Диссертация (1139719), страница 58
Текст из файла (страница 58)
168. Зависимость оптической плотности раствора от содержания суммы АК в пересчете накислоту глутаминовую (г×10-4) в извлечении из листьев крапивы двудомнойПовторяемость методики (внутрилабораторная воспроизводимость) определяли в условиях, описанных в литературе [21]. Вычисленные значения RSD – 0,97% и относительного доверительного интервала среднего значения – 1,02% не превышают критериев приемлемости - 5%,что свидетельствует о прецизионности методики в условиях повторяемости (таблица 200).Для выбора наилучшего способа выделения АК из изучаемого ЛРС в домашних условиях,проводили также количественное определение суммы свободных АК в настое (таблица 201).Настой из ЛРС получали по правилам изготовления согласно ОФС ГФ XIII изд., а также согласно инструкции на упаковке.Данные таблицы 201 свидетельствуют, что в качестве источника АК, оптимальным является применение настоя из листьев крапивы двудомной, полученного по ГФ XIII.
В последнее время в научной литературе уделяется большое внимание способам интенсификации выделения БАВ различной природы из ЛРС с целью получения более обогащенных БАВ извлечений307и фитопрепаратов. В качестве такого приема можно рассматривать ультразвуковое воздействие[214].Таблица 200Результаты валидации методики количественного спектрофотометрического определения суммы свободных АК в пересчете на кислоту глутаминовую в листьях крапивы двудомной [311]Статистические характеристикиРезультатыОценка линейности методикиУравнение регрессииу=0,0537х+0,02192R0,9962Диапазон линейности (грамм БАВ в пересчете на1,12 – 16,79×10-4кислоту глутаминовую в 1 мл раствора)Оценка прецизионности методики по показателю сходимостьпроба123456Оптическая плотность0,5800,5820,5720,5680,5740,570Минимальное значение, %Максимальное значение, %Среднее значение, %Значение доверительного интервала (Р=95%), %SD, %RSD, %Предел определения, гКоличество грамм БАВ в пересчете на кислоту глутаминовую в 1 мл раствораНайдено суммы АК, %5,57275,59195,49585,45745,51515,47665,45745,59195,51835,5183±0,056195,46211 – 5,574490,053550,971,119×10-3Таблица 201Сравнительная оценка содержания суммы свободных АК в извлечениях при различных способах приготовления [311]№ п/пСпособ приготовленияНайдено АК, %1Настой по ОФС ГФ XIII0,1458±0,001482Извлечение по методике автора0,0994±0,001013Получение настоя как указано на упаковке0,1154±0,00117Для сравнительного исследования влияния способа экстракции на выход АК, извлеченияготовили, как описано ранее.
В одном случае, колбу присоединяли к обратному холодильнику,нагревали на кипящей водяной бане, периодически встряхивая для смывания частиц сырья состенок (экстракт 1). В другом, колбу помещали в ультразвуковую баню при температуре 85±5°С (экстракт 2). Для исследований применялся аппарат: ультразвуковая ванна «Град 40-35»(ЗАО «Град-Технолоджи», Россия).
Для процесса экстракции был определен режим ультразвуковой обработки: частота 50-60 Гц, мощность 180 Вт.308Количественное определение суммы АК в пересчете на кислоту глутаминовую в экстрактах проводили по методике, описанной выше (п. 6.7). Содержание суммы свободных АК влистьях крапивы двудомной (в пересчете на абсолютно сухое сырье) составило 6,69% (экстракт1) и 6,23% (экстракт 2). Полученные результаты оказались сопоставимыми и не показали значительного эффекта увеличения содержания суммы свободных АК при интенсификации процесса экстракции по средствам ультразвука [27].6.2.5. Определение антиоксидантной активности водно-спиртовых извлечений из листьевкрапивы двудомнойВ последнее десятилетие проявляется большой интерес к определению АОА ЛП, в томчисле ФП, ЛРС и входящих в их состав БАВ.
Однако, информации об АОА листьев крапивы ипрепаратов на ее основе, изготовленных как в домашних условиях, так и в условиях заводскогопроизводства, в научной литературе не обнаружено.Извлечения готовили путем нагревания ЛРС с экстрагентом в соотношении 1,5:100 наводяной бане с обратным холодильником в течение 20 минут. Полученные извлечения декантировали с остатка сырья и фильтровали через бумажный фильтр, отбрасывая первые порциифильтрата. Для оценки влияния полярности экстрагента на АОА получаемого извлечения использовали воду, 40 %, 70 % и 95% этиловый спирт.
