Диссертация (1139722), страница 39
Текст из файла (страница 39)
гл. 4.2.), для полного и достоверного результата необходимо готовить не менее10 микропрепаратов, на двух-трех из которых рекомендуется провести гистохимическуюреакцию с раствором флороглюцина и концентрированной HCl, что позволит более детальнорассмотреть некоторые диагностические элементы.При микроскопическом изучении препаратов видны следующие диагностическиепризнаки: фрагменты волокнистых пучков, часто расщепленных, состоящих из обрывковволокон с сильно утолщенными стенками и узкой полостью (рис. 94Б); отдельные волокна и ихобрывки; группы волокон с остатками кристаллоносной обкладки в виде ромбовидныхусеченных кристаллов оксалата кальция, расположенных рядами вдоль волокон (чрезвычайноредко), одиночные кристаллы; обрывки пористых и сетчатых сосудов (корень солодки).
(Припроведении гистохимической реакции с раствором флороглюцина и концентрированной HClобрывки сосудов и крупные фрагменты волокнистых пучков корня солодки окрашиваются вкрасный цвет различной интенсивности.); обломки характерных толстостенных полых волосковс крупнобугристой поверхностью и зазубренным контуром; цельные терминальные клеткизазубренных и гладкостенных волосков (значительно реже); фрагменты эпидермиса листа сослабоизвилистыми стенками, иногда с местом прикрепления волоска в виде круглого валика(рис. 94Б); фрагменты спиральных сосудов и крупнополостных пористостенных волокон,окрашивающихсявкрасныйцветпослереакциисрастворомфлороглюцинаконцентрированной HCl (трава термопсиса).АБРисунок 94. Таблетки “Коделак”. Ув. х90.А - таблеточная смесь без пробоподготовки.Б - обрывки волокон корня солодки, фрагмент листовой пластинки термопсиса.и1935.2.2.
“Таблетки от кашля”В качестве объектов исследования использовались серийные образцы продукцииобъединений “Татхимфармпрепараты” и АООТ “Томский химико-фармацевтический завод”,имеющие следующий состав на одну таблетку:порошок травы термопсиса0,01гидрокарбонат натрия0,25крахмал картофельный0,0246тальк0,0054Предварительное изучение микропрепаратов, изготовленных непосредственно изтаблеточной смеси показало, что определить подлинность растительного компонента такимобразом не представляется возможным - в поле зрения микроскопа видны только разновеликиебесформенные кристаллы гидрокарбоната натрия и зерна картофельного крахмала (рис. 95А).Поэтомунамибыларазработанаметодика,включающаястадиюпробоподготовки,позволяющую освободиться от этих компонентов, входящих в состав таблетки.В химический стакан помещали 3 таблетки, к которым по каплям приливалихлористоводородную кислоту (1,5 моль/л) до прекращения выделения пузырьков газа.
Послечего в стакан добавляли 5 % раствор натрия гидроксида в объеме, равном полученному послереакции между натрия гидрокарбонатом и хлористоводородной кислотой и кипятили 1-1,5 мин.Затем растительный порошок трижды промывали дистиллированной водой по 40-50 млметодом декантации. Оставшийся порошок лопаточкой переносили в каплю включающейжидкости (раствора хлоралгидрата или глицерина), накрывали покровным стеклом ирассматривали в микроскоп.Использование в данной методике хлористоводородной кислоты позволяет полностьюрастворить натрия гидрокарбонат, не используя большого объема воды и тем самым полностьюсохранитьрастительныйпорошокдляпросветления.Исследованияпоказали,чтонецелесообразно проводить одновременное растворение натрия гидрокарбоната и просветлениерастительных частиц кипячением в растворе NaOH из-за обильного пенообразования вследсвиевыделения углекислого газа.В исследуемых микропрепаратах были обнаружены все основные диагностическиепризнаки, характерные для травы термопсиса (фрагменты эпидермиса с характернымиокруглыми валиками - местами прикрепления волосков, волоски с бугристой поверхностью иих обломки (рис.
