наполнители: кукурузный крахмал, двуокись кремния,лактоза, поливинилпиролидон, стеарат магния.
Содержание растительного сырья составляет41 %, а по каждому компоненту - менее 14 %. Приготовление микропрепаратов изизмельченного ядра драже по методике ГФ ХI (на предметном стекле) не позволяет различитьсреди общей массы минеральных и органических соединений растительные частицы ивыделить ключевые диагностические элементы их анатомического строения.207Предварительный микроскопический анализ драже "Канефрон Н" выявил достаточновысокую дисперсность растительных порошков, входящих в его состав (50-100 мкм).Измельчение сырья до такого размера частиц может привести к потере некоторыхдиагностических признаков и затруднить идентификацию растительного сырья.В связи с этим встает вопрос об оптимальном выборе способа измельчения драже в ходепробоподготовки.Наиболеечастоиспользуемыйметодмеханическогоразрушения(растирание) является не приемлемым, так как приводит к дополнительному измельчениюрастительных компонентов.
Кроме того, учитывая дисперсность растительных порошков, дляих просветления необходимо использовать щелочь меньшей концентрации, в противном случае(с 3% раствором NaOH) происходит мацерация эпидермальных тканей и колленхимы листьеврозмарина и золототосячника.Наличие оболочки у драже "Канефрон Н" создает дополнительные трудности приполучении качественных препаратов.Учитываявсевышесказанное,быларазработанаспециальнаяметодикапробоподготовки, позволяющая полностью удалить оболочку драже, максимально освободитьрастительный компонент от сопутствующих веществ, а также разрушить ядро и просветлитьрастительные порошки в щадящих условиях.Пробоподготовка драже "Канефрон Н" к микроскопическому анализу.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