Полученные извлечения представляет собой сложную смесь БАВ, а также сопутствующих компонентов, извлекаемых из сырья в ходеэкстракции [7].АОА определяли титриметрически по методике, разработанной Максимовой Т.В. с соавторами [196]. В качестве растворов сравнения использовали такие известные АО, как кверцетини рутин. Результаты представлены в таблице 202.Таблица 202АОА водных и водно-спиртовых извлечений из листьев крапивы двудомной (n=6, Р=95%) [7]№п/пЭкстрагент1234Вода40% этанол70% этанол96% этанолАОА, мг/гв пересчете нав пересчете накверцетинрутин8,43±0,3817,80±0,8111,84±0,5425,00±1,1413,92±0,6329,38±1,3415,57±0,7132,87±1,49Установлено, что наибольшее содержание АО в извлечении наблюдается при использовании 96 % этанола в качестве экстрагента.
Полученные данные согласуются с результатами,свидетельствующими о наибольшем выходе флавоноидов и токоферолов – известных природ-309ных АО в извлечение при использовании данного растворителя. Статистическая обработка результатов определения АОА водных и водно-спиртовых извлечений из листьев крапивы двудомной представлена в таблице 203.Таблица 203Метрологическая оценка методики определения АОА (P = 95 %; n = 6) [7]S20,262xср11,84S0,512Sxcp0,209∆x1,32∆xcp0,54ε, %11,11εср, %4,55Оценивая влияние полярности экстрагента на значение суммарной АОА полученных извлечений (рис. 169), выявлена обратно пропорциональная зависимость величины АОА от полярности экстрагента. Полученная зависимость позволит определить АОА извлечений, полученных с применением экстрагентов различной полярности. Уравнение линейной зависимостиАОА в пересчете на кверцетин, мг/ги коэффициент корреляции приведены на рис. 169.1612y = -2,35x + 18,315R2 = 0,97138405,26,347,489Полярность экстрагента (Р), ед.
пол.Рис. 169. Влияние полярности экстрагента на АОА извлечений из листьев крапивы двудомнойАОА извлечений также изучали по их способности ингибировать аутоокисление адреналина in vitro и тем самым предотвращать образование активных форм кислорода. ВеличинаАОА, определенная этим методом (52,45 %), описанным в литературе [165,171,267], более 10 %свидетельствует о наличии АОА (рис. 170).31092,96АОА , %10088,2880605052,4553,864020Листья шалфеялекарственногоТрава зверобояпродырявленногоПлоды облепихиЛистья крапивыдвудомнойТрава мятыперечной0Рис.
170. Значения АОА различных растительных объектов [7]Полученные данные свидетельствует о перспективности использования данного видаЛРС и препаратов на его основе в практической медицине в качестве источника АО.6.2.6. Определение микроэлементов магния и кальция методом комплексонометрииОсновное применение сырья крапивы двудомной и препаратов на его основе находит вкачестве кровоостанавливающего средства. Данный фармакологический эффект ассоциируется,в основном, с содержащимися в листьях крапивы жирорастворимыми витаминами группы К[91,346]. Однако, известно также, что наряду с филлохиноном, в крапиве содержится значительное количество солей кальция, сопровождающих проводящие пучки растения, в виде кристаллоносной обкладки из друз оксалата [243,252,253,257].Минеральный состав растений устанавливают в основном методом ААС после сухогоили мокрого озоления.
Известными учеными ПМГМУ им. И.М. Сеченова в области фармакогнозии предложена и запатентована методика количественного определения кальция и магния в ЛРС методом комплексонометрии [51,199,252,253,257].Полноту экстракции кальция и магния из листьев крапивы двудомной устанавливали наосновании экспериментальных данных о влиянии размера частиц сырья, соотношения сырья иэкстрагента, оптимального времени и кратности экстракции (рис.
171-173, таблица 204), а такжерН-экстрагента на выход элементов в извлечение (таблица 205).На выделение кальция и магния из ЛРС неоднозначным образом сказывается такой параметр, как размер частиц. При величине измельченности листьев крапивы менее 0,2 мм, лучшевсего экстрагируется магний. Наибольшее количество кальция в извлечении при этом наблюдается при использовании сырья с размером частиц от 0,5 до 2,0 мм (рис. 171).311Оптимальным экстрагентом для выделения кальция является вода очищенная. При использовании кислоты хлористоводородной разведенной почти в 2 раза возрастает выход магнияиз ЛРС, что может быть связано с разрушением хлорофиллов листьев в кислой среде.Содержание в сырье, %1,5Содержание магнияСодержание кальция10,500,20,512Размер частиц, ммРис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