95Б)). Однако в результате прессования растительных тканей с твердымикристаллами, имеющими острые края, анатомическая картина растительного порошка взначительной степени изменилась. Так, например, практически на каждом фрагменте листовой194пластинки сильно повреждена кутикула - она растрескивается, отслаивается, слущивается и ввиде бесформенных темных комочков наблюдается в поле зрения микроскопа. Толстостенныеволоски с крупнобугристой поверхностью практически все обломаны, раздавлены илирасщеплены.При сравнительном изучении микропрепаратов, полученных из таблеток Томского ХФЗи Объединения “Татхимфармпрепараты”, было установлено, что порошок травы термопсисаТомского завода имеет более высокую дисперсность, в результате чего диагностикарастительного компонента в таблетках этого предприятия вызывала наибольшие затруднения.При микроскопическом исследовании порошка травы термопсиса в "Таблетках откашля" промышленных серий двух фармацевтических объединений были, кроме того,обнаружены примесные частицы стеблей и листьев злаковых.АБРис.
95. Таблетки “От кашля”А - таблеточная смесь без пробоподготовки. Ув. х35.Б - фрагмент листовой пластинки термопсиса ланцетного, фрагмент волоска. Ув. х90.5.2.3. Таблетки “Викаир” и “Викалин”В качестве объектов исследования использовались серийные образцы продукцииобъединений “Львовфарм” и АООТ “Томский химико-фармацевтический завод”, имеющиеследующий состав на одну таблетку :“Викаир”“Викалин”0,35висмута нитрат основной0,350,40магния карбонат основной0,400,20натрия гидрокарбонат0,200,025порошок коры крушины0,0250,025порошок корневищ аира0,025-рутин0,005-келлин0,0051950,13крахмал картофельный0,07080,015тальк0,01420,005кальция стеарат0,015Определить подлинность растительных объектов в данных лекарственных средствахметодом микроскопического анализа, используя микропрепараты из измельченных таблеток пометодике ГФ XI для порошков не представляется возможным.
Частицы растительного сырья,составляющие всего 4 % в доле всех компонентов, в поле зрения микроскопа средикристаллических, аморфных образований, а так же крахмальных зерен обнаружить не удалось(рис. 96А). Поэтому основным этапом разрабатываемой нами методики стала стадияпробоподготовки, позволяющая освободиться от лекарственных и вспомогательных веществ,входящих в состав таблеток.В результате проведенных исследований нами была предложена следующая методика.В химический стакан емкостью 50 мл помещали таблетку, приливали 10 мл разведеннойазотной кислоты [40], после прекращения выделения пузырьков газа приливали 40 млдистиллированной воды. Через 1 минуту сливали надосадочную жидкость. Затем доливали40 мл воды и вновь сливали надосадочную жидкость, оставляя в стакане около 10-20 мл,доводили до кипения и кипятили в течение 1 минуты.
После чего порошок промывали водойметодом декантации до нейтральной реакции среды (сменяя воду 3-4 раза по 30-40 мл).Последний раз жидкость сливали, оставляя около 5 мл, приливали 5 мл 5 % раствора едкойщелочи и кипятили 30-60 секунд. После чего порошок промывали водой методом декантациипри условии максимального осаждения частиц (осаждать не менее 5 минут).
Немногопромытого порошка лопаточкой или скальпелем вносили в каплю включающей жидкости(глицерин-вода 1:1) и накрывали покровным стеклом.Применение в данной методике разведенной азотной кислоты позволяет растворитьминеральные вещества, входящие в состав препаратов. После удаления солей, переведенных вионную форму, и разбавления разведенной азотной кислоты (концентрация HNO3 становитсяоколо 1 %) при нагревании гидролизуется картофельный крахмал, разрушается келлин, и в тоже время не оказывается существенного влияния на растительные ткани (значительноймацерации не происходит).
