Диссертация (1139722), страница 37
Текст из файла (страница 37)
могут добавляться различные вспомогательные вещества. Так как ихсодержание, как правило, не превышает 40 %, они не будут мешать проведениюмикроскопического анализа. Вместе с тем, некоторые изнихмогут формироватьспецифическую анатомическую картину, обусловливая наличие и характер диагностическихпризнаков при определении подлинности таблеток методом микроскопического анализа. В этой182связи, одной из задач нашего исследования было выявление диагностической значимостинаиболее распространенных вспомогательных веществ, используемых в технологии получениятаблетированных растительных порошков.В исследованиях были использованы таблетки листьев крапивы, листьев брусники,листьев толокнянки, плодов аронии, луковиц чеснока, полученные из криопорошков данныхвидов ЛРС совместно с кафедрой общей фармацевтической и биомедицинской технологииММА им.
И. М. Сеченова методом прямого прессования с применением вспомогательныхвеществ.5.1.1. Таблетки листьев крапивыМетодикаопределениямикроскопическогоанализаподлинноститаблетокразрабатываласьдлялистьевкрапивылекарственныхспомощьюсредств,имеющихследующий состав:листья крапивы(порошок криогенного измельчения)0,5крахмал картофельный0,015тальк0,015МКЦ0,05Предварительное изучение микропрепаратов, изготовленных непосредственно изтаблеточной смеси по методике ГФ XI для порошкованного сырья [169] не дало желаемыхрезультатов. В поле зрения микроскопа были видны многочисленные пузырьки воздуха,округлые зерна картофельного крахмала, плотные непросветленные недеференцируемыечастицы и их конгломераты.В результате дальнейших исследований была предложена следующая методика:Четверть таблетки помещали в химический стакан, добавляли 5 мл воды и разрушалитаблетку при помощи стеклянной палочки.
Затем приливали 5 мл 5%-ного раствора натриягидроксида и кипятили в течение 1-2 минут. После чего растительный порошок промывалидистиллированной водой методом декантации, сменяя ее 4-5 раз. Затем скальпелем илилопаточкой растительный порошок помещали на предметное стекло в каплю включающейжидкости, накрывают покровным стеклом и рассматривали в микроскоп.В поле зрения видны фрагменты листовой пластинки с поверхности с многочисленнымицистолитами, цельными, расколотыми и обломанными жгучими и ретортовидными волосками(рис. 89), а также головчатыми волосками, которые встречаются значительно реже; фрагментыкрупных жилок и черешков с цепочками мелких друз оксалата кальция вдоль спиральных183сосудов;используемаявкачествевспомогательноговеществамикрокристаллическаяцеллюлоза (рис.
89), представляющая собой бесцветные прозрачные желобоватые палочкидлиной 35-140 мкм и шириной 15-20 мкм, которые могут быть надломлены и расщеплены.Кристаллы МКЦ в микропрепарате встречаются как одиночно, так и в виде комкообразныхскоплений.Рисунок 89. Таблетки листьев крапивы. Ув. х90.Обломок жгучего волоска. Фрагмент листовой пластинки с цистолитами5.1.2. Таблетки листьев толокнянкиМетодика определения подлинности таблеток листьев толокнянки с помощьюмикроскопическогоанализаразрабатываласьдлялекарственныхсредств,имеющихследующий состав:листья толокнянки(порошок криогенного измельчения)0,12аэросил0,016стеарат Са0,002крахмал картофельный0,04МКЦ0,02В результате проведенных исследований была предложена следующая методика:Половину таблетки помещали в химический стакан, добавляли 25-30 мл воды иразрушали таблетку при помощи стеклянной палочки. Затем полученный порошок кипятили сводой 5-10 минут (во избежании выкипания жидкости стакан накрывали стеклом).
После чегодоливали в стакан дистиллированную воду и после осаждения частиц ее сливали, добавляли 2530 мл воды и снова кипятили 5-10 минут. Операцию повторяли 4-5 раз. Последний разжидкость сливали таким образом, чтобы в стакане осталось около 5 мл, приливали 5 мл 5%ного раствора натрия гидроксида и кипятили в течение 1-2 минут. После чего растительныйпорошок промывали дистиллированной водой методом декантации, сменяя ее 4-5 раз.
Затем184скальпелем или лопаточкой растительный порошок помещали на предметное стекло в каплювключающей жидкости, накрывают покровным стеклом и рассматривали в микроскоп.Особенностью данной методики является стадия просветления порошка, котораязаключается в предварительном максимальном удалении водорастворимых фенольныхсоединений путем их многократной экстракции кипящей водой. Эта стадия предотвращаетобразование темноокрашенных фенолятов, мешающих детальному изучению растительныхчастиц. Окончательное просветление порошка достигается кипячением в слабом растворегидроксида натрия в течение небольшого промежутка времени и сводит к минимумуотрицательное воздействие щелочи на растительные ткани, неизбежное при традиционномпросветлении порошка кожистых листьев, включенном в ГФ ХI (кипячение в 5 % раствореNaOH), в результате которого клетки мезофилла листа подвергаются сильной мацерации ипрактически полностью разрушаются.