Последующее кипячение растительных объектов в щелочномрастворе позволяет удалить рутин, входящий в состав “Викалина”, окончательно размягчить ипросветлить растительные ткани, что улучшает качество изготовляемого препарата.Примикроскопическомисследованиивыделенногопорошкавиднычастицырастительных тканей. Кора крушины диагностируется по следующим анатомическимобразованиям: фрагментам пучков лубяных волокон с кристаллоносной обкладкой (рис. 96Б),196фрагментам коровой паренхимы, состоящей из прямоугольных клеток без межклетников, снеравномерно утолщенными клеточными стенками и округлых клеток серцевинных лучей.Корневища аира можно идентифицировать по фрагментам основной паренхимы,состоящей из округлых или овальных клеток с характерными межклетниками, по клеткамидиобластам с дубильными веществами коричневого цвета, фрагментам проводящих пучков,сосуды которых имеют различную вторичную утолщенность клеточных стенок (кольчатую,спиральную, лесничную, сетчатую), обрывкам волокнистых пучков.Следует отметить, что в структуре анатомо-диагностических элементов коры крушины икорневищаиранаблюдаютсянекоторыеизменения.Растительныетканивследствиевоздействия минеральной кислоты частично (обкладка лубяных волокон) или полностью(друзы в паренхиме коры) лишаются кристаллических образований оксалата кальция.В поле зрения микроскопа видны также частицы талька, который используется каквспомогательное вещество и представляет собой бесцветные, прозрачные, бесформенныекристаллические образования.АБРисунок 96.
Таблетки “Викаир”. Ув. х90.А - Таблеточная смесь без пробоподготовкиБ - фрагмент волокнистого пучка коры крушины, фрагмент проводящего пучка корневища аира5.2.4. Таблетки “Аллохол”, покрытые оболочкойВ качестве объектов исследования использовались серийные образцы продукцииобъединений “Дарница”, “Мосхимфармпрепараты” им. Н.А.Семашко и АООТ “Томскийхимико-фармацевтический завод”, имеющие следующий состав на одну таблетку:желчь сухая0,08порошок луковиц чеснока0,04порошок листьев крапивы0,005уголь активированный0,025197MgO0,02стеарат Са0,002крахмал картофельный0,0318тальк0,003аэросил0,0032Оболочка таблеток и активированный уголь, входящие в состав “Аллохола”, делаютневозможнымидентификациюмикроскопическомисследованиирастительныхтаблеточнойкомпонентовмассы.приПоэтомунепосредственномосновнымэтапомразрабатываемой нами методики стала стадия пробоподготовки, позволяющая освободиться отлекарственных и вспомогательных веществ таблетки и ее оболочки.В результате проведенных исследований нами была предложена следующая методика.В плоскодонную колбу или химический стакан помещали 3 таблетки, заливали 25 млдистиллированной воды и помешивали в течение 1-2 минут.
После чего жидкость сливали и ктаблеткам вновь добавляли 25 мл дистиллированной воды. Операцию повторяли 3-5 раз дополного разрушения и удаления оболочки таблеток. Освобожденные от оболочки таблетки(имеющие черный цвет с белыми вкраплениями) заливали 25 мл дистиллированной воды иоставляли до полного разрушения. Распавшиеся таблетки в виде взвеси переносили на сито сдиаметром отверстий 0,25 мм и промывали водой до полного удаления активированного угля.Оставшиеся на сите зеленые и беловатые кусочки (листья крапивы и луковицы чеснока)отбирали с помощью скальпеля и препаравальных игл, помещали в 3-5% раствор едкой щелочии кипятили в течение 1-2 минут, после чего промывали водой, помещали на предметное стеклов каплю раствора хлоралгидрата или глицерина, накрывали покровным стеклом ирассматривали в микроскоп.
В исследуемом объекте определялись все диагностическиепризнаки, характерные для листа крапивы и очищенных луковиц чеснока (рис. 96А, 96Б).Однако, следует отметить, что в результате прессования фактически все жгучие и некоторыеретортовидные волоски листа крапивы были обломаны или расколоты, друзы оксалата кальцияпо крупным жилкам могут быть раздавлены.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