Изменению подвергается и эпидермис, на поверхностикоторого образуются капли гидролизованной кутикулы.Предложенный нами способ обработки таблеточной массы приводит к растворению иудалению крахмала, используемого в качестве вспомогательного вещества и затрудняющегоанализ. Небольшие количества аэросила и стеарата кальция, входящих в состав таблеток, несмачиваются водой и, оставаясь на ее поверхности, удаляются при декантации, тогда каккристаллы микрокристаллической целлюлозы (МКЦ) от частиц растительного порошка неотделяются и являются дополнительным диагностическим признаком в микроскопии таблетоктолокнянки.В ходе исследований разработана микроскопия таблеток листьев толокнянки: в полезрения видны фрагменты верхнего и нижнего эпидермиса листа, состоящие из полигональныхклеток, реже - наджилочный или черешковый эпидермис, который состоит из четырехугольныхклеток.
Эпидермис листа в результате прессования подвергается значительной деформации отсутствует четкое очертание клеточных стенок; кутикула растрескивается, а иногда,сворачиваясь, слущивается. Устьица, группами расположенные на нижней стороне листа, такжедеформируются и имеют как бы "сплющенный" вид. Под микроскопом видны также фрагментымезофилла листа в поперечном сечении (рис. 90). В клетках паренхимы наблюдается большоеколичество кристаллов оксалата кальция различной формы (ромбические, призматические,кубические, в виде плохо оформленных друз), часто образующих вдоль жилок скопления в видецепочек. Кроме того, диагностическое значение в таблетках имеют кристаллы МКЦ,встречаются как одиночно, так и в виде комкообразных скоплений.185Рисунок 90.
Таблетки листьев толокнянки. Ув. х90.Фрагмент листа в поперечном сеченииИз общей картины диагностических признаков частички МКЦ позволяет выделитькачественная реакция с хлор-цинк-иодом:Небольшое количество сухой просветленной таблеточной смеси помещают напредметное стекло в каплю хлор-цинк-иода, накрывают покровным стеклом, слегканадавливают обратной стороной препаравальной иглы и рассматривают в микроскоп.Наблюдают кристаллы МКЦ, окрашенные в сине-феолетовый цвет (рис.
60).5.1.3. Таблетки листьев брусникиМетодикаопределениямикроскопическогоанализаподлинноститаблетокразрабатываласьдлялистьевбрусникилекарственныхспомощьюсредств,имеющихследующий состав:листья брусники(порошок криогенного измельчения)0,2аэросил0,015стеарат Са0,002крахмал картофельный0,08Сходство анатомического строения и химического состава листьев брусники итолокнянки объясняет использование одинаковых методик микроскопического анализа длятаблеток из данных видов сырья.В микроскопической картине таблеток листьев брусники преобладают фрагментылистовой пластинки, расщепленные вдоль.
Кусочки верхней стороны листа имеют эпидермис,лишенный устьиц и состоящий из полигональных клеток со слабоизвилистыми клеточнымистенками, с подстилающей его палисадной паренхимой (рис. 91). В отличии от толокнянки186частички нижней стороны листа брусники имеют эпидермис с парацитным типом устьичногокомплекса и хорошо заметную подстилающую его губчатую паренхиму с крупнымимежклетниками. На черешковом эпидермисе, состоящем из небольших четырехугольныхклеток изредка встречаются круглые валики - места прикрепления волосков (рис. 90).Эпидермис кусочков листа нередко имеет разрывы, трещины, полученные в результатепрессования таблетки.
Характерные булавовидные железки в основном обломаны, сохраняютсятолько их основания, которые можно наблюдать в виде многоклеточных буроватых "пеньков"на нижнем эпидермисе (рис. 91). Кроме того в поле зрения микроскопа видны обрывкиразветвленных жилок листа, мощная обкладка волокон которых расплющена вследствиепрессования. Редко встречаются группы друз оксалата кальция, располагающихся, как правило,россыпью вблизи черешковых частей листа.Рисунок 91. Таблетки листьев брусникиФрагменты эпидермиса и механических элементов листа. Ув. х90.5.1.4. Таблетки плодов аронииМетодикамикроскопическогоопределенияподлинностианализаразрабатываласьтаблетокдляплодоварониилекарственныхследующий состав:плоды аронии(порошок криогенного измельчения)0,5крахмал картофельный0,015тальк0,015МКЦ0,05спомощьюсредств,имеющих187В поле зрения микроскопа видны следующие диагностические элементы: одиночные,реже группами цельные и расколотые каменистые клетки округлой и веретеновидной формы сразличной толщиной стенок, пронизанных многочисленными порами (рис.